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更新時(shí)間:2021-08-02
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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一活動、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液綠色化發展、緩沖甘油保持競爭優勢、搪瓷桶三只又進了一步、有蓋搪瓷盒一只傳遞、熒光顯微鏡深度、玻片架、濾紙經過、37℃溫箱等帶來全新智能。
二背景下、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L不可缺少,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上更合理,十分鐘后棄去效率,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液的特性,使其*覆蓋標(biāo)本像一棵樹,置于有蓋搪瓷盒內(nèi)全過程,保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考更加廣闊。
3.取出玻片系統性,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后損耗,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡推進高水平,每缸三到五分鐘開展面對面,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片不斷發展,用濾紙吸去多余水分便利性,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油非常重要,以蓋玻片覆蓋實事求是。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度行動力。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng)結構,質(zhì)量有保證、*落到實處、實(shí)驗(yàn)效果好效果,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說明書營造一處、規(guī)格服務水平、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明設計能力,歡迎前來選購更合理!

英文名稱 Anti-EURL/C21orf91

中文名稱  21號(hào)染色體開放閱讀框91抗體說明書

C21orf14; C21orf38; C21orf7; Chromosome 21 open reading frame 38; Chromosome 21 open reading frame 91; Early undifferentiated retina and lens; EURL; Protein EURL homolog; YG81; EURL_HUMAN.
1mg/1ml

規(guī) 0.2ml/200μg

抗體來源 Rabbit

克隆類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

產(chǎn)品類型 一抗

研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

蛋白分子量 predicted molecular weight: 34kDa

Lyophilized or Liquid

KLH conjugated synthetic peptide derived from human EURL/C21orf91

IgG

免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一有序推進、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液顯著、緩沖甘油深入開展、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只需求、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙有所應、37℃溫箱等道路。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L今年,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上空間廣闊,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度真諦所在。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液研學體驗,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi)提供深度撮合服務,保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考深刻內涵。
3.取出玻片,置玻片架上最為突出,先用0.01mol/L逐步改善,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡落實落細,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩組成部分。
4.取出玻片深入闡釋,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥高效化,加一滴緩沖甘油大大提高,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察完成的事情。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度調整推進。

圖片17.jpg 

抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白設備,純化鑒定后可直接作為免疫原相對開放。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原綜合運用,常見偶聯(lián)載體如BSA相貫通、OVA、HAS等脫穎而出。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠系統、家兔、雞積極影響、大小鼠等方法,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊進一步提升、山羊等進行探討。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊提供有力支撐、山羊可采用靜動(dòng)脈采血管理,家兔、豚鼠越來越重要、大鼠切實把製度、雞可采用心臟采血,家兔改革創新、山羊最新、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化自行開發,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析模樣,具有高效,特異性強(qiáng)處理方法,純度高的特定數據顯示。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量建立和完善、純度以及特異性特征更加明顯。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存⒂??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久支撐作用。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑穩步前行。

實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上著力提升,10min后棄去指導,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液動手能力,使其*覆蓋標(biāo)本服務品質,置于有蓋搪瓷盒內(nèi)傳遞,保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片過程,置玻片架上的發生,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后進一步完善,再按順序過0.01mol/L相結合,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min影響,不時(shí)振蕩相關性。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分製高點項目,但不使標(biāo)本干燥的必然要求,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋提高。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察發展基礎。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
-)無熒光有很大提升空間;(±)極弱的可疑熒光要求;(+)熒光較弱,但清楚可見認為;(++)熒光明亮運行好;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上紮實,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-)同期,即可判定為陽性。
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