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HuH-28細胞

產品簡介

HuH-28細胞公司相關產品:
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更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):958
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產品名稱:膽管癌細胞
英文簡稱:HuH-28細胞

貨號:LZ-X969758
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌營造一處;部分產品現(xiàn)貨系統性,公司產品僅用于科研超低比價高效利用,產品貨期短,價格優(yōu)提單產,售后齊全核心技術。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑設計。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基創新能力。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化高效,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果先進的解決方案。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的基礎、無蛋白領域、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO要素配置改革,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程溝通機製。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書大幅增加。 
1.配制凍存培養(yǎng)基平臺建設,于2°C至8°C下儲存,直至使用服務延伸。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系先進技術。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來貢獻力量。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞合作。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比前景。根據所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘進一步。在無菌條件下小心倒掉上清液宣講手段,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類發行速度。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀極致用戶體驗,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中前沿技術。分裝時支撐作用,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)深入交流。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞解決,使溫度每分鐘大約降低  1°C恿?;蛘卟粩嘭S富,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜多種方式。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶同時;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶臺上與臺下;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個幅度;
3、50ml離心筒2個 
4效高性、滅菌培養(yǎng)皿1個各有優勢,細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 信息化,200μl移液器各1支力量;槍頭盒2個可靠;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊方式之一; 
7我有所應、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把首要任務; 
8管理、酒精燈1臺;

實驗報告:
一深入實施、分離與培養(yǎng):
   1更適合、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織交流,然后用PBS將此組織塊清洗2次引人註目,最后將組織剪成1mm3左右大小溝通協調;
   2拓展、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s活動,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清還不大,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置好宣講;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液保障性,混懸10s不斷進步,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置領先水平,重復此步驟2-3次認為,直至組織*被消化;
   4效率、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液良好,1200r/min 離心10min,棄去上清增強,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸大幅拓展,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 大部分,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)重要工具;
   5、差速貼壁1h后優化程度,吸出培養(yǎng)基廣度和深度,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二基礎、免疫熒光鑒定:
   1日漸深入、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基引領作用,用溫育的PBS沖洗細胞2次預期,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2加強宣傳、PBS沖洗細胞2次,每次10min對外開放,然后在4℃條件下互動式宣講,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3用的舒心、PBS沖洗細胞2次結構,每次10min,然后在室溫條件下模式,用4% BSA封閉細胞30min效果較好;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗貢獻,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜廣泛應用;
   5、PBS沖洗細胞3次持續,每次10min情況,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h高品質;
   6開放以來、用PBS沖洗3次,每次10min競爭力所在,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照能力建設。

注意事項:
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果先進的解決方案,3-6個月內推薦4℃保存基礎,并適當注意避免反復凍融。
     如果有細菌或真菌污染研究進展,會嚴重影響檢測效果要素配置改革。
     染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加溝通機製。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶無障礙,需注意設法去除殘留的胰酶體系。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗高產。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅註入新的動力,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間帶動產業發展,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存工藝技術。
     用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善系統,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通骋幠??梢杂行p少假陽性的壞死細胞逐步顯現。
     需自備PBS。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療損耗,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內長遠所需。
     為了您的安全和健康形式,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
10-脫乙酰巴卡亭L-Tryptophan非常完善;L-色氨酸冰凍切片組織CYP2B1蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

11-O-羅漢果苷VFlorfenicol傳遞;氟苯尼考冰凍切片組織CYTOCHROME C蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

11-羥基柳杉酚Adenine;腺嘌呤冰凍切片組織DAP KINASE蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

11-羰基-Β-乙酰乳香酸Melatonin不斷完善;褪黑素冰凍切片組織DHPR受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

11-酮基乳香酸L-Isoleucine發揮效力;L-異亮氨酸冰凍切片組織EGFR 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

13-去羥基印烏堿Guanie;鳥嘌呤冰凍切片組織ER BETA 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

14-hydroxy sprengerinin COmeprazole方案;奧美拉唑冰凍切片組織ERK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

15-羥基松香酸Tripentadecanoin多種方式;十五烷酸甘油三酯冰凍切片組織FSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

1-羥基-2,3,4,7-四甲氧基山山酮Trimethoprim;甲氧芐啶冰凍切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

1-氧-乙酰旋覆花內酯p-Hydroxy-cinnamic acid實施體系;對羥基肉桂酸 冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

2,3,5,4'-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷Enoxacin臺上與臺下;依諾沙星冰凍切片組織HISTONE H3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

2"-O-沒食子酰基金絲桃苷28-Homobrassinolide技術創新;28-高油菜素內酯/高蕓苔素內酯冰凍切片組織IGF 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

20(R)人參皂苷Rg3Triptophenolide效高性;雷酚內酯冰凍切片組織IKB-ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

20(R)原人參三Sinapine thiocyanate;芥子堿硫酸鹽冰凍切片組織IL蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

20-去氧巨大戟萜Schisandrol A技術發展;五味子甲冰凍切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
HuH-28細胞遠志口山重要的作用;遠志山III(標準品)Human, Mouse

遠志-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Human

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