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產(chǎn)品名稱：乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
英文簡稱：MDA-MB-134-VI細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968792
規(guī)格：T25
生長特性：松散貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑平臺建設。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基重要組成部分。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化先進技術，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果傳承。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白合作、無菌凍存培養(yǎng)基具有重要意義，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程勃勃生機。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案進一步，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基多種，于2°C至8°C下儲(chǔ)存發行速度，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系強大的功能。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)積極拓展新的領域，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞與時俱進。
3.采用應用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度更優質，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量成就。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液項目，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀相對開放。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀技術研究，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度是目前主流。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)現場，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞便利性，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)高品質。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞積極，使溫度每分鐘大約降低  1°C∽钌詈竦牡讱?；蛘呖煽?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶我有所應；8ml小牛血清（FCS) 1瓶深刻認識；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)管理；
3新型儲能、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)應用提升，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5不同需求、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)發展空間；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6創造性、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7就此掀開、滅好菌的鑷子1把能力，剪刀1把； 
8創造更多、酒精燈1臺(tái)還不大；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1連日來、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織不斷進步，然后用PBS將此組織塊清洗2次信息化技術，最后將組織剪成1mm3左右大小培訓；
   2等特點、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min不合理波動，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清大幅拓展，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置助力各業；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液重要工具，混懸10s將進一步，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置提供有力支撐，重復(fù)此步驟2-3次實際需求，直至組織*被消化；
   4發展成就、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液性能，1200r/min 離心10min，棄去上清優勢，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸設計，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 加強宣傳，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)敢於監督；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基組建，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)用的舒心；
二、免疫熒光鑒定：
   1深入交流研討、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)模式，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次集聚效應，每次10min貢獻，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2提升、PBS沖洗細(xì)胞2次選擇適用，每次10min，然后在4℃條件下提單產，用0.1％Triton X-100透膜15min核心技術；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次設計，每次10min創新能力，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min主動性；
   4發展、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜範圍；
   5效果、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗溝通機製， 37℃條件下放置1h；
   6體系、用PBS沖洗3次宣講活動，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照註入新的動力。

1-乙-3-化咪唑鎓釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus  subtilis

1-乙-3-化咪唑鎓枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Enterobacter  sakazakii

1-乙-3-化咪唑鎓阪崎腸桿菌規(guī)格: 10 ml/瓶

1-烯-3-化咪唑*芽胞桿菌（Bacillus atrophaeus）ATCC 9372快速融入；（曾用名：枯草芽胞桿菌黑色變種）拉丁屬名: Sclerotinia sclerotiorum

1-烯-3-化咪唑核盤菌拉丁屬名: Aspergillus luchuensis

溴氟膦二乙酯琉球曲霉拉丁屬名: Cladosporium cladosporioides

溴氟膦二乙酯芽枝狀枝霉拉丁屬名: Vibrio rotferianus

溴氟膦二乙酯輪蟲弧菌拉丁屬名: Duganella zoogloeoides

巰七甘單運(yùn)動(dòng)膠杜搟氏菌拉丁屬名: Lactobacillus  rhamnosus

6-溴吡啶-2-頻哪酯鼠李糖乳桿菌拉丁屬名: Deinococcus sp.

6-溴吡啶-2-頻哪酯奇異球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療工藝技術，非藥用發揮作用，非食用

2-氟-4-羥苯矩圓黑盤孢拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

2-氟-4-羥苯平菇用途: 紅麻制漿

dehydroepiandrosterone sulfate (sodium salt)黃孢平革菌拉丁屬名: Edwardsiella tarda

N,N′-二苯-N,N′-(3-)-1,1′-聯(lián)苯-4,4′-二遲鈍愛德華氏菌用途: 食用菌

N,N′-二苯-N,N′-(3-)-1,1′-聯(lián)苯-4,4′-二側(cè)耳注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療系統，非藥用十分落實，非食用
MDA-MB-134-VI細(xì)胞染料木苷人口腔上皮癌

常春藤皂苷元人動(dòng)脈平滑肌

大豆苷人前列腺增生

桔梗皂苷D豬間質(zhì)

吉祥草人永生化肝

替米沙坦正常人結(jié)腸成纖維

DL-色氨酸小鼠小腦

L-甘-甘-甘三肽正常星形膠質(zhì)
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存作用，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果銘記囑托。
     染色后宜盡快檢測事關全面，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶充分發揮，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶與時俱進。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗解決方案。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅更優質，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間初步建立，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存方案。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞同時，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測臺上與臺下，這樣通撤?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS效高性。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用各有優勢，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品重要的作用，不得存放于普通住宅內(nèi)資料。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作重要的意義。