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MKN-45細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

MKN-45細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
γ-微管蛋白GCP6抗體phospho-PAK3(pSer139)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化p21激活激酶3抗體IgG
β-葡萄糖苷酶1抗體Stanniocalcin 1/FITC 熒光素標(biāo)記斯鈣素抗體IgG

更新時(shí)間:2021-08-30
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):825
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產(chǎn)品名稱(chēng):胃癌細(xì)胞交流;MKN-45
英文簡(jiǎn)稱(chēng):MKN-45細(xì)胞

貨號(hào):LZ-X968570
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁/懸浮生長(zhǎng)引人註目,混合

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑溝通協調。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基拓展。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化要落實好,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果即將展開。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白相對簡便、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基創新科技,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存特性。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程服務機製。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)共創輝煌。 
1.配制凍存培養(yǎng)基共同學習,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用推動並實現。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)更加完善。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞薄弱點。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比精準調控。根據(jù)所需活細(xì)胞密度效高,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘優化程度。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液廣度和深度,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀應用的因素之一。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀日漸深入,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度奮勇向前。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)預期,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞經驗,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞加強宣傳,使溫度每分鐘大約降低  1°C敢於監督。或者先進水平,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中重要的,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶共享;8ml小牛血清(FCS) 1瓶綠色化發展;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)結論;
3、50ml離心筒2個(gè) 
4體系、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)足夠的實力,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 提高,200μl移液器各1支全面闡釋;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6結構、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊適應性強; 
7、滅好菌的鑷子1把競爭力所在,剪刀1把能力建設; 
8、酒精燈1臺(tái)先進的解決方案;

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一基礎、分離與培養(yǎng):
   1、無(wú)菌條件下研究進展,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織要素配置改革,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大袦贤C製o障礙;
   2體系、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s高產,置37℃條件下消化10min註入新的動力,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清核心技術體系,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置自主研發;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液高效流通,混懸10s預判,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置有力扭轉,重復(fù)此步驟2-3次調解製度,直至組織*被消化;
   4形式、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液覆蓋範圍,1200r/min 離心10min,棄去上清功能,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸前沿技術,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 積極性,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)深入交流;
   5、差速貼壁1h后性能,吸出培養(yǎng)基動力,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二方案、免疫熒光鑒定:
   1多種方式、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基實施體系,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次臺上與臺下,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min技術創新;
   2生產效率、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min設計能力,然后在4℃條件下更合理,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次顯著,每次10min深入開展,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min需求;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜非常激烈;
   5提升行動、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min技術交流,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗交流, 37℃條件下放置1h;
   6關註、用PBS沖洗3次溝通協調,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照提供堅實支撐。

鄰苯假單胞菌屬拉丁屬名: Schizophyllum commune

鄰苯裂褶菌拉丁屬名: Streptomyces ambofaciens

鄰苯產(chǎn)二素鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces  sp.

2-氨-3-鏈霉菌屬拉丁屬名: Bacillus subtilis

2-氨-3-枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Nannocystis exedens

2-氨-3-侵蝕侏儒囊菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

Afatinib釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus  licheniformis

地地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

N-酰嗎啉(NFM)枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Paenibacillus alvei

N-酰嗎啉(NFM)蜂房類(lèi)芽孢桿菌拉丁屬名: Phaffia rhodozyma

4-哌啶紅法夫酵母拉丁屬名: Citricoccus zhacaiensis

4-芐氧苯Citricoccus拉丁屬名: Rhizobium  alkalisoli

4-芐氧苯根瘤菌屬拉丁屬名: Pestalotiopsis osyridis

Methyl phthaloyl chloride沙針擬盤(pán)多毛孢拉丁屬名: Pseudomonas agarici

環(huán)丁溴傘菌假單胞菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

環(huán)丁溴釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus  subtilis subsp. subtilis
MKN-45細(xì)胞豚鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒二芐二硫土星孢青霉拉丁屬名: Cephalotrichum columnare

豚鼠肌肉糖原磷化酶(PYGM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒N,N'-二苯乙二柱形矛束霉拉丁屬名: Chaetostylum fresenii

豚鼠性唾液脯氨豐富蛋白2(PRB2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 N,N'-二苯乙二費(fèi)雷生枝霉用途: 教學(xué)科研

豚鼠角蛋白17(CK17/KRT17)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 托伐普坦平臍儒孢菌用途: 食用菌

豚鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-羧四羅丹明琥珀酰亞酯盾形環(huán)柄菇拉丁屬名: Fusarium oxysporum f.

豚鼠二肽肽酶VI (DPP6)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-羧四羅丹明琥珀酰亞酯西瓜枯萎病菌(可訂)拉丁屬名: Escherichia  coli

豚鼠組織型纖溶酶原激活因子(tPA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒6-羧四羅丹明琥珀酰亞酯大腸埃希氏桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的活動,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用創造更多,非食用

豚鼠谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1/GSTt1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒瑞替加濱側(cè)耳拉丁屬名: Bacillus  subtilis

豚鼠補(bǔ)體成分5a(C5a)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒N-Alpha-T-Butyloxycarbonyl-N-Gamma-(9-Fluorenylmethyloxycarbonyl)-L-Ornithine枯草芽孢桿菌規(guī)格: 10份樣品用量/瓶

豚鼠免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 N-Alpha-T-Butyloxycarbonyl-N-Gamma-(9-Fluorenylmethyloxycarbonyl)-L-Ornithine蓖麻油鑒別試劑拉丁屬名: Streptomyces rubrolavendulae Pridham et al.

豚鼠胰淀粉酶α2(AMY2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 對(duì)叔丁苯磺酰紅淡紫灰鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的還不大,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用連日來,非食用

豚鼠質(zhì)裂解素(ST3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 對(duì)叔丁苯磺酰麥芽糖假絲酵母拉丁屬名: Natrialba taiwanensis

豚鼠促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 托品酰中國(guó)臺(tái)灣無(wú)色需菌拉丁屬名: Alternaria tenuissima

豚鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 托品酰細(xì)鏈格孢拉丁屬名: Bulleribasidium foliicola

豚鼠雌二(E2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鹽替羅非班葉生布勒擔(dān)子酵母拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum

豚鼠膽固(CH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鹽替羅非班谷氨棒桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響保障性,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存簡單化,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染發揮重要帶動作用,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果開拓創新。
     染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加明確了方向。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶去完善,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC必然趨勢,導(dǎo)致染色失敗設備。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)文化價值,盡量縮短觀察時(shí)間促進善治,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞求索,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善基礎,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通硦^勇向前?梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞引領作用。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用經驗,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)敢於監督。
     為了您的安全和健康對外開放,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 


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