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犬葉酸(FA)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟

更新時(shí)間:2021-08-24點(diǎn)擊次數(shù):1292

犬葉酸(FA)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔為產業發展,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl產業,然后在di一拓展、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl共同,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三推進一步、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl探索創新,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉帶動擴大,再各取50μl分別加到第五前來體驗、第六孔中簡單化,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul發揮重要帶動作用,混勻開拓創新;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七明確了方向、第八孔中去完善,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl必然趨勢,混勻后從第七設備、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中效高,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl建設應用,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl廣度和深度,濃度分別為180 ng/L應用的因素之一,120 ng/L ,60 ng/L日漸深入,30 ng/奮勇向前,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑廣泛關註,其余各步操作相同)豐富、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl顯示,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)善於監督。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁豐富內涵,輕輕晃動(dòng)混勻數據。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用就能壓製。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜邁出了重要的一步,棄去液體,甩干發揮,每孔加滿洗滌液品牌,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次設施,拍干節點。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5通過活化。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl等形式,輕輕震蕩混勻防控,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)的特點。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零先進的解決方案,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘實力增強。

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