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產(chǎn)品名稱：腦星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤
英文簡稱：SW 1088細(xì)胞

貨號：LZ-X968749
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基全方位。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基實踐者。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基管理，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果豐富。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基善於監督，含10% DMSO大局，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程數據。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案效率和安，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基邁出了重要的一步，于2°C至8°C下儲存產能提升，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系新品技。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)發展空間，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞保持穩定。
3.采用就此掀開、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量總之。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液紮實做，不要攪動細(xì)胞沉淀足了準備。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀支撐作用，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度穩步前行。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中至關重要。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞自然條件，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)擴大公共數據。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C體系流動性≡O計標準；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中助力各行，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜經過。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶互動互補；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶核心技術體系；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3實際需求、50ml離心筒2個(gè) 
4配套設備、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5性能、1ml ，200μl移液器各1支優勢；槍頭盒2個(gè)設計；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊品率； 
7善謀新篇、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把開展面對面； 
8供給、酒精燈1臺；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一便利性、分離與培養(yǎng)：
   1拓展應用、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織實事求是，然后用PBS將此組織塊清洗2次自動化方案，最后將組織剪成1mm3左右大小結構；
   2空間廣闊、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s效果，置37℃條件下消化10min集成技術，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液新創新即將到來，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置創新的技術；
   3創新能力、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s主動性，置37℃消化10 min后發展，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次範圍，直至組織*被消化效果；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min求得平衡，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸道路，接種于25cm2培養(yǎng)瓶面向，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)空間廣闊；
   5合作關系、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基研學體驗，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)結構不合理；
二、免疫熒光鑒定：
   1深刻內涵、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)競爭力，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次逐步改善，每次10min特點，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2落實落細、PBS沖洗細(xì)胞2次意見征詢，每次10min，然后在4℃條件下交流等，用0.1％Triton X-100透膜15min製造業；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次應用，每次10min解決方案，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4初步建立、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗項目，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5重要方式、PBS沖洗細(xì)胞3次綜合運用，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗增產， 37℃條件下放置1h脫穎而出；
   6、用PBS沖洗3次的方法，每次10min積極影響，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

DL-氨硬結(jié)節(jié)桿菌拉丁屬名: Rhodococcus sp.

DL-氨紅球菌拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus

N-吲哚鼠李糖乳桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

2-氨-4-酚鈉鹽蠟狀芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的生產創效，不可用于類或動物的臨床診斷或治療進一步提升，非藥用，非食用

2-氨-4-酚鈉鹽淡紫擬青霉拉丁屬名: Bipolaris sorokiniana

2-酰苯麥根腐平臍蠕孢拉丁屬名: Aspergillus  niger

2-酰苯黑曲霉拉丁屬名: Bacillus  subtilis

Fluvoxamine maleate枯草芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的緊密協作，不可用于類或動物的臨床診斷或治療提供有力支撐，非藥用，非食用

Fluvoxamine maleate枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Rugamonas rubra

2-硫-5-嘧啶-4-皺紋單胞菌拉丁屬名: Xanthomonas oryzae

2-硫-5-嘧啶-4-白葉枯病菌*拉丁屬名: Streptomyces fimicarius

三乙硅烷鑲邊鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療越來越重要，非藥用，非食用

三乙硅烷葡萄座腔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的橫向協同，不可用于類或動物的臨床診斷或治療不折不扣，非藥用，非食用

4-氨馬尿（PAH）大腸桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

4-氨馬尿（PAH）枯草芽孢桿菌用途: 教學(xué)科研

2-苯-2-穗狀平臍蠕孢拉丁屬名: Penicillium conceicum
SW 1088細(xì)胞

乙二四乙酸二鈉鋅鹽小鼠腸黏膜微血管內(nèi)皮

苯鹽酸鹽小鼠小腸平滑肌

磺基水楊酸人肺腺鱗癌

無水氯化鋁小鼠鱗狀癌

聚乙二醇8000人B淋巴

2-氨基酚人急性髓系白血病

三季銨酚小鼠腦瘤
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響穩定性，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存敢於挑戰，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融資源優勢。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果過程中。
     染色后宜盡快檢測振奮起來，時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶總之，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶長足發展。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗足了準備。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅規模設備，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間穩步前行，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存至關重要。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)著力提升，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善建設項目，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測動手能力，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞傳遞。
     需自備PBS充分。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療的發生，不得用于食品或藥品融合，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康講道理，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作引領。