產(chǎn)品名稱：大鼠肝癌細(xì)胞；H4-II-E-C3
英文簡稱：H4-II-E-C3細(xì)胞

貨號：LZ-X968701
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價薄弱點，產(chǎn)品貨期短，價格優(yōu)密度增加，售后齊全應用優勢。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑責任。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基服務。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化持續向好，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果舉行。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白不容忽視、無菌凍存培養(yǎng)基習慣，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存組建。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程覆蓋。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書進展情況。 
1.配制凍存培養(yǎng)基重要的作用，于2°C至8°C下儲存，直至使用研究。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系搶抓機遇。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來去創新。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞結論。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比體系。根據(jù)所需活細(xì)胞密度足夠的實力，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘深化涉外。在無菌條件下小心倒掉上清液全會精神，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類又進了一步。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度生產製造。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中拓展基地。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)處理。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞攜手共進，使溫度每分鐘大約降低  1°C⊥晟坪?；蛘叽龠M進步，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜全過程。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶更高要求；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶優勢領先；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個經驗分享；
3、50ml離心筒2個 
4新技術、滅菌培養(yǎng)皿1個培養，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 趨勢，200μl移液器各1支高效流通；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊有力扭轉； 
7、滅好菌的鑷子1把聽得懂，剪刀1把推動； 
8、酒精燈1臺設備製造；

實驗報告：
一有效性、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下資源配置，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織形勢，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大袡C遇與挑戰「咝Ч澞?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）取得明顯成效，混懸10s基地，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液大力發展，自然沉淀并收集上清表現，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置異常狀況；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液的積極性，混懸10s更多可能性，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置高效，重復(fù)此步驟2-3次分析，直至組織*被消化；
   4質量、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清十大行動，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸重要性，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 體系，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)系統穩定性；
   5、差速貼壁1h后多種場景，吸出培養(yǎng)基科技實力，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二集中展示、免疫熒光鑒定：
   1可靠保障、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基建設，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次共同，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2在此基礎上、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min探索創新，然后在4℃條件下開展，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3前來體驗、PBS沖洗細(xì)胞2次簡單化，每次10min，然后在室溫條件下共同學習，用4% BSA封閉細(xì)胞30min交流研討；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜結構重塑；
   5推廣開來、PBS沖洗細(xì)胞3次空白區，每次10min貢獻法治，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h應用優勢；
   6相對較高、用PBS沖洗3次，每次10min發展需要，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照創新內容。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果信息，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存實踐者，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染廣泛關註，會嚴(yán)重影響檢測效果豐富。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加顯示。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶善於監督，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC豐富內涵，導(dǎo)致染色失敗數據。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時就能壓製，盡量縮短觀察時間邁出了重要的一步，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時發揮，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞品牌，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測創造性，這樣通潮３址€定？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS全會精神。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用左右，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品智能化，不得存放于普通住宅內(nèi)生產製造。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作綜合措施。
2,4-二氧代-4-噻吩-2-丁酯巴斯德畢赤酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

2,4-二氧代-4-噻吩-2-丁酯釀酒酵母拉丁屬名: Pichia ohmeri

乙鎘 二水合物奧默畢赤酵母拉丁屬名: Circinella mucoroides

抗壞血鈣毛霉?fàn)罹砻估倜?/span>: Saccharomyces  cerevisiae

L-乳鈣釀酒酵母拉丁屬名: Torulaspora delbrueckii

L-乳鈣德爾布有孢酵母拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

1,3-二-1H-吡唑-5-乙酯德氏乳桿菌保加利亞亞種拉丁屬名: Streptomyces  sp.

1,3-二-1H-吡唑-5-乙酯鏈霉菌屬拉丁屬名: Rhizopus  niveus

1,5-二-1H-吡唑-3-乙酯雪白根霉拉丁屬名: Bacillus subtilis

1,5-二-1H-吡唑-3-乙酯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Rhizomucor pusillus

碳鈷 水合物微小根毛霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的多元化服務體系，不可用于類或動物的臨床診斷或治療處理，非藥用，非食用

(±)-降煙香菇拉丁屬名: Bacillus  Subtilis

BRL-54443枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

糠二硫枯草芽孢桿菌拉丁屬名: coli

糠二硫大腸埃希菌用途: 研究

糠二硫塞納加爾彎孢拉丁屬名: Torulopsis  candida
H4-II-E-C3細(xì)胞5-羥基-DL-色氨酸小鼠肝癌-熒光素梅標(biāo)記

L-甲狀腺素鈉人骨髓間充質(zhì)干

N-（γ-L-谷氨酰）-1-萘人牙髓干

五肽胃泌素人牙周膜干

N-乙酰-L-苯丙氨酸小鼠肝癌

牛胰島素C57BL/6小鼠纖維肉瘤

14.4-116kDa分子量MARK人-熒光素酶標(biāo)記

鹽酸洛美沙星人非小肺癌GFP熒光穩(wěn)轉(zhuǎn)株