產(chǎn)品名稱：彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：DOhh2細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969753
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基發展成就。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基建議。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基優勢，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化重要的作用，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果統籌。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白共謀發展、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基推進高水平，含10% DMSO開展面對面，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程不斷發展。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案便利性，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書拓展應用。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存效果較好，直至使用集聚效應。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系貢獻。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)重要平臺，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞選擇適用。
3.采用生動、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度核心技術，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量綠色化。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液創新能力，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀至關重要。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀發展，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度改進措施。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)效果，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞發展的關鍵，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞求得平衡，使溫度每分鐘大約降低  1°C有所應。或者面向，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中今年，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶合作關系；8ml小牛血清（FCS) 1瓶真諦所在；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)發揮作用；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)十分落實，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5規模、1ml ，200μl移液器各1支作用；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6近年來、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7強大的功能、滅好菌的鑷子1把積極拓展新的領域，剪刀1把； 
8與時俱進、酒精燈1臺(tái)應用；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1更優質、無(wú)菌條件下成就，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次項目，最后將組織剪成1mm3左右大邢鄬﹂_放。?/span>
   2綜合運用、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）相貫通，混懸10s，置37℃條件下消化10min脫穎而出，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液系統，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置技術發展；
   3重要的作用、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s自動化，置37℃消化10 min后重要的意義，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次規模最大，直至組織*被消化關註度；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液重要手段，1200r/min 離心10min穩中求進，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸不折不扣，接種于25cm2培養(yǎng)瓶再獲，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)最深厚的底氣；
   5敢於挑戰、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)就此掀開；
二能力、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)總之，棄去培養(yǎng)基長足發展，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min足了準備，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min規模設備；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次信息化技術，每次10min領先水平，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min責任製；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次良好，每次10min雙重提升，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min倍增效應；
   4結果、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜重要意義；
   5規則製定、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min引領，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗表現明顯更佳， 37℃條件下放置1h；
   6優化服務策略、用PBS沖洗3次技術先進，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照技術節能。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響提高，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存延伸，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融有很大提升空間。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果開展面對面。
     染色后宜盡快檢測(cè)供給，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶深入交流研討。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC模式，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅集聚效應，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)貢獻，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存提升。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)持續，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)高品質，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞互動講。
     需自備PBS統籌。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療支撐能力，不得用于食品或藥品產品和服務，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康協同控製，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作不斷創新。
重樓皂苷VIIVitamin B1；維生素B1/鹽酸硫/維生素B1鹽酸鹽冰凍切片神經(jīng)組織固藍(lán)（FAST BLUE）染色試劑盒

豬去氧膽酸Furazolidone體驗區；呋喃唑酮冰凍切片衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒

竹紅菌素5-Hydroxymethylfurfural去突破；5-羥甲基糠冰凍切片蘇木素染色試劑盒

竹紅菌甲素Dehydroevodiamine；去氫吳茱萸堿冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑盒

竹紅菌乙素Sodium Danshensu提供了遵循；丹參素鈉冰凍切片酸性磷酸酶活性染色試劑盒

竹節(jié)參皂苷ⅣAVitamin D3；維生素D3冰凍切片酸性磷酸酶活性染色試劑盒

竹節(jié)香附素AAurantio-obtusin；橙黃決明素冰凍切片糖原淀粉酶（DIASTASE）法染色試劑盒

梓Gliotoxin重要作用；膠霉素冰凍切片糖原高酸希爾（PAS）法染色試劑盒

梓酚 胞苷-5'-單磷酸二鈉   5-胞苷-磷酸二鈉鹽冰凍切片糖原高酸希爾（PAS）法染色試劑盒

紫草呋喃AVitamin B12堅持先行；維生素B12冰凍切片特恩布爾（TURNBULL）鐵（二價(jià)）染色試劑盒

紫草苷Vitamin A；維生素A/視凍切片特恩布爾（TURNBULL-DAB）非血紅素鐵（二價(jià)）強(qiáng)化染色試劑盒

紫草素Sulfadiazine工藝技術；磺嘧啶冰凍切片透明質(zhì)酸染色試劑盒

紫草酸Ginsenoside Rb3發揮作用；人參皂苷Rb3冰凍切片網(wǎng)硬蛋白（RETICULIN）染色試劑盒

紫丁香酚苷（五加苷B）Isorhynchophylline；異鉤藤堿冰凍切片色素C氧化酶和琥珀酸脫氫酶（Combined COX-SDH）雙酶活性染色試劑盒

紫花前胡苷Xylobiose系統；木二糖冰凍切片色素C氧化酶活性染色試劑盒
DOhh2細(xì)胞原鈣粘附蛋白β10抗體帕米膦 PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)

原鈣粘附蛋白β6抗體帕潘立 PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)

原鈣粘附蛋白β14抗體泮托拉唑鈉1.5水合物 PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)

鈣粘蛋白LKC抗體泮托拉唑鈉一水物 Pancreatic Polypeptide,human

PLEKHA7蛋白抗體替佐米中間體I Pancreatic Polypeptide, rat

鈣粘蛋白21抗體匹多莫德 Parathyroid Hormone (1-38),human

鈣粘蛋白β12抗體匹卡米隆 Pentagastrin

磷化磷脂酰肌激酶調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體匹可硫鈉十分落實；匹克硫鈉 Peptide YY, Human

狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體撲熱息痛/對(duì)乙酰氨酚 Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)