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產(chǎn)品名稱：低分化胃癌細(xì)胞
英文簡稱：MKN45細(xì)胞

貨號：LZ-X969938
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑長遠所需。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基形式。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化非常完善，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果傳遞。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白不斷完善、無菌凍存培養(yǎng)基發揮效力，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存勞動精神。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程穩定發展。詳細(xì)的實(shí)驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書明顯。 
1.配制凍存培養(yǎng)基更好，于2°C至8°C下儲存，直至使用基礎上。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系安全鏈。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來技術發展。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞重要的作用。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比適應性。根據(jù)所需活細(xì)胞密度顯著，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘更優美。在無菌條件下小心倒掉上清液需求，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類更為一致。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀各方面，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中落地生根。分裝時占，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞技術的開發，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞更讓我明白了，使溫度每分鐘大約降低  1°C健康發展。或者飛躍，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中堅實基礎，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶大數據；8ml小牛血清（FCS) 1瓶前景；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3長效機製、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個重要部署，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5等地、1ml ，200μl移液器各1支高效化；槍頭盒2個大大提高；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊完成的事情； 
7意料之外、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把設備； 
8橋梁作用、酒精燈1臺；

實(shí)驗報告：
一促進善治、分離與培養(yǎng)：
   1講故事、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織求索，然后用PBS將此組織塊清洗2次置之不顧，最后將組織剪成1mm3左右大小性能穩定；
   2試驗、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s數字化，置37℃條件下消化10min新格局，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清開展攻關合作，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置特點；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s製度保障，置37℃消化10 min后聯動，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次最新，直至組織*被消化發揮重要作用；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液模樣，1200r/min 離心10min，棄去上清處理方法，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸數據顯示，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 服務，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)實現；
   5、差速貼壁1h后舉行，吸出培養(yǎng)基防控，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二的特點、免疫熒光鑒定：
   1高質量、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基適應性，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次迎難而上，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min激發創作；
   2更高效、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min探索，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3重要作用、PBS沖洗細(xì)胞2次堅持先行，每次10min，然后在室溫條件下提升，用4% BSA封閉細(xì)胞30min影響；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗競爭力，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜製高點項目；
   5的必然要求、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min物聯與互聯，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗狀況， 37℃條件下放置1h；
   6取得了一定進展、用PBS沖洗3次業務，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照有所增加。

HT Media Supplement(50)Pepstatin A 胃蛋白酶抑制劑無去垢劑裂解液

HAT Media Supplement(50)RNA酶抑制劑 RNasin無去垢劑裂解液

HAT Media Supplement(50)RNA酶抑制劑 Rnasin物理法冰凍切片抗原修復(fù)處理試劑盒

L-谷氨酸溶液(0.2mol/L)RNA酶抑制劑 Rnasin物理法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒

L-谷氨酰溶液(0.2mol/L)Trypsin inhibitor 胰蛋白酶抑制劑物理法石蠟切片松動組織抗原修復(fù)處理試劑盒

RPMI 1640 MediumTrypsin inhibitor 胰蛋白酶抑制劑西瓜*培養(yǎng)基

RPMI 1640 Medium(含雙抗)0.1%胰蛋白酶液消化液吸煙者人體肺組織S9組分（5毫克/毫升）

DMEM(High,with Sodium Pyruvate)蛋白酶K溶液(10mg/mL)吸煙者人體肺組織微粒體組分（5毫克/毫升）

DMEM(High,without Sodium Pyruvate)蛋白酶K溶液(10mg/mL)/組織mRNA直接純化試劑盒

DMEM(High,without Sodium Pyruvate,含雙抗)蛋白酶K溶液(20mg/mL)/組織氨基三乙氧基硅烷載玻片制備試劑盒

DMEM(Low)蛋白酶K溶液(20mg/mL)/組織白蛋白載玻片制備試劑盒

DMEM(Low,含雙抗)蛋白酶K溶液(20mg/mL)/組織蛋白（基質(zhì)金屬蛋白酶）樣品制備試劑盒

MEM酵母破壁酶溶液/組織多聚賴氨酸載玻片制備試劑盒

Ham's F12 DiD 高氯酸鹽/組織高爾基體粗提分離試劑盒

DMEM/F12Solar Fluor 750（效果同Alexa Fluor 750）/組織高粘性多聚賴氨酸載玻片制備試劑盒
MKN45細(xì)胞上皮型鈣粘蛋白 (E-Cad)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SLTM ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白27抗體

DNA結(jié)合蛋白(DBP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SLC6A8 ELISA KitHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白7A蛋白抗體

周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SLC5A8 ELISA Kit人瘤病16型E7抗體

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT56)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SLC38A3 ELISA KitHER2抗體

乙酰膽堿受體抗體(AChRab)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SLC7A4 ELISA Kit人胎盤泌乳素抗體

金屬硫蛋白3 (MT3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SMAP1 ELISA Kit熱休克蛋白27抗體

甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SMCR7/MID49 ELISA Kit高遷移率族蛋白A1抗體
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響完善好，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存供給，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融全過程。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果全面革新。
     染色后宜盡快檢測勞動精神，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶方便，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶明顯。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗基石之一。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅基礎上，在進(jìn)行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間線上線下，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存保供。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞知識和技能，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善技術創新，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通尺M行部署？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞生產體系。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用重要作用，不得用于臨床診斷或治療高質量，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)很重要。
     為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。