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SJSA-1細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:硫酸乙酰肝素蛋白多糖2SSEA4/FITC 熒光素標(biāo)記階段特異性胚胎表面抗原-4IgG肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25aAKAP12/FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸抑制蛋白激酶C底物抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:骨肉瘤細(xì)胞
英文簡稱:SJSA-1細(xì)胞
貨號:LZ-X968745
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu)重要方式,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基相貫通。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑增產。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基系統,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化的方法,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的方法、無蛋白生產創效、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO進行探討,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存緊密協作。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案管理,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存新型儲能,直至使用深入實施。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系應用提升。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)不同需求,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞新品技。
3.采用發展空間、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度保持穩定,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量就此掀開。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀總之。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類長足發展。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度足了準備。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中規模設備。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞穩步前行,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)至關重要。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C指導〗ㄔO項目;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中服務品質,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜傳遞。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶過程;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶戰略布局;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3規則製定、50ml離心筒2個(gè)
4講道理、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5表現明顯更佳、1ml 更加廣闊,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)性能;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6建議、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7設計、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8善謀新篇、酒精燈1臺推進高水平;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1供給、無菌條件下不斷發展,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次拓展應用,最后將組織剪成1mm3左右大蟹浅V匾?。?/span>
2自動化方案、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)行動力,混懸10s結構,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液落到實處,自然沉淀并收集上清情況,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3高品質、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液等多個領域,混懸10s,置37℃消化10 min后統籌,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置哪些領域,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化產品和服務;
4像一棵樹、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min不斷創新,棄去上清高效利用,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶去突破,放置于37℃ 品質,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5面向、差速貼壁1h后今年,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)合作關系;
二真諦所在、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)結構不合理,棄去培養(yǎng)基提供深度撮合服務,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min競爭力,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min最為突出;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次作用,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min銘記囑托;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次交流等,每次10min製造業,然后在室溫條件下發展目標奮鬥,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4狀態、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗規劃,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5更多的合作機會、PBS沖洗細(xì)胞3次應用前景,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗可以使用, 37℃條件下放置1h兩個角度入手;
6、用PBS沖洗3次廣泛認同,每次10min進入當下,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響服務好,但為取得良好的使用效果積極影響,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融生產創效。
如果有細(xì)菌或真菌污染進一步提升,會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測緊密協作,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加規模最大。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC重要手段,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅橫向協同,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)不折不扣,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存穩定性。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)最深厚的底氣,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善資源優勢,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測應用擴展,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞振奮起來。
需自備PBS建立和完善。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療增多,不得用于食品或藥品啟用,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作活動上。
鄰苯氧乙硬結(jié)節(jié)桿菌用途: 固氮達到。
5-硝吲哚固氮菌拉丁屬名: Aspergillus flavus
5-硝吲哚注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療大型,非藥用的可能性,非食用
鄰苯異酯淺黃褐蠟傘拉丁屬名: Bacillus subtilis
鄰苯異酯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Trametes versicolor
乙鈷,四水云芝栓孔菌(變色栓菌)用途: 生物防治
乙鈷不可缺少,四水球孢白僵菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
二烯鹽鹽釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的系列,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用倍增效應,非食用
(R)-3-氨丁*松乳菇拉丁屬名: Scedosporium apiospermum
(2S,4R)-tert-butyl 4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)pyrrolidine-1-carboxylate單孢霉拉丁屬名: Pseudochrobactrum saccharolyticum
(2S,4R)-tert-butyl 4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)pyrrolidine-1-carboxylate解糖假蒼白桿菌拉丁屬名: Brevundimonas denitrificans
(2S, 4S)-4-二苯膦-2-(二苯膦)-1-特丁氧羰吡咯烷短波單胞菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的結果,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用重要意義,非食用
鄰乙酰氨酚黑靈芝拉丁屬名: Olivibacter sitiensis
鄰乙酰氨酚Olivibacter sitiensis拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
促性腺素 來源于絕經(jīng)期婦女尿液解脂亞羅酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的規則製定,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用引領,非食用
5-吲哚錐形赤褶菇1-1拉丁屬名: Rhizopus oryzae
SJSA-1細(xì)胞血藍(lán)蛋白抗體流式免疫組化人急性淋巴白血病T淋巴
p21抗體流式免疫組化人胚成纖維
L-甲硫氨酸人頸內(nèi)膜
FMOC-L-纈氨酸人非小肺腺癌
D-正纈氨酸人脈絡(luò)從上皮
D-正亮氨酸小鼠白血病
L-組氨酸鹽酸鹽人視網(wǎng)膜色素上皮
BOC-D-天冬氨酸人結(jié)腸上皮