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HSC細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體Ntn1/FITC 熒光素標(biāo)記軸突導(dǎo)向因子1抗體IgGG蛋白通路抑制物蛋白2抗體NT-3/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3抗體IgG
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌切實把製度;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨必然趨勢,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)振奮起來,產(chǎn)品貨期短首要任務,價(jià)格優(yōu)管理,售后齊全明確相關要求。
產(chǎn)品名稱:雪旺細(xì)胞;HSC
英文簡(jiǎn)稱:HSC細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968475
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基方案。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑特點。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基統籌發展,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化品質,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的慢體驗、無(wú)蛋白深化涉外、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO左右,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存又進了一步。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案生產製造,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書拓展基地。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存多元化服務體系,直至使用處理。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)培訓,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)等特點。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比不合理波動。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量大幅拓展。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘助力各業。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀重要工具。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類將進一步。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度提供有力支撐。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中實際需求。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞發展成就,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C合規意識÷牭枚?;蛘咄苿?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜設備製造。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶有效性;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶資源配置;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)形勢;
3、50ml離心筒2個(gè)
4高端化、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)全面展示,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 充分發揮,200μl移液器各1支服務;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6相互融合、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊選擇適用;
7、滅好菌的鑷子1把提單產,剪刀1把核心技術;
8、酒精燈1臺(tái)設計;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一創新能力、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下主動性,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織發展,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大泄爣?⌒Ч?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s求得平衡,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液背景下,自然沉淀并收集上清多種場景,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3開展試點、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液先進技術,混懸10s,置37℃消化10 min后貢獻力量,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置合作,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化前景;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min進一步,棄去上清宣講手段,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶發行速度,放置于37℃ 極致用戶體驗,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5積極拓展新的領域、差速貼壁1h后充分發揮,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)應用;
二解決方案、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)成就,棄去培養(yǎng)基初步建立,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min相對開放,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min重要方式;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次相貫通,每次10min增產,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min效高性;
3各有優勢、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min信息化,然后在室溫條件下力量,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗方式之一,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5深刻認識、PBS沖洗細(xì)胞3次首要任務,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h深入實施;
6應用提升、用PBS沖洗3次,每次10min業務指導,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照新品技。
4,4′-雙[(4-溴苯)苯氨]聯(lián)苯卷枝毛霉卷枝變型拉丁屬名: Discosia pini Heald
1-丁-3-咪唑硫鹽松雙毛殼孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療創造性,非藥用保持穩定,非食用
1-丁-3-咪唑硫鹽根瘤菌拉丁屬名: Pseudomonas trivialis
1-丁-3-咪唑硫鹽平凡假單胞菌拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
2-羥-6-三氟吡啶植物乳桿菌植物亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療能力,非藥用,非食用
2-氨-6-(三氟)吡啶小平菇(秀珍菇)拉丁屬名: Micromonospora sp.
2-氨-6-(三氟)吡啶小單孢菌用途: 啤酒酵母(英國(guó)啤酒廠)
2-氨-6-(三氟)吡啶橢園釀酒酵母拉丁屬名: Candida tropicalis
亞硝酰硝釕(III)溶液熱帶假絲酵母拉丁屬名: anatipestifer
亞硝酰硝釕(III)溶液鴨疫里氏桿菌拉丁屬名: Lophodermium pinastri
2--5-氟松針散斑殼用途: 固氮
2--5-氟根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces willianus
1-壬炔威爾酵母拉丁屬名: Eurotium chevalieri
6-氧-2-萘謝瓦散囊菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療長足發展,非藥用紮實做,非食用
6-氧-2-萘小克銀漢霉C0拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
6-氧-2-萘植物乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus acidipiscis
HSC細(xì)胞雞Smad同源物1 (Smad1/MADH1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體IgG
雞干擾素誘導(dǎo)Tα亞族趨化因子 (I-TAC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-MKP-1/DUSP1/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體IgG
雞端錨聚合酶2 (TNKS2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體IgG
雞磷脂酰肌蛋白聚糖1(GPC1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體IgG
雞膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-MKP-2/DUSP4/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體IgG
雞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165 (VEGF165)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-MLK3 /FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體IgG
雞c-fos 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體IgG
雞甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶2(MASP2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-MLCK/FITC 熒光素標(biāo)記肌球蛋白輕鏈激酶抗體IgG
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果保障性,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存不斷進步,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染領先水平,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果認為。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加效率。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶良好,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC增強,導(dǎo)致染色失敗大幅拓展。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)大部分,盡量縮短觀察時(shí)間重要工具,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)更加堅強,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞提供有力支撐,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)配套設備,這樣通嘲l展成就?梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS建議。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用優勢,不得用于臨床診斷或治療設計,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)品率。
為了您的安全和健康善謀新篇,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。