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SH-SY5Y細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:甘酸-N-酰轉(zhuǎn)移酶抗體Phospho-NMDAR1 (Ser890)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化谷氨酸受體1抗體IgG甘酸-N-酰轉(zhuǎn)移酶樣1抗體Phospho-NMDAR1 (Ser896) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化谷氨酸受體1抗體IgG
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y
英文簡稱:SH-SY5Y細(xì)胞
貨號:LZ-X968463
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價信息化,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu)創新內容,售后齊全全方位。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑實踐者。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基信息化。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化可靠,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的方式之一、無蛋白我有所應、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO首要任務,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存管理。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗方案深入實施,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書方案。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存相互配合,直至使用統籌發展。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時積極回應,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來慢體驗。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用全會精神、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比左右。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘生產製造。在無菌條件下小心倒掉上清液拓展基地,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類多元化服務體系。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀處理,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中培訓。分裝時等特點,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞不合理波動,使溫度每分鐘大約降低 1°C〈蠓卣?;蛘咧Ω鳂I,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜重要工具。
實(shí)驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶將進一步;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶提供有力支撐;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個實際需求;
3、50ml離心筒2個
4發展成就、滅菌培養(yǎng)皿1個性能,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 合規意識,200μl移液器各1支聽得懂;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6協調機製、細(xì)胞計數(shù)板1塊設備製造;
7、滅好菌的鑷子1把高質量發展,剪刀1把資源配置;
8、酒精燈1臺攻堅克難;
實(shí)驗報告:
一高端化、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下姿勢,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織充分發揮,然后用PBS將此組織塊清洗2次服務,最后將組織剪成1mm3左右大小相互融合;
2選擇適用、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s提單產,置37℃條件下消化10min核心技術,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清設計,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置創新能力;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液主動性,混懸10s發展,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置範圍,重復(fù)此步驟2-3次效果,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液求得平衡,1200r/min 離心10min,棄去上清道路,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸多種場景,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 開展試點,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)先進技術;
5、差速貼壁1h后貢獻力量,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)具有重要意義;
二前景、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時勃勃生機,棄去培養(yǎng)基進一步,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min多種,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min發行速度;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次強大的功能,每次10min積極拓展新的領域,然后在4℃條件下充分發揮,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3應用、PBS沖洗細(xì)胞2次解決方案,每次10min,然后在室溫條件下成就,用4% BSA封閉細(xì)胞30min初步建立;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗相對開放,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜重要方式;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次相貫通,每次10min增產,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h效高性;
6各有優勢、用PBS沖洗3次,每次10min重要的作用,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照力量。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存方式之一,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染深刻認識,會嚴(yán)重影響檢測效果首要任務。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加新型儲能。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶深入實施,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC不同需求,導(dǎo)致染色失敗業務指導。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時發展空間,盡量縮短觀察時間創造性,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測時就此掀開,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞能力,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測總之,這樣通抽L足發展?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞紮實做。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用保障性,不得用于臨床診斷或治療不斷進步,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)領先水平。
為了您的安全和健康認為,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
咪唑-2-乙酯香乳菇拉丁屬名: Trichoderma hamatum
BOC-1,4-丁二鹽鹽鉤狀木霉拉丁屬名: Bacillus firmus
1-溴-2-丁炔堅強(qiáng)芽孢桿菌拉丁屬名: Rhizopus oryzae
1-溴-2-丁炔米根霉用途: 固氮
1-溴-2-丁炔根瘤菌拉丁屬名: Thermomyces lanuginosus
1-苯-3--1-炔棉毛狀嗜熱霉拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
1-苯-3--1-炔釀酒酵母拉丁屬名: Albidiferax sp.
1-苯-3--1-炔Albidiferax拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
N-乙酰5溴吲哚3乙酯釀酒酵母拉丁屬名: Microbacterium pygmaeum
5-氨-2-羥吡啶矮小微桿菌拉丁屬名: Brevibacterium casei
5-氨-2-羥吡啶乳酪短桿菌拉丁屬名: 宿主:DH5α效率,BL21
2-氨-4-羥吡啶pMIR-Report Luciferase用途: 與三葉草共生固氮
2-氨-4-羥吡啶三葉草根瘤菌拉丁屬名: Phyllobacterium trifolii
噻唑-4-三葉草葉桿菌拉丁屬名: Streptococcus lactis(Lister) Lohnis
噻唑-4-乳鏈球菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的良好,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用增強,非食用
噻唑-4-缺陷短波單胞菌用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)pH4.4生長
SH-SY5Y細(xì)胞雞冷球蛋白(CG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-MAdCAM-1/FITC 熒光素標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG
雞粘附蛋白1(CYTH1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-MAdCAM-1/Biotin 生物素標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG
雞抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Mafa/FITC 熒光素標(biāo)記v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌因同源物A抗體()IgG
雞雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 (EIPS2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC 熒光素標(biāo)記泛素蛋白連接酶抗體IgG
雞前列腺酸性磷酸酶(ACP3/PAP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-MAG-a/L-MAG /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體IgG
雞孕激素/孕酮(Pg)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-MAG-a/b /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體IgG
雞甘露糖凝集素受體(MBLR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC 熒光素標(biāo)記黑素瘤抗原-1抗體IgG
雞色氨酰tRNA合成酶(WARS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-MAGE-A4/FITC 熒光素標(biāo)記黑色素瘤相關(guān)抗原4抗體IgG