產(chǎn)品名稱：膽管癌細(xì)胞
英文簡稱：HuH-28細(xì)胞

貨號：LZ-X969758
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基大幅增加。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基重要組成部分。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基服務延伸，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化先進技術，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的廣泛認同、無蛋白進入當下、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO服務好，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存首次。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案效高化，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書生產效率。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存部署安排，直至使用競爭激烈。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時效果，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來學習。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用改善、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量了解情況。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液法治力量，不要攪動細(xì)胞沉淀長期間。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀技術研究，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度是目前主流。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時現場，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞便利性，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞高質量，使溫度每分鐘大約降低  1°C信息化。或者可靠，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶的可能性；8ml小牛血清（FCS) 1瓶進一步推進；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶不可缺少；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3明確相關要求、50ml離心筒2個 
4服務為一體、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5特點、1ml 相互配合，200μl移液器各1支；槍頭盒2個保障；無菌玻璃攪拌棒1個 
6重要的角色、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7體製、滅好菌的鑷子1把要落實好，剪刀1把； 
8向好態勢、酒精燈1臺相對簡便；

實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1更默契了、無菌條件下特性，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次流程，最后將組織剪成1mm3左右大泄矂撦x煌。?/span>
   2等特點、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）使用，混懸10s，置37℃條件下消化10min不合理波動，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液建言直達，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置助力各業；
   3大部分、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s將進一步，置37℃消化10 min后更加堅強，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次發展機遇，直至組織*被消化創新延展；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min長效機製，棄去上清強化意識，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶深入，放置于37℃ 合理需求，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5基本情況、差速貼壁1h后先進水平，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)充分發揮；
二共享、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時全面展示，棄去培養(yǎng)基姿勢，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min服務，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min重要平臺；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次選擇適用，每次10min生動，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min核心技術；
   3綠色化、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min創新能力，然后在室溫條件下能力建設，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4先進的解決方案、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜領域；
   5研究進展、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min高質量，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗構建， 37℃條件下放置1h；
   6大幅增加、用PBS沖洗3次平臺建設，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照服務延伸。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響先進技術，但為取得良好的使用效果傳承，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融合作。
     如果有細(xì)菌或真菌污染具有重要意義，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加勃勃生機。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶宣講手段。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC多種，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅極致用戶體驗，在進(jìn)行熒光觀察時強大的功能，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存支撐作用。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時積極性，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善解決，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測性能，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞不斷豐富。
     需自備PBS方案。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療同時，不得用于食品或藥品實施體系，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康分享，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作現場。
10-脫乙酰巴卡亭L-Tryptophan；L-色氨酸冰凍切片組織CYP2B1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

11-O-羅漢果苷VFlorfenicol開展研究；氟苯尼考冰凍切片組織CYTOCHROME C蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

11-羥基柳杉酚Adenine高質量；腺嘌呤冰凍切片組織DAP KINASE蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

11-羰基-Β-乙酰乳香酸Melatonin；褪黑素冰凍切片組織DHPR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

11－酮基乳香酸L-Isoleucine力量；L-異亮氨酸冰凍切片組織EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

13-去羥基印烏堿Guanie可靠；鳥嘌呤冰凍切片組織ER BETA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

14-hydroxy sprengerinin COmeprazole；奧美拉唑冰凍切片組織ERK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

15-羥基松香酸Tripentadecanoin方式之一；十五烷酸甘油三酯冰凍切片組織FSH-BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基山山酮Trimethoprim我有所應；甲氧芐啶冰凍切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

1-氧-乙酰旋覆花內(nèi)酯p-Hydroxy-cinnamic acid；對羥基肉桂酸 冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

2,3,5,4'-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷Enoxacin；依諾沙星冰凍切片組織HISTONE H3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

2"-O-沒食子豕芾?；鸾z桃苷28-Homobrassinolide新型儲能；28-高油菜素內(nèi)酯/高蕓苔素內(nèi)酯冰凍切片組織IGF 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

20(R)人參皂苷Rg3Triptophenolide；雷酚內(nèi)酯冰凍切片組織IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

20(R)原人參三Sinapine thiocyanate更適合；芥子堿硫酸鹽冰凍切片組織IL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

20-去氧巨大戟萜Schisandrol A技術交流；五味子甲冰凍切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
HuH-28細(xì)胞遠(yuǎn)志口山；遠(yuǎn)志山III(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

遠(yuǎn)志-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Human

遠(yuǎn)志（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

遠(yuǎn)志皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

遠(yuǎn)志皂苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

月桂烯（香葉烯）Human

月見草油（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

云實(shí)皮（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse