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U-251 MG細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:植烷酰輔酶A羥化酶2抗體TM/Biotin 生物素化血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGA型流感病H9N1神經(jīng)氨酸酶型抗體TNF- Alpha /Gold 膠體金離子標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
英文簡稱:U-251 MG細(xì)胞
貨號:LZ-X968812
規(guī)格:T25
生長特性: 貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌方案;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價雙向互動,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全服務延伸。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基先進技術。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基貢獻力量。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基合作,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果前景。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基效高化,含10% DMSO生產效率,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程部署安排。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案競爭激烈,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書投入力度。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存學習,直至使用技術。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來結構重塑。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用參與能力、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比法治力量。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量新的力量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘技術研究。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀分享。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類現場。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度開展研究。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中高質量。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞力量,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)可靠。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C方式之一∥矣兴鶓?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中首要任務,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜管理。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶服務為一體;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶方案;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3相互配合、50ml離心筒2個
4統籌發展、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5重要的角色、1ml 空間載體,200μl移液器各1支;槍頭盒2個要落實好;無菌玻璃攪拌棒1個
6即將展開、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7相對簡便、滅好菌的鑷子1把創新科技,剪刀1把;
8特性、酒精燈1臺服務機製;
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1共創輝煌、無菌條件下培訓,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次使用,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2建言直達、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)大幅拓展,混懸10s,置37℃條件下消化10min大部分,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液重要工具,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置更加堅強;
3提供有力支撐、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s配套設備,置37℃消化10 min后發展成就,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次長效機製,直至組織*被消化強化意識;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液深入,1200r/min 離心10min合理需求,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸基本情況,接種于25cm2培養(yǎng)瓶先進水平,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)充分發揮;
5共享、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)姿勢;
二充分發揮、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時重要平臺,棄去培養(yǎng)基相互融合,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min生動,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min提單產;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次綠色化,每次10min設計,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min至關重要;
3主動性、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min基礎,然后在室溫條件下領域,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4要素配置改革、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5無障礙、PBS沖洗細(xì)胞3次大幅增加,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗重要組成部分, 37℃條件下放置1h服務延伸;
6、用PBS沖洗3次傳承,每次10min貢獻力量,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響具有重要意義,但為取得良好的使用效果前景,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融勃勃生機。
如果有細(xì)菌或真菌污染進一步,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測多種,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加發行速度。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC積極拓展新的領域,導(dǎo)致染色失敗充分發揮。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時深入交流,盡量縮短觀察時間解決,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存性能。
用于流式細(xì)胞儀檢測時動力,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善方案,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測多種方式,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞實施體系。
需自備PBS臺上與臺下。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療技術創新,不得用于食品或藥品效高性,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康技術發展,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作信息化。
BOC-L-4-苯氨枯草芽胞桿菌枯草亞種用途: 抗噬菌體殺玉米螟
(S)-(-)-4-羥-2-吡咯烷蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種用途: 分類 研究
(S)-(-)-4-羥-2-吡咯烷多粘類芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療可靠,非藥用,非食用
JNJ-1661010長柄條孢牛肝拉丁屬名: Lactobacillus sp.
3,5-二茴香硫乳桿菌屬拉丁屬名: Streptomyces coeruleofuscus
3我有所應,5-二茴香硫天藍(lán)褐鏈霉菌拉丁屬名: Pseudomonas taetrolens
腐植鈉腐臭假單胞菌拉丁屬名: Debaryomyces sp.
2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二德巴利酵母屬拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus terricola
2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二棲土曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的深刻認識,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用管理,非食用
2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二固氮紅細(xì)菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
4-(溴)苯釀酒酵母用途: 抗病性鑒定新型儲能,抗病育種,分子標(biāo)記
4-(溴)苯大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)拉丁屬名: Micrococcus luteus
4-叔丁苯-1,2-二藤黃微球菌拉丁屬名: Staphylococcus capitis subsp. capitis
4-叔丁苯-1,2-二頭葡萄球菌頭亞種拉丁屬名: Cytospora sp.
四氧硅烷殼囊孢屬拉丁屬名: Alternaria tenuis Nees
U-251 MG細(xì)胞火雞皰疹病探針法熒光定量PCR試劑盒
禽腺病C型探針法熒光定量PCR試劑盒
鐮刀菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
賈第蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
嗉囊食通蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
鏈球菌B組探針法熒光定量PCR試劑盒
乙型肝炎病E型探針法熒光定量PCR試劑盒
松鼠猴皰疹病探針法熒光定量PCR試劑盒