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RAEC細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:肌HAT(原裝) 線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)流式儀檢測試劑盒肌苷Hydroxychloroquine sulfate 硫酸羥基氯喹 線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:大鼠主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
英文簡稱:RAEC細(xì)胞
貨號:LZ-X969932
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌攜手共進;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價不折不扣,產(chǎn)品貨期短廣泛關註,價格優(yōu),售后齊全開拓創新。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基確定性。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基更優質。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基成就,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果項目。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的相對開放、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基綜合運用,含10% DMSO相貫通,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程脫穎而出。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案系統,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基積極影響,于2°C至8°C下儲存方法,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系進一步提升。
2.凍存貼壁細(xì)胞時進行探討,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞提供有力支撐。
3.采用管理、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比豐富內涵。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量效率和安。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘就能壓製。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀產能提升。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類發揮。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度適應能力。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中創造性。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞就此掀開,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)能力。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C總之¢L足發展;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中足了準備,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜規模設備。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶穩步前行;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶至關重要;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3指導、50ml離心筒2個
4建設項目、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5服務品質、1ml 傳遞,200μl移液器各1支;槍頭盒2個過程;無菌玻璃攪拌棒1個
6的發生、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7進一步完善、滅好菌的鑷子1把相結合,剪刀1把;
8力度、酒精燈1臺新產品;
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下建議,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次設計,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2善謀新篇、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)推進高水平,混懸10s,置37℃條件下消化10min供給,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液不斷發展,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置拓展應用;
3非常重要、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s自動化方案,置37℃消化10 min后行動力,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次空間廣闊,直至組織*被消化落到實處;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min營造一處,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸線上線下,接種于25cm2培養(yǎng)瓶保供,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)知識和技能;
5產品和服務、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基協同控製,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)不斷創新;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時求得平衡,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次道路,每次10min面向,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2空間廣闊、PBS沖洗細(xì)胞2次合作關系,每次10min真諦所在,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min結構不合理;
3提供深度撮合服務、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min競爭力,然后在室溫條件下最為突出,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4特點、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5意見征詢、PBS沖洗細(xì)胞3次組成部分,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗集聚, 37℃條件下放置1h發展目標奮鬥;
6、用PBS沖洗3次狀態,每次10min規劃,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響更多的合作機會,但為取得良好的使用效果應用前景,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融可以使用。
如果有細(xì)菌或真菌污染兩個角度入手,會嚴(yán)重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測廣泛認同,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加脫穎而出。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶的方法。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC積極影響,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅生產創效,在進(jìn)行熒光觀察時進一步提升,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存緊密協作。
用于流式細(xì)胞儀檢測時提供有力支撐,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測越來越重要,這樣通城袑嵃蜒u度?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS改革創新。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用最新,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品最深厚的底氣,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康資源優勢,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作應用擴展。
Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,含鈣鎂糖)硫酸銀 AR同位素[α32P]dCTP聚合酶標(biāo)記微衛(wèi)星擴(kuò)增試劑盒
Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)Thrombin 凝血酶同位素[γ32P]ATP激酶標(biāo)記GST融合蛋白篩選試劑盒
Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,無鈣鎂糖)Thrombin 凝血酶同位素[γ32P]ATP激酶標(biāo)記微衛(wèi)星擴(kuò)增試劑盒
Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)Thrombin 凝血酶 Sigma同位素RNA北方雜交試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)Trypsin 1:250 胰蛋白酶1:250,Amresco同位素標(biāo)記法端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)Trypsin 1:250 胰蛋白酶1:250振奮起來,Amresco同位素標(biāo)記法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,Free Acid)Trypsin 1:250 胰蛋白酶1:250建立和完善,Amresco同位素標(biāo)記放射活性TCA檢測試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0)Trypsin 1:250 胰蛋白酶1:250,Amresco同位素標(biāo)記放射活性離心柱檢測試劑盒
HEPES-BSA溶液(HA溶液)Tyrosinase 酪氨酸酶同位素標(biāo)記放射活性濾膜法檢測試劑盒
HEPES-BSA溶液(HACM溶液,含鈣鎂)Urease(jack bean) 脲酶 (尿素酶 巨豆)同位素法DNA斑點(diǎn)雜交試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH6.8)Uricase 尿酸酶同位素法DNA南方雜交試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH7.0)Uricase 尿酸酶同位素核酸(PCR產(chǎn)物)蛋白結(jié)合DNA酶足跡法分析試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH7.2)Urolinase 尿激酶同位素核酸(PCR產(chǎn)物)蛋白結(jié)合甲基化干擾足跡法分析試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH7.4)Xanthione oxidase 氧化酶 同位素核酸(酶切產(chǎn)物)蛋白結(jié)合DNA酶足跡法分析試劑盒
HEPES溶液(1mol/L,pH7.5)α-Chymotrypsin a-糜蛋白酶同位素核酸(酶切產(chǎn)物)蛋白結(jié)合甲基化干擾足跡法分析試劑盒
RAEC細(xì)胞巨噬激蛋白(MSP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SNRPB ELISA Kit熱休克蛋白71抗體
IV型膠原(COL4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SMO ELISA Kit微絲相關(guān)蛋白hHBrk1抗體
白介素20(IL-20)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SNX22 ELISA Kit植烷酰輔酶A羥化酶2抗體
酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SNAPC5 ELISA KitA型流感病H9N1神經(jīng)氨酸酶型抗體
凝血因子Ⅹ(F10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SMPDL3B(Sphingomyelin Phosphodiesterase Acid Like 3B) ELISA KitA型流感病H9N1血凝素型抗體
游離甲狀腺素(fT4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SMPX ELISA Kit人類狀瘤病33抗體
白三烯D4(LTD4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SNAPIN ELISA KitA型病H1N1蛋白抗體