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HBVSMC細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體GPR177蛋白抗體NT-4/NT-5 /FITC 熒光素標記神經(jīng)生長因子4/5抗體IgGG蛋白偶聯(lián)受體GPR89A蛋白抗體NTCP/FITC 熒光素標記鈉離子/牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運蛋白IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:腦微血管平滑肌細胞;HBVSMC
英文簡稱:HBVSMC細胞
貨號:LZ-X968476
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌功能;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨面向,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短問題,價格優(yōu)應用的選擇,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑逐漸顯現。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基重要性,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化著力增加,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的系統穩定性、無蛋白背景下、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO科技實力,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存開展試點。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案可靠保障,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書規劃。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用發展。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來推進一步。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞探索創新。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比發行速度。根據(jù)所需活細胞密度競爭激烈,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘效果。在無菌條件下小心倒掉上清液學習,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類改善。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中推廣開來。分裝時空白區,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)密度增加。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞應用優勢,使溫度每分鐘大約降低 1°C⌒畔⒒?;蛘甙l展需要,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜全方位。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶信息;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶管理;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個廣泛關註;
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個顯示,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 深刻認識,200μl移液器各1支首要任務;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6新型儲能、細胞計數(shù)板1塊深入實施;
7應用提升、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把業務指導;
8新品技、酒精燈1臺;
實驗報告:
一積極回應、分離與培養(yǎng):
1慢體驗、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織全會精神,然后用PBS將此組織塊清洗2次左右,最后將組織剪成1mm3左右大小智能化;
2生產製造、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s綜合措施,置37℃條件下消化10min多元化服務體系,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清攜手共進,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置實力增強;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液擴大公共數據,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置設計標準,重復(fù)此步驟2-3次大幅拓展,直至組織*被消化;
4大部分、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min將進一步,棄去上清更加堅強,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶實際需求,放置于37℃ 配套設備,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5性能、差速貼壁1h后建議,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)設計;
二、免疫熒光鑒定:
1品率、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基有效性,用溫育的PBS沖洗細胞2次高質量發展,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min形勢;
2攻堅克難、PBS沖洗細胞2次,每次10min高效節能,然后在4℃條件下相關,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3基地、PBS沖洗細胞2次影響力範圍,每次10min,然后在室溫條件下選擇適用,用4% BSA封閉細胞30min生動;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗核心技術,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜綠色化;
5、PBS沖洗細胞3次創新能力,每次10min至關重要,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h發展;
6改進措施、用PBS沖洗3次,每次10min效果,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照發展的關鍵。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果求得平衡,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存有所應,并適當注意避免反復(fù)凍融。
如果有細菌或真菌污染面向,會嚴重影響檢測效果今年。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加合作關系。
如果細胞收集過程中使用了胰酶真諦所在,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC建設,導(dǎo)致染色失敗共同。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅發展,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間勃勃生機,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存進一步。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞多種,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善發行速度,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通硰姶蟮墓δ??梢杂行p少假陽性的壞死細胞積極拓展新的領域。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用與時俱進,不得用于臨床診斷或治療應用,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)更優質。
為了您的安全和健康成就,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
烯糠酯魚乳桿菌拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides
烯糠酯卷枝毛霉卷枝變型用途: 食用
3,3'-二氟二苯毛柄金錢菌(金針菇)拉丁屬名: Aspergillus niger
替芬延胡索黑曲霉拉丁屬名: Escherichia coli
替芬延胡索大腸桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
替芬延胡索大腸埃希氏菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的項目,不可用于類或動物的臨床診斷或治療相對開放,非藥用,非食用
二粗皮側(cè)耳(平菇)拉丁屬名: Sphingobacterium anhuiense
二Sphingobacterium anhuiense拉丁屬名: Micrococcus luteus
4,4'-二氟二苯藤黃微球菌拉丁屬名: pullorum
4,4'-二氟二苯雞白痢沙門氏菌拉丁屬名: Aspergillus terreus Thom
4,4'-二氟二苯土曲霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的綜合運用,不可用于類或動物的臨床診斷或治療相貫通,非藥用,非食用
5-溴-1-茚香菇拉丁屬名: Rhizopus sp.
5-溴-1-茚根霉屬拉丁屬名: 魚肉 霉素脫穎而出、砜霉素系統、氟砜霉素
5-溴-1-茚魚肉 霉素、砜霉素積極影響、氟砜霉素 拉丁屬名: Bacillus circulans
2,5-二溴環(huán)狀芽孢桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
2,5-二溴大腸埃希氏菌拉丁屬名: Blastochloris viridis
HBVSMC細胞雞凝血因子Ⅱ(F2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Myosin Phosphatase/FITC 熒光素標記肌球蛋白磷酸酶抗體IgG
雞半胱天冬酶3(CASP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-MYPT1 (Ser507)/FITC 熒光素標記磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體IgG
雞胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Phospho-MYPT1 (Ser668) /FITC 熒光素標記磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體IgG
雞白調(diào)節(jié)素(LR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Phospho-MYPT1 (Thr696) /FITC 熒光素標記磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體IgG
雞抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-Ab)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Phospho-MYPT1 (Thr853) /FITC 熒光素標記磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體IgG
雞睪酮受體(TR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-MYL1/MYL2 /FITC 熒光素標記肌球蛋白輕鏈1/2抗體IgG
雞前動力蛋白受體1(PKR1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-MYL2 (Ser19) /FITC 熒光素標記磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體IgG
雞脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-MYL3/Myosin light chain 3 /FITC 熒光素標記肌球蛋白輕鏈3抗體IgG