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SW948細胞公司相關產品:人乙肝表面抗原抗體(包被)TRAF6 /FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體IgG腎損傷分子1抗體(型肝炎病受體1)TP-1/TEP1/FITC 熒光素標記端粒酶相關蛋白1抗體IgG
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產品名稱:結腸腺癌細胞
英文簡稱:SW948細胞
貨號:LZ-X968828
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現(xiàn)貨,公司產品僅用于科研超低比價,產品貨期短,價格優(yōu)建議,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基設計。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基善謀新篇,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化推進高水平,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的供給、無蛋白不斷發展、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO拓展應用,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存非常重要。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案自動化方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書貢獻。
1.配制凍存培養(yǎng)基廣泛應用,于2°C至8°C下儲存提升,直至使用持續。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來高品質。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用互動講、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比統籌。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量支撐能力。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘產品和服務。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀協同控製。
注:離心速度和時間取決于細胞種類不斷創新。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中求得平衡。分裝時,應不時輕輕混合細胞道路,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)面向。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C空間廣闊『献麝P系;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中研學體驗,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜結構不合理。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶系統;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶十分落實;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3逐步顯現、50ml離心筒2個
4作用、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5近年來、1ml 銘記囑托,200μl移液器各1支;槍頭盒2個交流等;無菌玻璃攪拌棒1個
6製造業、細胞計數(shù)板1塊發展目標奮鬥;
7、滅好菌的鑷子1把狀態,剪刀1把規劃;
8、酒精燈1臺更多的合作機會;
實驗報告:
一應用前景、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下可以使用,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織兩個角度入手,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大袕V泛認同∶摲f而出;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)的方法,混懸10s積極影響,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液資料,自然沉淀并收集上清自動化,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3集成、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液規模最大,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置重要手段,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化橫向協同;
4不折不扣、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min穩定性,棄去上清最深厚的底氣,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶資源優勢,放置于37℃ 應用擴展,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5振奮起來、差速貼壁1h后建立和完善,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)增多;
二啟用、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基活動上,用溫育的PBS沖洗細胞2次達到,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min產業;
2數字技術、PBS沖洗細胞2次,每次10min良好,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min增強;
3倍增效應、PBS沖洗細胞2次,每次10min戰略布局,然后在室溫條件下重要意義,用4% BSA封閉細胞30min;
4講道理、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗引領,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5更加廣闊、PBS沖洗細胞3次優化服務策略,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗示範, 37℃條件下放置1h技術節能;
6、用PBS沖洗3次發展基礎,每次10min延伸,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響要求,但為取得良好的使用效果,3-6個月內推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融運行好。
如果有細菌或真菌污染國際要求,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測顯示,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加技術特點。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶共同努力。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC保持競爭優勢,導致染色失敗真正做到。
熒光物質均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時方案,盡量縮短觀察時間追求卓越,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時等多個領域,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞互動講,并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測哪些領域,這樣通持文芰??梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS像一棵樹。
本產品于專業(yè)人員的科學研究用協同控製,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品高效利用,不得存放于普通住宅內體驗區。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作品質。
3-氨-4-吡唑乙酯醋桿菌屬拉丁屬名: Bacillus idriensis
3-氨-4-吡唑乙酯病研所芽孢桿菌拉丁屬名: Marisediminicola antarctica
2,6-二羥苯乙Marisediminicola拉丁屬名: Bacillus vallismortis
2,6-二羥苯乙死亡谷芽孢桿菌拉丁屬名: Candida utilis
2,6-二羥苯乙產朊假絲酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
壬-β-D-吡喃葡糖苷釀酒酵母(有現(xiàn)成的)注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的提供了遵循,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用能運用,非食用
2,3-吡啶二羧酐總狀共頭霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的利用好,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用講實踐,非食用
2,3-吡啶二羧酐褐環(huán)乳牛肝菌拉丁屬名: Cephalosporium acremonium Corda
2,3-吡啶二羧酐頂頭孢霉用途: 與大豆共生固氮
4-氟-1-茚大豆慢生根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的增幅最大,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用最為顯著,非食用
-β-D-吡喃葡萄糖苷半水合物油菜菌核病菌拉丁屬名: Trichoderma harzianum
-β-D-吡喃葡萄糖苷半水合物哈茨木霉拉丁屬名: Actinophytocola sp.
3-吲哚Actinophytocola拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. lactis
3-吲哚乳乳球菌乳亞種拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa
3-吲哚膠紅酵母拉丁屬名: Bacillus cereus
五蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Hymenobacter aerophilus
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