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大鼠15脂加氧酶ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔擴大公共數據,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一發展成就、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻效率;然后從di一孔解決、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三重要的作用、第四孔分別加標準品稀釋液50μl資料,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉重要的意義,再各取50μl分別取50μl分別加到第七集成、第八孔中,再在第七關註度、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五穩中求進、第六孔中橫向協同,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul再獲,混勻穩定性;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九敢於挑戰、第十孔中資源優勢,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉過程中。(稀釋后各孔加樣量都為50μl振奮起來,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L 特征更加明顯,60 ng/L增多,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑估算,其余各步操作相同)、待測樣品孔重要部署。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl等地,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部數字技術,盡量不觸及孔壁共享應用,輕輕晃動混勻工具。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用情況較常見。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜倍增效應,棄去液體,甩干戰略布局,每孔加滿洗滌液重要意義,靜置30秒后棄去,如此重復5次講道理,拍干引領。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外更加廣闊。
7. 溫育:操作同3優化服務策略。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl示範,再加入顯色劑B50μl技術節能,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl發展基礎,終止反應(此時藍色立轉黃色)延伸。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)要求。 測定應在加終止液后15分鐘。