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1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條基石之一,剩余板條用自封袋密封放回4℃註入了新的力量。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔更多的合作機會,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL多種;空白孔不加發行速度。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔積極拓展新的領域,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min充分發揮。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干應用,每孔加滿洗滌液(350μL)解決方案,靜置1min,甩去洗滌液成就,吸水紙上拍干初步建立,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A相對開放、B各50μL重要方式,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL臺上與臺下,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值技術創新。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品效高性,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液技術發展。
3). 除去樣品中的CO 2 (過(guò)過(guò)濾)重要的作用。
4 ). 過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0自動化,孵育約15分鐘重要的意義。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品規模最大。
8 ). 壓碎關註度、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取管理。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白新型儲能。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。