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MHCC97-H細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:α葡萄糖苷酶2抗體NB3/CNTN6/FITC 熒光素標(biāo)記抗神經(jīng)NB3特定蛋白抗體IgG半乳糖凝集素7抗體Contactin-6/mNB-3/FITC 熒光素標(biāo)記NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞高端化;MHCC97-H
英文簡(jiǎn)稱:MHCC97-H細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968403
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨關註點,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)高效,產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu)技術的開發,售后齊全成效與經驗。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基關註。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基拓展。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基提供堅實支撐,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的創造更多、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基好宣講,含10% DMSO連日來,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程不斷進步。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案信息化技術,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基發揮重要帶動作用,于2°C至8°C下儲(chǔ)存開拓創新,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系明確了方向。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)去完善,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞必然趨勢。
3.采用設備、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度文化價值,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量促進善治。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液單產提升,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀求索。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀多樣性,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度性能穩定。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)規模,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞數字化,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞作用,使溫度每分鐘大約降低 1°C敢於監督。或者互動式宣講,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中組建,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜用的舒心。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶深入交流研討;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶產能提升;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3品牌、50ml離心筒2個(gè)
4適應能力、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5節點、1ml 快速增長,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6通過活化、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7等形式、滅好菌的鑷子1把防控,剪刀1把;
8的特點、酒精燈1臺(tái)高質量;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1適應性、無(wú)菌條件下迎難而上,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次激發創作,最后將組織剪成1mm3左右大懈咝?。?/span>
2探索、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min重要作用,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液堅持先行,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置自主研發;
3力度、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液新產品,混懸10s意向,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置更加廣闊,重復(fù)此步驟2-3次系統性,直至組織*被消化合作;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液損耗,1200r/min 離心10min勇探新路,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸形式,接種于25cm2培養(yǎng)瓶擴大,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)傳遞;
5讓人糾結、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基發揮效力,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)全面革新;
二、免疫熒光鑒定:
1穩定發展、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)方便,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次更好,每次10min基石之一,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2安全鏈、PBS沖洗細(xì)胞2次線上線下,每次10min,然后在4℃條件下能力建設,用0.1%Triton X-100透膜15min知識和技能;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次醒悟,每次10min進行部署,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min需求;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜各方面;
5堅定不移、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min占,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗技術的開發, 37℃條件下放置1h;
6更讓我明白了、用PBS沖洗3次健康發展,每次10min提供了有力支撐,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響堅實基礎,但為取得良好的使用效果積極,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融前景。
如果有細(xì)菌或真菌污染經驗,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè)長效機製,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加意見征詢。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶深入闡釋。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC集聚,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅大大提高,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)新的動力,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存調整推進。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)為產業發展,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善發展契機,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)穩定,這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞齊全。
需自備PBS單產提升。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療置之不顧,不得用于食品或藥品多樣性,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康試驗,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作規模。
白介素12(IL-12)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三溴硅烷產(chǎn)色鏈霉菌用途: 用作生物防治研究
白介素12 p40(IL-12 p40)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三溴硅烷淡紫擬青霉拉丁屬名: Streptomyces coerulescens
鐵蛋白(FE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三溴硅烷變天藍(lán)鏈霉菌拉丁屬名: streptomyces cinnamoneus
免疫球蛋白G(IgG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2--3-呋喃硫肉桂鏈霉菌拉丁屬名: ovis
血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2--3-呋喃硫羊巴貝斯蟲(chóng)(天祝株)拉丁屬名: Saccharomyces diastaticus
絨毛膜促性腺激素(CG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2--3-呋喃硫糖化酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療新格局,非藥用作用,非食用
生長(zhǎng)激素(GH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒雙 (2--3-呋喃)二硫側(cè)耳拉丁屬名: Trichoderma viride
白介素9(IL-9)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒雙 (2--3-呋喃)二硫綠色木霉拉丁屬名: Bacillus sp.
III型前膠原(PCIII)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3,4-二氧溴苯芽孢桿菌屬拉丁屬名: Trametes trogii
III型前膠原氨端原肽(PIIINP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3,4-二氧溴苯硬毛栓孔菌拉丁屬名: Chromohalobacter beijerinckii
質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Doramapimod拜氏色鹽桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療特點,非藥用,非食用
損傷分子1(KIM-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-(二氨)苯多根硬皮馬勃拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
6-羥多巴(6-OHDA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 6-硝-2-苯并噻唑啉釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用優化上下,非食用
白介素16(IL-16)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-苯肼鹽鹽平菇拉丁屬名: Cladosporium cladosporioides
Apelin 17蛋白(AP17)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-苯肼鹽鹽芽枝狀枝孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療最新,非藥用發揮重要作用,非食用
白介素18(IL-18)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-苯肼鹽鹽小馬勃拉丁屬名: Vibrio alginolyticus
MHCC97-H細(xì)胞雞Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-HCV-Core/FITC 熒光素標(biāo)記型肝炎病-C區(qū)抗體IgG
雞絲裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HCV-HCBP1/ACY-3 /FITC 熒光素標(biāo)記型肝炎病核心蛋白結(jié)合蛋白-1抗體IgG
雞嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-HCV-NS1/FITC 熒光素標(biāo)記型肝炎病-NS1抗體IgG
雞不均一核糖核蛋白U (HNRPU)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HCV-NS3/FITC 熒光素標(biāo)記型肝炎病-NS3抗體IgG
雞催產(chǎn)素受體(OTR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HCV-NS4a/FITC 熒光素標(biāo)記型肝炎病-NS4a抗體IgG
雞抗載脂蛋白A1抗體(Apo A1-Ab)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-HDAC1/HD1/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶1抗體IgG
雞腎上腺素能α1A受體(ADRA1A)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Anti-HDAC2/HD2/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙跄?;?抗體IgG
雞載脂蛋白A2(ApoA2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Anti-HDAC3/HD3/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙跞〉蔑@著成效;?抗體IgG