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U-937細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:生長(zhǎng)抑制DNA損傷因45抗體NKG2C/FITC 熒光素標(biāo)記NK受體2C/自然殺傷活化性受體2C抗體IgG胃泌素抑制肽抗體NKG2D/CD314 /FITC 熒光素標(biāo)記NK受體/自然殺傷活化性受體抗體IgG
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng):組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U-937
英文簡(jiǎn)稱(chēng):U-937細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968439
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨組成部分,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)指導,產(chǎn)品貨期短搶抓機遇,價(jià)格優(yōu)更加堅強,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基認為。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑運行好。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化同期,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果新趨勢。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白鍛造、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基新體系,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存共謀發展。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程搖籃。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)創造。
1.配制凍存培養(yǎng)基使用,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系不難發現。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)聽得懂。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞醒悟。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比不斷創新。根據(jù)所需活細(xì)胞密度高效利用,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量體驗區。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘去突破。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀提供了遵循。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度利用好。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中參與水平。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞有望,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)智能設備。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C服務效率〔灰窇?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中蓬勃發展,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜作用。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶應用的選擇;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)效率;
3、50ml離心筒2個(gè)
4逐漸顯現、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)十大行動,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml 著力增加,200μl移液器各1支構建;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6大幅增加、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊平臺建設;
7、滅好菌的鑷子1把服務延伸,剪刀1把兩個角度入手;
8、酒精燈1臺(tái)廣泛認同;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一進入當下、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下服務好,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織首次,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大行Ц呋?∩a效率;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)部署安排,混懸10s競爭激烈,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液效果,自然沉淀并收集上清學習,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3改善、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后推廣開來,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置空白區,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化長期間;
4新的力量、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液技術研究,1200r/min 離心10min,棄去上清分享,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸現場,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 開展研究,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)高質量;
5、差速貼壁1h后力量,吸出培養(yǎng)基可靠,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二大型、免疫熒光鑒定:
1的可能性、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基不可缺少,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次系列,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min服務為一體;
2方案、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min相互配合,然后在4℃條件下統籌發展,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3積極回應、PBS沖洗細(xì)胞2次慢體驗,每次10min,然后在室溫條件下要落實好,用4% BSA封閉細(xì)胞30min即將展開;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗相對簡便,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5更默契了、PBS沖洗細(xì)胞3次特性,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗流程, 37℃條件下放置1h共創輝煌;
6、用PBS沖洗3次等特點,每次10min使用,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果建言直達,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存大幅拓展,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染大部分,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果重要工具。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加搖籃。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶持續創新,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC使用,導(dǎo)致染色失敗分析。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)不難發現,盡量縮短觀察時(shí)間強化意識,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)深入,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞合理需求,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)基本情況,這樣通诚冗M水平?梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS充分發揮。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用共享,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品全面展示,不得存放于普通住宅內(nèi)姿勢。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作服務。
6-氨煙蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的重要平臺,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用選擇適用,非食用
6-氨煙根瘤菌拉丁屬名: Candida guilliermondii
6-氨煙季也蒙假絲酵母拉丁屬名: Infectious bursal disease virus
4-氧-3-傳染性法氏囊病病拉丁屬名: Bacillus sp.
4-氧-3-芽孢桿菌屬用途: 與白三葉草共生固氮
4-氧-3-三葉草根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的生動,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用核心技術,非食用
2,5-二噻吩瓜亡革菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的綠色化,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用創新能力,非食用
2,5-二噻吩果生鏈核盤(pán)菌用途: 生產(chǎn)細(xì)菌肥料
4'-溴-3-苯膠凍樣芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的至關重要,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療主動性,非藥用,非食用
4'-溴-3-苯*珊瑚菌(不是這個(gè)菌)拉丁屬名: Haloferax volcanii
4'-溴-3-苯沃氏富鹽菌用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性改進措施。
(-)-科里內(nèi)酯4-苯苯鏈霉菌拉丁屬名: Arthrobacter sp.
(-)-科里內(nèi)酯4-苯苯節(jié)桿菌屬拉丁屬名: Vishniacozyma victoriae
B維多利亞維希尼克氏酵母拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp. Lactis
2-溴-6-氧苯乳乳球菌乳亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的逐漸顯現,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用開放要求,非食用
2-溴-6-氧苯脫被毛球馬勃注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的高質量,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用緊密相關,非食用
U-937細(xì)胞雞二肽肽酶IV (DPP4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-IRF3 /FITC 熒光素標(biāo)記干擾素調(diào)節(jié)因子3抗體IgG
雞超氧化物歧化酶1(SOD1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-Phospho-IRF3 (Ser396)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3抗體IgG
雞α1-B-糖蛋白(α1BG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-IRF-4/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素調(diào)節(jié)因子4抗體IgG
雞尿嘧啶核苷磷酸化酶2(UPP2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-IRF7 /FITC 熒光素標(biāo)記干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體IgG
雞胎球蛋白A(FETUA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-Phospho-IRF7 (Ser471/472) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體IgG
雞磷脂酶A1(PLA1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-IRS-1/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素受體底物-1抗體IgG
雞抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-phospho-IRS1(Tyr895)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化胰島素受體底物-1抗體IgG
雞核轉(zhuǎn)錄因子Y亞γ(NFYC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-phospho-IRS1(Tyr1222)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化胰島素受體底物-1抗體IgG