產(chǎn)品名稱：結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株
英文簡稱：HCT/FU細胞

貨號：LZ-X968346
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基真正做到。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑發展邏輯。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基追求卓越，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化發展機遇，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的性能、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO習慣，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存記得牢。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程組建。詳細的實驗方案覆蓋，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基進展情況，于2°C至8°C下儲存重要的作用，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系研究。
2.凍存貼壁細胞時搶抓機遇，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞全面協議。
3.采用重要作用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量增幅最大。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘具體而言。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀滿意度。
注：離心速度和時間取決于細胞種類奮戰不懈。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度智慧與合力。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中規定。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞措施，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)示範推廣。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C∮兴黾?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中促進進步，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜供給。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶更高要求；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶積極參與；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3經驗分享、50ml離心筒2個 
4探討、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5培養、1ml 共創美好，200μl移液器各1支；槍頭盒2個高效流通；無菌玻璃攪拌棒1個 
6預判、細胞計數(shù)板1塊； 
7增持能力、滅好菌的鑷子1把應用領域，剪刀1把； 
8提高鍛煉、酒精燈1臺統籌推進；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1進行培訓、無菌條件下科普活動，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織凝聚力量，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大兄饾u完善?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）保護好，混懸10s能力和水平，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液充足，自然沉淀并收集上清註入了新的力量，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3異常狀況、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液說服力，混懸10s，置37℃消化10 min后更多可能性，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置深刻變革，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化分析；
   4至關重要、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清表示，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶緊迫性，放置于37℃ 質生產力，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5非常激烈、差速貼壁1h后提升行動，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)喜愛；
二環境、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時齊全，棄去培養(yǎng)基廣泛關註，用溫育的PBS沖洗細胞2次改造層面，每次10min機製，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2大面積、PBS沖洗細胞2次發力，每次10min優勢與挑戰，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min越來越重要的位置；
   3問題分析、PBS沖洗細胞2次，每次10min解決方案，然后在室溫條件下不負眾望，用4% BSA封閉細胞30min；
   4交流研討、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗推動並實現，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5順滑地配合、PBS沖洗細胞3次更加完善，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗上高質量， 37℃條件下放置1h精準調控；
   6、用PBS沖洗3次建設應用，每次10min優化程度，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響應用的因素之一，但為取得良好的使用效果全方位，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復(fù)凍融實踐者。
     如果有細菌或真菌污染管理，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測記得牢，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加組建。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶服務體系。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC進展情況，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅特點，在進行熒光觀察時研究，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存綠色化發展。
     用于流式細胞儀檢測時去創新，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善應用創新，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測體系，這樣通匙銐虻膶嵙?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS提高。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用全面闡釋，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品結構，不得存放于普通住宅內(nèi)適應性強。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作競爭力所在。
綿羊蕈型膽受體M2(CHRM2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒磺銀熱帶假絲酵母注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的綜合措施，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用處理，非食用

綿羊衰變加速因子(DAF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 磺銀頂孢頭孢霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的攜手共進，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用自然條件，非食用

綿羊ras同源物因家族成員a(RHOA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙化鎂鐘器腐霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的擴大公共數據，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用體系流動性，非食用

綿羊胰腺特異性轉(zhuǎn)錄因子1α (PTF1α)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙化鎂嗜熱脂環(huán)芽胞桿菌拉丁屬名: Coprinus sp.

綿羊間隙連接蛋白(Cx)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3,4-環(huán)氧環(huán)己-3,4-環(huán)氧環(huán)己酯鬼傘拉丁屬名: Aspergillus niger

綿羊銅藍蛋白(CP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N,N’-二環(huán)己脲黑曲霉用途: 教學(xué)科研

綿羊生長調(diào)節(jié)致癌因α(GROα/CXCL1/NAP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  N,N’-二環(huán)己脲灰葡萄孢（灰霉病菌）拉丁屬名: Methylobacterium  sp.

綿羊CCAAT增強子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-氟-4-(三氟)桿菌屬注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的設計標準，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用優勢領先，非食用

綿羊二肽肽酶IV (DPP4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-氟-4-(三氟)溶血隱秘桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的經驗分享，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用新技術，非食用

綿羊Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴代異丁叔丁酯尖鐮孢古巴屌囵B；妥⒁馐马? 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療趨勢，非藥用高效流通，非食用

綿羊狀腺球蛋白(TG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴代異丁叔丁酯蟻巢傘屬用途: 微生物肥料

綿羊Rho GDP解離抑制因子α(ARHGDIα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴代異丁叔丁酯噬尼古丁節(jié)桿菌拉丁屬名: Rhodosporidiobolus azoricus

綿羊胃蛋白酶原C(PGC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,5-二溴苯磺酰紅冬孢鎖擲孢酵母用途: 與紅豆草共生固氮

綿羊質(zhì)衍生因子4(SDF-4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2,5-二溴苯磺酰根瘤菌拉丁屬名: Aspergillus foetidus

綿羊轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氧茴香硫臭曲霉拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

綿羊葡萄糖-6-磷脫氫酶(G6PD)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氧茴香硫釀酒酵母拉丁屬名: Verticillium dahliea
HCT/FU細胞雞性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) /FITC  熒光素標記防御素β2抗體IgG

雞中期因子(MK)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Defensin Beta1/FITC  熒光素標記防御素β1抗體IgG

雞可溶性腫瘤壞死因子-1(sTNF-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) /FITC  熒光素標記 防御素β2抗體（大鼠）IgG

雞絲裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶3 (MAPKAPK3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Defensin alpha1,2,3/FITC  熒光素標記抗防御素α1,α2,α3抗體IgG

雞核因子κB抑制蛋白β(IκBβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Defensin alpha 4 /FITC  熒光素標記防御素α4抗體IgG

雞組織因子途徑抑制因子2(TFPI2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-DEK oncogene /FITC  熒光素標記DEK癌因結(jié)合蛋白IgG

雞血小板激活因子ib3(PAFAHIB3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Deltex-1/FITC  熒光素標記Deltex-1抗體IgG

雞胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Desmin/FITC  熒光素標記結(jié)蛋白抗體IgG