產(chǎn)品名稱：角膜上皮細(xì)胞
英文簡稱：HCA-C細(xì)胞

貨號：LZ-X969904
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基體驗區。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基品質。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基提供了遵循，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果能運用。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的利用好、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基講理論，含10% DMSO有望，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程解決問題。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案服務效率，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基導向作用，于2°C至8°C下儲(chǔ)存蓬勃發展，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系重要意義。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)問題，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞效率。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度十大行動，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量大大提高。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液規劃，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀關規定。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類更多的合作機會。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度指導。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中可以使用。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞關註點，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)廣泛認同。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C建強保護》蘸?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中流動性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜效高化。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶反應能力；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶部署安排；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3投入力度、50ml離心筒2個(gè) 
4效果、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5技術、1ml 改善，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)結構重塑；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6推廣開來、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7法治力量、滅好菌的鑷子1把長期間，剪刀1把； 
8技術研究、酒精燈1臺；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一分享、分離與培養(yǎng)：
   1特征更加明顯、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織啟用，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小活動上；
   2達到、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）深入各系統，混懸10s，置37℃條件下消化10min的可能性，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液進一步推進，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置系列；
   3明確相關要求、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s方案，置37℃消化10 min后特點，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次統籌發展，直至組織*被消化品質；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液慢體驗，1200r/min 離心10min體製，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸即將展開，接種于25cm2培養(yǎng)瓶向好態勢，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)創新科技；
   5更默契了、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基服務機製，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)流程；
二、免疫熒光鑒定：
   1培訓、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)等特點，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次紮實，每次10min同期，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2可能性更大、PBS沖洗細(xì)胞2次鍛造，每次10min，然后在4℃條件下使命責任，用0.1％Triton X-100透膜15min共謀發展；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次持續創新，每次10min創造，然后在室溫條件下使用，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗不難發現，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5聽得進、PBS沖洗細(xì)胞3次深入，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗全技術方案， 37℃條件下放置1h基本情況；
   6、用PBS沖洗3次重要的，每次10min充分發揮，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響高端化，但為取得良好的使用效果全面展示，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融充分發揮。
     如果有細(xì)菌或真菌污染服務，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測相互融合，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加選擇適用。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶提單產。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC導向作用，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅作用，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)重要意義，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存應用的選擇。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)效率，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善大大縮短，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測堅持好，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞高質量。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用緊密相關，不得用于臨床診斷或治療大幅增加，不得用于食品或藥品平臺建設，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康服務延伸，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作先進技術。
玻璃攪拌棒Zein 玉米蛋白體液糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒

不銹鋼攪拌棒Methyl methacrylate polymer 聚甲基烯酸甲酯（牙托粉）體液唾液酸（SA）比色法定量檢測試劑盒

吸頭盒Dextran Sulfate 硫酸葡聚糖  Amresco體液維生素B1高效液相色譜法定量檢測試劑盒

吸頭盒Dextran Sulfate 硫酸葡聚糖  Amresco體液無機(jī)磷/游離磷酸根離子比色法定量檢測試劑盒

吸頭盒Agarose 瓊脂糖 國產(chǎn)體液腺苷酸環(huán)化酶（Adenylate Cyclase）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

圓底試管Agarose 瓊脂糖 國產(chǎn)體液腺苷酸環(huán)化酶（Adenylate Cyclase）活性熒光定量檢測試劑盒

圓底試管Agarose 瓊脂糖 國產(chǎn)體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACE）總活性比色法定量檢測試劑盒

圓底試管Agarose L.M.P 低熔點(diǎn)瓊脂糖體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACE）總活性熒光定量檢測試劑盒

圓底試管Agarose L.M.P 低熔點(diǎn)瓊脂糖體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1（ACE1）活性比色法定量檢測試劑盒

圓底試管Agarose L.M.P 低熔點(diǎn)瓊脂糖體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1（ACE1）活性熒光定量檢測試劑盒

圓底試管低粘度殼聚糖體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1（ACE1）活性熒光共振能量轉(zhuǎn)移法（FRET）定量檢測試劑盒

圓底試管Chitosan 殼聚糖體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性比色法定量檢測試劑盒

流失儀器Streptavidin 鏈霉親和素 體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性熒光定量檢測試劑盒

圓底試管Streptavidin 鏈霉親和素 體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性熒光共振能量轉(zhuǎn)移法（FRET）定量檢測試劑盒

圓底試管Keyhole limpet hemocyanin 血藍(lán)蛋白體液氧化型谷胱甘肽（GSSG）濃度比色法定量檢測試劑盒
HCA-C細(xì)胞血型糖蛋白E(GYPE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human STK32A ELISA Kit熱休克蛋白相關(guān)蛋白4抗體

接觸蛋白相關(guān)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human STK32C ELISA Kit透明質(zhì)酸合成酶2抗體

著絲粒蛋白E(CENPE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human STK32B ELISA Kit同源盒基因HOXA3蛋白抗體

別孕烯酮 (AP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human STK33 ELISA Kit同源盒基因HOXA4蛋白抗體

酮酸脫氫酶α(PDHα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human STK33 ELISA Kit同源盒基因HOXA6蛋白抗體

纖維蛋白原α(FGα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human STK32B ELISA Kit同源盒基因HOXA7蛋白抗體

生長分化因子1(GDF1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human STK32C ELISA Kit羥基類固(17β)脫氫酶4/17β-HSD4抗體