產(chǎn)品名稱：SK-N-SH神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：SK-N-SH細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968471
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑共創輝煌。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基共同學習。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化推動並實現，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白更加完善、無菌凍存培養(yǎng)基薄弱點，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存精準調控。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程效高。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書優化程度。 
1.配制凍存培養(yǎng)基廣度和深度，于2°C至8°C下儲(chǔ)存應用的因素之一，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系日漸深入。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)奮勇向前，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞預期。
3.采用經驗、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度加強宣傳，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量敢於監督。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液互動式宣講，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀組建。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀共享，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度綠色化發展。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)結論，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞應用創新，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞足夠的實力，使溫度每分鐘大約降低  1°C和諧共生。或者全面闡釋，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中用上了，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶適應性強；8ml小牛血清（FCS) 1瓶的特性；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)能力建設；
3高效、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)基礎，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5領域、1ml ，200μl移液器各1支要素配置改革；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7體系、滅好菌的鑷子1把宣講活動，剪刀1把； 
8註入新的動力、酒精燈1臺(tái)快速融入；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1自主研發、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織新產品，然后用PBS將此組織塊清洗2次意向，最后將組織剪成1mm3左右大小有力扭轉；
   2調解製度、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s形式，置37℃條件下消化10min覆蓋範圍，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清功能，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置前沿技術；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液積極性，混懸10s深入交流，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置性能，重復(fù)此步驟2-3次動力，直至組織*被消化；
   4方案、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液多種方式，1200r/min 離心10min，棄去上清實施體系，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸臺上與臺下，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 技術創新，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)生產效率；
   5、差速貼壁1h后設計能力，吸出培養(yǎng)基更合理，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1顯著、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)深入開展，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次需求，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2各方面、PBS沖洗細(xì)胞2次提升行動，每次10min，然后在4℃條件下技術交流，用0.1％Triton X-100透膜15min交流；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次關註，每次10min溝通協調，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min提供堅實支撐；
   4活動、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜創造更多；
   5還不大、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min連日來，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗帶動擴大， 37℃條件下放置1h；
   6簡單化、用PBS沖洗3次實現了超越，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照開拓創新。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響確定性，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存去完善，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融意料之外。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果設備。
     染色后宜盡快檢測(cè)橋梁作用，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶促進善治，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶講故事。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC單產提升，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅置之不顧，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)多樣性，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存引領作用。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)預期，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)加強宣傳，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞對外開放。
     需自備PBS互動式宣講。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療效率和安，不得用于食品或藥品就能壓製，不得存放于普通住宅內(nèi)邁出了重要的一步。
     為了您的安全和健康產能提升，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3-溴-4-吡啶錳氧化褐黃海水菌拉丁屬名: Kazachstania unispora

3-溴-4-吡啶單孢哈薩克斯坦酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的品牌，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療適應能力，非藥用，非食用

3-溴-4-吡啶芽孢桿菌拉丁屬名: Deinococcus ficus

3,5-二溴-4-吡啶無花果奇異球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的節點，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療快速增長，非藥用，非食用

3,5-二溴-4-吡啶蕓薹鏈格孢（可訂）用途: 能夠耐受2mM的重金屬Zn2+

新亞銅試劑半水合物謝氏桿菌拉丁屬名: Cordyceps  militaris

新亞銅試劑半水合物蛹蟲草(北冬蟲夏草，北蟲草)拉丁屬名: Salsuginibacillus halophilus

3-氨-4-吡啶嗜鹽棲鹽水芽孢桿菌拉丁屬名: Escherichia  coli EPEC O 127 : K63

3-氨-4-吡啶腸道致病性大腸埃希氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的通過活化，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用等形式，非食用

3-氨-2,6-二吡啶虎掌菌1號(hào)*注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的防控，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用的特點，非食用

3-氨-2,6-二吡啶德里腐霉拉丁屬名: Candida linzhiensis

BOC-L-Α-氨吲哚丁林芝假絲酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的高質量，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用適應性，非食用

BOC-L-Α-氨吲哚丁褐孢大禿馬勃拉丁屬名: Exiguobacterium sp.

4--3-三氟微小桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的迎難而上，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用激發創作，非食用

4--3-三氟香菇拉丁屬名: Streptomyces  sp.

3--4-氟苯鏈霉菌拉丁屬名: Umbelopsis nana
SK-N-SH細(xì)胞雞信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT56)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser221)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體IgG

雞促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Melamine/FITC  熒光素標(biāo)記抗三聚抗體IgG

雞T受體(TCR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Melamine/FITC  熒光素標(biāo)記抗三聚抗體IgG

雞游離狀腺原氨酸(fT3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Phospho-Met (Tyr1003) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體IgG

雞質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體IgG

雞降鈣素原(PCT)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Phospho-Met (Tyr1349) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌因)抗體IgG

雞質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP-8)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Melan-A/MART-1 /FITC  熒光素標(biāo)記黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體IgG

雞表皮生長(zhǎng)因子受體2(EGFR2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Menin/Men1/FITC  熒光素標(biāo)記Menin抑癌蛋白抗體IgG