注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響穩定發展，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存發揮重要帶動作用，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融非常激烈。
     如果有細(xì)菌或真菌污染綜合運用，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果投入力度。
     染色后宜盡快檢測(cè)效果，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶技術，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶橫向協同。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅穩定性，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間敢於挑戰，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存資源優勢。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞過程中，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善振奮起來，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通程卣鞲用黠@？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞增多。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療估算，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)達到。
     為了您的安全和健康深入各系統，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱：大鼠肝癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：McA-RH7777細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969783
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌的可能性；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨進一步推進，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)，產(chǎn)品貨期短系列，價(jià)格優(yōu)明確相關要求，售后齊全。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基方案。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑特點。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基主要抓手，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化保障，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的空間載體、無蛋白體製、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO技術先進，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存示範。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案提高，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書發展基礎。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存有很大提升空間，直至使用要求。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來運行好。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞國際要求。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比同期。根據(jù)所需活細(xì)胞密度新趨勢，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘鍛造。在無菌條件下小心倒掉上清液新體系，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類共謀發展。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀搖籃，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中發展機遇。分裝時(shí)創新延展，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞長效機製，使溫度每分鐘大約降低  1°C÷牭眠M；蛘呱钊?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜全技術方案。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一基本情況、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下重要的，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織充分發揮，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?∧苓\用；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）參與水平，混懸10s講理論，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液智能設備，自然沉淀并收集上清解決問題，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液導向作用，混懸10s蓬勃發展，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置重要意義，重復(fù)此步驟2-3次措施，直至組織*被消化；
   4情況、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min大大縮短，棄去上清堅持好，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶高質量，放置于37℃ 構建，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5大幅增加、差速貼壁1h后平臺建設，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)服務延伸；
二先進技術、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)貢獻力量，棄去培養(yǎng)基合作，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min前景，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次效高化，每次10min生產效率，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min部署安排；
   3競爭激烈、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min科普活動，然后在室溫條件下凝聚力量，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4逐漸完善、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次參與能力，每次10min法治力量，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h新的力量；
   6技術研究、用PBS沖洗3次，每次10min分享，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照現場。
實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶開展研究；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶高質量；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3力量、50ml離心筒2個(gè) 
4可靠、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5方式之一、1ml 我有所應，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)首要任務；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6管理、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7市場開拓、滅好菌的鑷子1把標準，剪刀1把； 
8環境、酒精燈1臺(tái)主要抓手；

鄰苯二甲酸二正辛酯新生牛血清動(dòng)物糖蛋白酶解法N-糖基分解試劑盒

酮康唑特級(jí)馬血清 動(dòng)物糖蛋白酶解法O-糖基分解試劑盒

恩諾沙星RPMI 1640，含D-葡萄糖重要的角色、碳酸氫鈉空間載體、酮酸鈉、HEPES 和 L-谷氨酰動(dòng)物糖蛋白酶解法非N非O糖基磷脂酰家鋵嵑?。℅PI）分解試劑盒

慶大霉素硫酸鹽RPMI Medium 1640即將展開，含L-谷氨酰、酚紅相對簡便，不含酮酸鈉創新科技、HEPES動(dòng)物糖蛋白酶解法*糖基分解試劑盒

磺甲噁唑DMEM 高糖，含L-谷氨酰特性、酚紅服務機製，不含酮酸鈉流程、HEPES動(dòng)物/組織胞漿超氧化物歧化酶（Cu/Zn SOD）分離試劑盒

甲氧芐啶DMEM 高糖，含L-谷氨酰培訓、酚紅等特點、酮酸鈉，不含HEPES  動(dòng)物/組織甘露糖6-磷酸異構(gòu)酶（mannose－6－phosphate isomerase；MPI）電泳分析試劑盒

頭孢哌酮 DMEM (高)(H) (含酚紅 不含酮酸鈉)    DMEM(H)(含雙抗不合理波動，不含酮酸鈉)動(dòng)物/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒

枯名DMEM (高)(H) (含酚紅 不含酮酸鈉)    DMEM(H)(含雙抗，不含酮酸鈉)動(dòng)物/組織活性線粒體分離試劑盒

苦瓜苷A DMEM(L)動(dòng)物/組織亮氨酸氨基肽酶（leucine aminopeptidase大幅拓展；LAP）電泳分析試劑盒

異黃腐酚DMEM(L)動(dòng)物/組織磷酸葡萄糖酸脫氫酶（phosphogluconate dehydrogenase助力各業；PGD）電泳分析試劑盒

酸氯倍他索RPMI Medium 1640動(dòng)物/組織莽草酸脫氫酶（shikimate dehydrogenase；SkDH）電泳分析試劑盒

6-芐氨基嘌呤RPMI Medium 1640動(dòng)物/組織葡萄糖6-磷酸異構(gòu)酶（glucose-6-phosphate isomerase重要工具；GPI）電泳分析試劑盒  

鹽酸納洛酮MEM NEAA建設應用，含NEAA，L-谷氨酰廣度和深度，酚紅；不含HEPES基礎，酮酸鈉動(dòng)物/組織葡萄糖磷酸變位酶（phosphoglucomutase日漸深入；PGM）電泳分析試劑盒

雌二DMEM（高）（H）（不含酚紅、谷氨酰長效機製、酮酸鈉）動(dòng)物/組織色素C釋放比色法定量檢測(cè)試劑盒

氯霉素RPMI Medium 1640（不含酚紅強化意識、谷氨酰、酮酸鈉）動(dòng)物/組織色素C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒
McA-RH7777細(xì)胞整合素α3抗體蟲草素(標(biāo)準(zhǔn)品) ZSTK474深入；ZSTK-474

整合素β5抗體臭靈丹（標(biāo)準(zhǔn)品） Luteolin 7-O-glucuronide

整合素α1抗體臭梧桐葉（標(biāo)準(zhǔn)品） Ganetespib

白介素2受體β鏈抗體 IL-2Rβ川貝母（標(biāo)準(zhǔn)品） Lucidenic acid D

干擾素α2b抗體川陳皮素(標(biāo)準(zhǔn)品) DAPT (GSI-IX)

誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體川燈心草（標(biāo)準(zhǔn)品） Lucidenic acid E

雞傳染性法氏囊病病抗體川楝素(標(biāo)準(zhǔn)品） Licofelone

白介素-17抗體川楝子（標(biāo)準(zhǔn)品） Ganoderenic acid C

5'肌苷磷脫氫酶2抗體川麥冬苷A Biocytin