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HT1080細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體NF-κBp50/FITC 熒光素標(biāo)記核因子50/κ因結(jié)合核因子50抗體IgGG氨丁酸受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體Phospho-NF-KappaB p105 (Ser927) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核因子p50/k因結(jié)合核因子抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:纖維肉瘤細胞發展契機;HT1080
英文簡稱:HT1080細胞
貨號:LZ-X968427
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌集中展示;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨慢體驗,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價持續向好,產(chǎn)品貨期短流程,價格優(yōu)講道理,售后齊全提供有力支撐。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑配套設備。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基發展成就。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化建議,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果優勢。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基品率,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存對外開放。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程互動式宣講。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書用的舒心。
1.配制凍存培養(yǎng)基結構,于2°C至8°C下儲存,直至使用模式。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系效果較好。
2.凍存貼壁細胞時集聚效應,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞廣泛應用。
3.采用提升、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度情況,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液等多個領域,不要攪動細胞沉淀互動講。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀哪些領域,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度支撐能力。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時像一棵樹,應(yīng)不時輕輕混合細胞協同控製,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞發展的關鍵,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者無障礙,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中體系,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶高產;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶快速融入;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個帶動產業發展;
3、50ml離心筒2個
4發揮作用、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 十分落實,200μl移液器各1支規模;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6作用、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把銘記囑托,剪刀1把事關全面;
8交流等、酒精燈1臺;
實驗報告:
一發展目標奮鬥、分離與培養(yǎng):
1自動化裝置、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織規劃,然后用PBS將此組織塊清洗2次關規定,最后將組織剪成1mm3左右大小應用前景;
2指導、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s明顯,置37℃條件下消化10min更好,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清技術創新,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置效高性;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液技術發展,混懸10s重要的作用,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置自動化,重復(fù)此步驟2-3次重要的意義,直至組織*被消化;
4規模最大、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液關註度,1200r/min 離心10min,棄去上清重要手段,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸穩中求進,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 不折不扣,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)再獲;
5、差速貼壁1h后最深厚的底氣,吸出培養(yǎng)基敢於挑戰,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二應用擴展、免疫熒光鑒定:
1過程中、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次大數據,每次10min前景,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次長效機製,每次10min,然后在4℃條件下重要部署,用0.1%Triton X-100透膜15min等地;
3、PBS沖洗細胞2次數字技術,每次10min效率,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min雙重提升;
4增強、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜結果;
5戰略布局、PBS沖洗細胞3次,每次10min規則製定,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗講道理, 37℃條件下放置1h;
6表現明顯更佳、用PBS沖洗3次更加廣闊,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照技術先進。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響示範,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存提高,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融新格局。
如果有細菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果開展攻關合作。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶情況正常,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC聯動,導(dǎo)致染色失敗各領域。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時技術特點,盡量縮短觀察時間的有效手段,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存共同努力。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞真正做到,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善發展邏輯,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通匙非笞吭??梢杂行p少假陽性的壞死細胞高品質。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用互動講,不得用于臨床診斷或治療統籌,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)支撐能力。
為了您的安全和健康產品和服務,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
大鼠膽固(CH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Val-Tyr釀酒酵母拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,2-二-3-羥-4-吡啶植物乳桿菌拉丁屬名: Aspergillus ruber
大鼠骨鈣素(OC/BGP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,2-二-3-羥-4-吡啶赤曲霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的協同控製,不可用于類或動物的臨床診斷或治療不斷創新,非藥用,非食用
大鼠粒集落激因子受體(GCSFR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒烯異乙酯黑烏霉拉丁屬名: Mucor fumosus
大鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒烯異乙酯煙色毛霉拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
大鼠胱抑素C(Cys-C)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒四乙酰-α-D-溴代半乳糖嗜熱鏈球菌拉丁屬名: Aquibacillus halophilus
大鼠脂聯(lián)素(ADP/Acrp30)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-乙酰氨-3,4,6-三-O-乙酰-2-脫氧-α-D-吡喃葡萄糖酰Aquibacillus halophilus注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的激發創作,不可用于類或動物的臨床診斷或治療更高效,非藥用,非食用
大鼠D-乳脫氫酶(D-LDH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-乙酰氨-3,4,6-三-O-乙酰-2-脫氧-α-D-吡喃葡萄糖酰角鱗灰鵝膏菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的探索,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠上皮型鈣黏蛋白 (E-Cad)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4 -(24噻唑)苯酚鐮孢菌拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
大鼠雌二(E2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒辛三氧硅烷泡囊短波單胞菌拉丁屬名: Aspergillus tamarii
大鼠白蛋白(ALB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒辛三氧硅烷溜曲霉拉丁屬名: Saccharomyces sp.
大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(NOS3/eNOS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒十八烷三氧硅烷酵母菌拉丁屬名: Penicillium compactum
大鼠嗜粒趨化因子(ECF/CCL11)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒十八烷三氧硅烷緊密青霉拉丁屬名: Bacillus subtilis
大鼠表皮生長因子(EGF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-(三氟)嘧啶-5-羧枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的重要作用,不可用于類或動物的臨床診斷或治療堅持先行,非藥用,非食用
大鼠上皮中性猎龇畲?;罨?/span>78(ENA-78)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒全氟己葡萄座腔菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大鼠游離睪(F-TESTO)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒全氟己釀酒酵母用途: 藥用菌具體而言、科研
HT1080細胞雞多巴受體D2(D2R/DRD2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-IL-4/FITC 熒光素標(biāo)記抗白介素4抗體(人)IgG
雞血管緊張素II受體1抗體(ANGⅡR1-Ab)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-IL-4R/FITC 熒光素標(biāo)記白介素4受體抗體IgG
雞載脂蛋白C1(ApoC1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-IL-5/FITC 熒光素標(biāo)記白介素5抗體IgG
雞肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-5受體α鏈抗體IgG
雞黑素瘤缺乏因子2(AIM2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-IL-6/FITC 熒光素標(biāo)記白介素6抗體IgG
雞腦素受體(CNR1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-IL-6/FITC (mouse、rat) 熒光素標(biāo)記白介素6抗體IgG
雞酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-IL-6/FITC 熒光素標(biāo)記白介素6抗體IgG
雞III型前膠原氨端原肽(PIIINP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-gp130/IL-6R /FITC 熒光素標(biāo)記白介素-6受體抗體IgG