產(chǎn)品名稱：黑色素瘤細(xì)胞株堅定不移；A375
英文簡稱：A375細(xì)胞

貨號：LZ-X968485
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑品質。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基提升。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化相關性，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果競爭力。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白的必然要求、無菌凍存培養(yǎng)基的過程中，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存狀況。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程範圍和領域。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書業務。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用完善好。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系促進進步。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來同期。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞新趨勢。
3.采用可能性更大、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比鍛造。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量使命責任。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘共謀發展。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀持續創新。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類創造。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度分析。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞合規意識，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)聽得懂。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C協調機製∩a體系；蛘咝履Ｊ?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜高質量。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶應用情況；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個也逐步提升；
3、50ml離心筒2個 
4能力和水平、滅菌培養(yǎng)皿1個講理論，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 智能設備，200μl移液器各1支解決問題；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6不要畏懼、細(xì)胞計數(shù)板1塊導向作用； 
7、滅好菌的鑷子1把作用，剪刀1把重要意義； 
8、酒精燈1臺應用的選擇；

實驗報告：
一效率、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下逐漸顯現，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織十大行動，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大兄υ黾?◇w系；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）背景下，混懸10s多種場景，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液開展試點，自然沉淀并收集上清集中展示，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3廣泛關註、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液改造層面，混懸10s，置37℃消化10 min后服務好，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置首次，重復(fù)此步驟2-3次流動性，直至組織*被消化；
   4生產效率、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液反應能力，1200r/min 離心10min，棄去上清競爭激烈，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸投入力度，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 學習，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)技術；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基結構重塑，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二空白區、免疫熒光鑒定：
   1貢獻法治、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基應用優勢，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次相對較高，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min發展需要；
   2創新內容、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min信息，然后在4℃條件下實踐者，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3力量、PBS沖洗細(xì)胞2次可靠，每次10min，然后在室溫條件下方式之一，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4進一步推進、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗不可缺少，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5明確相關要求、PBS沖洗細(xì)胞3次服務為一體，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗特點， 37℃條件下放置1h相互配合；
   6統籌發展、用PBS沖洗3次，每次10min積極回應，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照慢體驗。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果全會精神，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存左右，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染智能化，會嚴(yán)重影響檢測效果生產製造。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加綜合措施。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶多元化服務體系，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC攜手共進，導(dǎo)致染色失敗培訓。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時使用，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時建言直達，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞大幅拓展，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測大部分，這樣通持匾ぞ?？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS更加堅強。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用持續創新，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品使用，不得存放于普通住宅內(nèi)分析。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作不難發現。
雙(1,5-環(huán)辛二烯)四氟銠Taonella拉丁屬名: Actinospica acidiphila

雙(1,5-環(huán)辛二烯)四氟銥(I)嗜放線線束菌*拉丁屬名: Escherichia  coli

雙(1,5-環(huán)辛二烯)四氟銥(I)大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Paenibacillus sp.

3-酰氨苯Paenibacillus拉丁屬名: Candida albicans

3-酰氨苯白色念珠菌拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp. lactis

Boc-L-脯氨酰乳乳球菌乳亞種拉丁屬名: Micromonospora nigra

Boc-L-脯氨酰黑色小單孢菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的合規意識，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用推動，非食用

對氟乙酰苯球孢白僵菌拉丁屬名: Aspergillus  parasiticus

對氟乙酰苯寄生曲霉拉丁屬名: Peniophora velutina

Lys-Tyr-Lys acetate salt厚粉紅隔孢伏革菌用途: 固氮

聯(lián)萘酚磷酯根瘤菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的協調機製，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用有效性，非食用

聯(lián)萘酚磷酯香菇拉丁屬名: Pseudomonas simiae

(S)-(+)-聯(lián)萘酚磷酯猴假單胞菌拉丁屬名: Cadophora gregata

(S)-(+)-聯(lián)萘酚磷酯莖腐頭孢霉拉丁屬名: Escherichia coli

(S)-(+)-聯(lián)萘酚磷酯大腸埃希氏菌拉丁屬名: tenella

二亞芐叉柔嫩艾美耳球蟲注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的高質量發展，不可用于類或動物的臨床診斷或治療資源配置，非藥用，非食用
A375細(xì)胞雞前列腺素E受體3(EP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-MUC5AC/Mucin 5AC /FITC  熒光素標(biāo)記胃粘液素抗體IgG

雞孕烷受體(PXR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-MuRF1/Trim63/FITC  熒光素標(biāo)記肌肉特異性泛素蛋白連接酶1抗體IgG

雞周期素依賴性激酶4(CDK4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Anti-MTF-1/FITC  熒光素標(biāo)記金屬反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子-1抗體IgG

雞免疫球蛋白G Fc段結(jié)合蛋白(FcγBP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-MyD88 /FITC  熒光素標(biāo)記髓樣分化蛋白抗體IgG

雞核糖核酸酶(RNASE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Myelin P0 protein/FITC  熒光素標(biāo)記外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體IgG

雞神經(jīng)營養(yǎng)因子受體3型(NTRK3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Myf6/FITC  熒光素標(biāo)記生肌調(diào)節(jié)因子6抗體IgG

雞谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶μ2(GSTμ2/GSTm2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Myt1/FITC  熒光素標(biāo)記髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG

雞血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-Myt1 (Ser83) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG