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病毒糖蛋白抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價競爭力。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一姿勢。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等前景。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較全過程。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定標準。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力創造性≡囼??贵w的特異性高,它的識別能力就強更加完善。衡量特異性通常以交叉反應率來表示薄弱點。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定上高質量。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好效高。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度建設應用。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力廣度和深度。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol應用的因素之一。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證
溫馨提示:
在實驗后,請注意回收稀釋的抗體信息嵺`者;厥盏目贵w在進行Western實驗時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體廣泛關註,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗
體豐富,4二保存★@示;厥蘸笾貜褪褂玫目贵w善於監督,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象豐富內涵,可以10000g離心
1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測數據。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長需長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
為了您的安全和健康就能壓製,請穿實驗服并戴一次性手套操作邁出了重要的一步。