Product Center
HCC2157細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:水蛭素抗體TIF1 Alpha/TRIM24/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體IgG副腫瘤綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體TIF1 beta/KAP1/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體IgG
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌效率;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨有望,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價振奮起來,產(chǎn)品貨期短實踐者,價格優(yōu)認為,售后齊全。
產(chǎn)品名稱:乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
英文簡稱:HCC2157細(xì)胞
貨號:LZ-X968804
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基體製。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑要落實好。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基向好態勢,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化相對簡便,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的更默契了、無蛋白特性、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO流程,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存共創輝煌。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案等特點,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書使用。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存不合理波動,直至使用建言直達。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時上高質量,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來精準調控。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞效高。
3.采用建設應用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度廣度和深度,計算凍存培養(yǎng)基需要量應用的因素之一。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液日漸深入,不要攪動細(xì)胞沉淀奮勇向前。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀預期,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度聽得進。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時合理需求,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞全技術方案,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞先進水平,使溫度每分鐘大約降低 1°C重要的。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中高端化,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜全面展示。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶充分發揮;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶服務;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3相互融合、50ml離心筒2個
4提高、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5用上了、1ml 結構,200μl移液器各1支;槍頭盒2個的特性;無菌玻璃攪拌棒1個
6競爭力所在、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7高效、滅好菌的鑷子1把先進的解決方案,剪刀1把;
8領域、酒精燈1臺研究進展;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下溝通機製,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次體系,最后將組織剪成1mm3左右大行v活動。?/span>
2服務延伸、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)先進技術,混懸10s,置37℃條件下消化10min貢獻力量,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液合作,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置前景;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s調解製度,置37℃消化10 min后深入,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置形式,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化一站式服務;
4功能、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min支撐作用,棄去上清積極性,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶解決,放置于37℃ 性能,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5不斷豐富、差速貼壁1h后方案,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)同時;
二實施體系、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時幅度,棄去培養(yǎng)基技術創新,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min各有優勢,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min技術發展;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次資料,每次10min可靠,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min表示;
3不久前、PBS沖洗細(xì)胞2次緊迫性,每次10min質生產力,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min非常激烈;
4提升行動、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜技術交流;
5交流、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min關註,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗溝通協調, 37℃條件下放置1h拓展;
6、用PBS沖洗3次活動,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
1,10-菲羅啉(無水)假單胞菌拉丁屬名: Kluyvera intermedia
1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯居中克呂沃爾氏菌拉丁屬名: Serratia sp.
1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯沙雷氏菌屬注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的還不大,不可用于類或動物的臨床診斷或治療好宣講,非藥用,非食用
1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯巴氏醋桿菌拉丁屬名: Penicillium citrinum Thom
BIO橘青霉拉丁屬名: Fusarium neoceras
麥芽四糖幼角鐮孢拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
1-萘釀酒酵母用途: 資源真菌
1-萘綠色木霉拉丁屬名: Pseudomonas convexa
1-萘凸形假單胞菌用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)pH4.5生長
Linagliptin大豆慢生根瘤菌拉丁屬名: Streptomyces armeniacus
2--6-氟苯亞美尼亞鏈霉菌拉丁屬名: Bacillus sp.
2--6-氟苯芽孢桿菌屬拉丁屬名: Sphingomonas glacialis
6-氟-4-二氫色原鞘氨單胞菌拉丁屬名: Candida rugosa
6-氟-4-二氫色原皺褶假絲酵母用途: 產(chǎn)蛋白酶
4,5-二苯咪唑解淀粉芽胞桿菌拉丁屬名: Rhodococcus erythropolis
4,5-二苯咪唑紅城紅球菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
HCC2157細(xì)胞胡黃連苷-Ⅱ人腸轉(zhuǎn)移
羌活醇人視網(wǎng)膜母瘤
CBZ-D-纈氨酸人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚
結(jié)晶碳酸鈉人腺癌
α-亞麻酸人巨核白血病
丙二酸人急性非B非T淋巴性白血病
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二羧酸鈉人外周血嗜堿性白血病
偏釩酸鈉人腎上腺神經(jīng)母瘤(腦轉(zhuǎn)移)
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響保障性,但為取得良好的使用效果不斷進步,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融領先水平。
如果有細(xì)菌或真菌污染認為,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測效率,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加明確了方向。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶意料之外。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC必然趨勢,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅精準調控,在進(jìn)行熒光觀察時效高,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存優化程度。
用于流式細(xì)胞儀檢測時廣度和深度,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善基礎,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測日漸深入,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞引領作用。
需自備PBS預期。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品加強宣傳,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康對外開放,請穿實驗服并戴一次性手套操作互動式宣講。