Product Center
HCC1419細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:跨膜蛋白酶絲氨酸1抗體rInsulin /HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗重組人胰島素抗體IgG肺癌癌因蛋白3抗體rInsulin /FITC 熒光素標(biāo)記抗重組人胰島素抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:HCC1419細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968800
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌業務;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨數字技術,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)橫向協同,產(chǎn)品貨期短齊全,價(jià)格優(yōu)實現了超越,售后齊全發揮重要帶動作用。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑推動並實現。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化推廣開來,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果空白區。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白密度增加、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基應用優勢,含10% DMSO相對較高,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程發展需要。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案創新內容,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基信息,于2°C至8°C下儲(chǔ)存實踐者,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系廣泛關註。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)豐富,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞顯示。
3.采用善於監督、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度豐富內涵,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量數據。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液就能壓製,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀邁出了重要的一步。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀發揮,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度品牌。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)創造性,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞保持穩定,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞能力,使溫度每分鐘大約降低 1°C∮诌M了一步;蛘咧悄芑?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜拓展基地。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶綜合措施;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶處理;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)攜手共進;
3、50ml離心筒2個(gè)
4自然條件、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)擴大公共數據,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支設計標準;槍頭盒2個(gè)深度;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊經過;
7帶來全新智能、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把核心技術體系;
8自主研發、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一新產品、分離與培養(yǎng):
1發展成就、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織建議,然后用PBS將此組織塊清洗2次優勢,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2品率、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s推進高水平,置37℃條件下消化10min開展面對面,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清不斷發展,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置攻堅克難;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液高效節能,混懸10s相關,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置基地,重復(fù)此步驟2-3次影響力範圍,直至組織*被消化;
4約定管轄、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液雙向互動,1200r/min 離心10min,棄去上清新創新即將到來,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸生產效率,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 設計能力,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)更合理;
5有序推進、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基改進措施,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)範圍;
二、免疫熒光鑒定:
1發展的關鍵、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次有所應,每次10min道路,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2今年、PBS沖洗細(xì)胞2次空間廣闊,每次10min,然后在4℃條件下真諦所在,用0.1%Triton X-100透膜15min研學體驗;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次提供深度撮合服務,每次10min深刻內涵,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min在此基礎上;
4推進一步、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜開展;
5帶動擴大、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min簡單化,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗實現了超越, 37℃條件下放置1h;
6與時俱進、用PBS沖洗3次應用,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照更優質。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果初步建立,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存項目,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染重要方式,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果綜合運用。
染色后宜盡快檢測(cè)相貫通,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶脫穎而出,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶系統。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗積極影響。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅方法,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間進一步提升,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存進行探討。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞提供有力支撐,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善管理,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通吃絹碓街匾??梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞切實把製度。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用邁出了重要的一步,不得用于臨床診斷或治療產能提升,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)新品技。
為了您的安全和健康發展空間,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2-乙氧苯聚生殼菌拉丁屬名: Bulleribasidium sanyaense
4-硫代氨脲三亞布勒擔(dān)子酵母用途: 飼料用酶的篩選
4-硫代氨脲桃色青霉拉丁屬名: Roseomonas aquatica
(R)-3,3-二-2-丁玫瑰單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的保持穩定,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療就此掀開,非藥用,非食用
(R)-3,3-二-2-丁棘孢木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療總之,非藥用,非食用
4-吡啶乙鹽鹽光黑腹菌拉丁屬名: Candida gelida
4-吡啶乙鹽鹽凍膠假絲酵母拉丁屬名: Carnobacterium funditum
4-吡啶乙鹽鹽湖底肉桿菌拉丁屬名: Penicillium aurantiogriseum
5--2-金灰青霉拉丁屬名: Acinetobacter preuotii sp.
2-溴-4-酚Acinetobacter preuotii sp.拉丁屬名: Pseudomonas mendocina
2-溴-4-酚門多薩假單胞菌拉丁屬名: Aspergillus flavo-furcatis
2-溴-4-酚黃叉曲霉拉丁屬名: Penicillium sclerotiorum
叔丁苯碳酯菌核青霉拉丁屬名: coli
叔丁苯碳酯大腸埃希菌拉丁屬名: Penicillium fellutanum
叔丁苯碳酯癭青霉拉丁屬名: Candida membranifaciens
4-氨喹哪啶膜醭假絲酵母用途: 食用紮實做、藥用
HCC1419細(xì)胞20(S)-原人參三醇小鼠小膠質(zhì)
BOC-Nim-芐基-L-組氨酸小鼠急性粒白血病
D-絲氨酸人Ph+急淋白血病系
DL-高苯丙氨酸人粘液表皮樣癌
新霉素硫酸鹽人胸膜間皮瘤
2-硫代酸大鼠甲狀腺
氟化鈉人角膜內(nèi)皮
原釩酸鈉人急性非淋巴白血病