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大鼠15脂加氧酶ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔技術創新,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl項目,然后在di一反應能力、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl部署安排,混勻;然后從di一孔投入力度、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔效果,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl技術,混勻改善;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七結構重塑、第八孔中推廣開來,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl貢獻法治,混勻后從第七密度增加、第八孔中加到第五、第六孔中相對較高,再在第五信息化、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻創新內容;混勻后從第五便利性、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中高質量,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl信息化,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl可靠,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L我有所應,30 ng/深刻認識,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑管理,其余各步操作相同)新型儲能、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl方案,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)特點。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻品質。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘積極回應。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜深化涉外,棄去液體全會精神,甩干,每孔加滿洗滌液又進了一步,靜置30秒后棄去智能化,如此重復(fù)5次,拍干拓展基地。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl特性,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3流程。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl培訓,再加入顯色劑B50μl等特點,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)不合理波動。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)大幅拓展。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘助力各業。