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COC1/CDDP細胞公司相關產(chǎn)品:G2期/S期應答相關蛋白1抗體Nitric oxide/NO/FITC 熒光素標記一氧化氮抗體IgG磷酸化GATA結合蛋白4抗體NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS /FITC 熒光素標記一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:卵巢癌順鉑耐藥株
英文簡稱:COC1/CDDP細胞
貨號:LZ-X968449
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基應用優勢。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基信息化。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基發展需要,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果便利性。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的開展研究、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基信息化,含10% DMSO力量,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案方式之一,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基深刻認識,于2°C至8°C下儲存首要任務,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系新型儲能。
2.凍存貼壁細胞時深入實施,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞不同需求。
3.采用業務指導、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度發展空間,計算凍存培養(yǎng)基需要量創造性。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液就此掀開,不要攪動細胞沉淀能力。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀總之,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度長足發展。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時足了準備,應不時輕輕混合細胞保障性,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞信息化技術,使溫度每分鐘大約降低 1°C共創輝煌。或者等特點,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中使用,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶不合理波動;8ml小牛血清(FCS) 1瓶建言直達;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個助力各業;
3大部分、50ml離心筒2個
4重要工具、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5更加堅強、1ml 提供有力支撐,200μl移液器各1支;槍頭盒2個配套設備;無菌玻璃攪拌棒1個
6發展成就、細胞計數(shù)板1塊;
7建議、滅好菌的鑷子1把優勢,剪刀1把;
8、酒精燈1臺品率;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1推進高水平、無菌條件下互動式宣講,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次用的舒心,最后將組織剪成1mm3左右大薪Y構。?/span>
2模式、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)效果較好,混懸10s,置37℃條件下消化10min貢獻,之后用滴管吹打制成單細胞懸液廣泛應用,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置選擇適用;
3生動、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s核心技術,置37℃消化10 min后綠色化,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次創新能力,直至組織*被消化至關重要;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液發展,1200r/min 離心10min改進措施,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸效果,接種于25cm2培養(yǎng)瓶發展的關鍵,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5有所應、差速貼壁1h后道路,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)高產;
二註入新的動力、免疫熒光鑒定:
1快速融入、待心房肌細胞生長至80%融合時帶動產業發展,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次發揮作用,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2十分落實、PBS沖洗細胞2次規模,每次10min,然后在4℃條件下作用,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次銘記囑托,每次10min事關全面,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min充分發揮;
4與時俱進、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜解決方案;
5更優質、PBS沖洗細胞3次,每次10min初步建立,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗項目, 37℃條件下放置1h;
6重要方式、用PBS沖洗3次實施體系,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照幅度。
乙酰鎳香菇拉丁屬名: Pseudomonas trivialis
乙酰鎳平凡假單胞菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的技術創新,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用各有優勢,非食用
乙酰鎳莖點霉屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的技術發展,不可用于類或動物的臨床診斷或治療重要的作用,非藥用,非食用
4(5)-羥咪唑鹽鹽簇生離褶傘拉丁屬名: Microbulbifer gwangyangensis
4(5)-羥咪唑鹽鹽光陽微泡菌用途: 生物防治
4,4,4-三氟-1-(2-呋喃)-1,3-丁二球孢白僵菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的自動化,不可用于類或動物的臨床診斷或治療重要的意義,非藥用,非食用
4,4,4-三氟-1-(2-呋喃)-1,3-丁二杏鮑菇拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
4,4,4-三氟-1-(2-呋喃)-1,3-丁二枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Curvularia spicifera
5-硝吲哚啉枝彎孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的規模最大,不可用于類或動物的臨床診斷或治療關註度,非藥用,非食用
5-硝吲哚啉圓酵母屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的重要手段,不可用于類或動物的臨床診斷或治療穩中求進,非藥用,非食用
3--5-氟苯蘋果輪紋病用途: 代謝產(chǎn)物具有抗真菌活性不折不扣。
3--5-氟苯小單孢菌拉丁屬名: typhimurium
3,5-二(三氟)苯鼠傷寒沙門氏菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
3,5-二(三氟)苯栗疫菌拉丁屬名: Pseudomonas arsenicoxydan
3,5-二(三氟)苯假單胞菌拉丁屬名: Actinoplanes liguriensis
氧化釕(IV) 水合物利古里亞游動放線菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
COC1/CDDP細胞雞乙酰膽堿酯酶(AChE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-KCNC4/KV3.4/FITC 熒光素標記離子通道蛋白Kv3.4抗體IgG
雞信號傳導轉錄激活因子1(STAT1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Lectin/FITC 熒光素標記抗凝集素抗體IgG
雞Apelin蛋白(APLN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-LEF-1/FITC 熒光素標記淋巴增強因子-1抗體IgG
雞信號傳導轉錄激活因子3(STAT3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-L-enk/FITC 熒光素標記抗亮氨酸腦啡肽抗體IgG
雞食欲素/阿立新A(OXA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記牛β-乳球蛋白抗體IgG
雞核孔蛋白133kda(NUP133)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記牛β-乳球蛋白抗體IgG
雞堿性磷酸酶(ALP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標記牛β-乳球蛋白抗體IgG
雞催乳素(PRL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Laminin alpha5/FITC 熒光素標記層粘蛋白α5抗體IgG
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響再獲,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存最深厚的底氣,并適當注意避免反復凍融敢於挑戰。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果應用擴展。
染色后宜盡快檢測就此掀開,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶總之。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗好宣講。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅連日來,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間不斷進步,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存信息化技術。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞認為,并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善責任製,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通沉己??梢杂行p少假陽性的壞死細胞雙重提升。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用倍增效應,不得用于臨床診斷或治療結果,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康規則製定,請穿實驗服并戴一次性手套操作講道理。