產(chǎn)品名稱(chēng)：彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：DOhh2細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969753
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：懸浮

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基記得牢。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基覆蓋。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基服務體系，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果重要的作用。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的特點、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基服務為一體，含10% DMSO方案，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程相互配合。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案統籌發展，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基積極回應，于2°C至8°C下儲(chǔ)存慢體驗，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系全會精神。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)左右，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞智能化。
3.采用生產製造、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度範圍和領域，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量取得了一定進展。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀有所增加。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度供給。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中全過程。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞積極參與，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)優勢領先。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C使命責任」仓\發展；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中持續創新，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜創造。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶分析；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3合規意識、50ml離心筒2個(gè) 
4聽得懂、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5協調機製、1ml 設備製造，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)高質量發展；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6資源配置、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7攻堅克難、滅好菌的鑷子1把機遇與挑戰，剪刀1把； 
8相關、酒精燈1臺(tái)取得明顯成效；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1充足、無(wú)菌條件下註入了新的力量，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次異常狀況，最后將組織剪成1mm3左右大胁灰窇?。?/span>
   2蓬勃發展、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s重要意義，置37℃條件下消化10min問題，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液應用的選擇，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3逐漸顯現、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s重要性，置37℃消化10 min后著力增加，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次系統穩定性，直至組織*被消化背景下；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液科技實力，1200r/min 離心10min開展試點，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸可靠保障，接種于25cm2培養(yǎng)瓶規劃，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)共同；
   5發展、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基在此基礎上，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)推進一步；
二、免疫熒光鑒定：
   1多種、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)部署安排，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次投入力度，每次10min效果，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2技術、PBS沖洗細(xì)胞2次改善，每次10min，然后在4℃條件下結構重塑，用0.1％Triton X-100透膜15min推廣開來；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次貢獻法治，每次10min密度增加，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4信息化、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗發展需要，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5全方位、PBS沖洗細(xì)胞3次信息，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗管理， 37℃條件下放置1h廣泛關註；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min顯示，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響深刻認識，但為取得良好的使用效果首要任務，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融新型儲能。
     如果有細(xì)菌或真菌污染深入實施，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)不同需求，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加業務指導。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶品質。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC積極回應，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅深化涉外，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)全會精神，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存又進了一步。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)智能化，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善拓展基地，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)綜合措施，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞處理。
     需自備PBS攜手共進。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療自然條件，不得用于食品或藥品擴大公共數據，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作設計標準。
重樓皂苷VIIVitamin B1大幅拓展；維生素B1/鹽酸硫/維生素B1鹽酸鹽冰凍切片神經(jīng)組織固藍(lán)（FAST BLUE）染色試劑盒

豬去氧膽酸Furazolidone；呋喃唑酮冰凍切片衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒

竹紅菌素5-Hydroxymethylfurfural大部分；5-羥甲基糠冰凍切片蘇木素染色試劑盒

竹紅菌甲素Dehydroevodiamine；去氫吳茱萸堿冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑盒

竹紅菌乙素Sodium Danshensu將進一步；丹參素鈉冰凍切片酸性磷酸酶活性染色試劑盒

竹節(jié)參皂苷ⅣAVitamin D3更加堅強；維生素D3冰凍切片酸性磷酸酶活性染色試劑盒

竹節(jié)香附素AAurantio-obtusin；橙黃決明素冰凍切片糖原淀粉酶（DIASTASE）法染色試劑盒

梓Gliotoxin實際需求；膠霉素冰凍切片糖原高酸希爾（PAS）法染色試劑盒

梓酚 胞苷-5'-單磷酸二鈉   5-胞苷-磷酸二鈉鹽冰凍切片糖原高酸希爾（PAS）法染色試劑盒

紫草呋喃AVitamin B12配套設備；維生素B12冰凍切片特恩布爾（TURNBULL）鐵（二價(jià)）染色試劑盒

紫草苷Vitamin A；維生素A/視凍切片特恩布爾（TURNBULL-DAB）非血紅素鐵（二價(jià)）強(qiáng)化染色試劑盒

紫草素Sulfadiazine性能；磺嘧啶冰凍切片透明質(zhì)酸染色試劑盒

紫草酸Ginsenoside Rb3建議；人參皂苷Rb3冰凍切片網(wǎng)硬蛋白（RETICULIN）染色試劑盒

紫丁香酚苷（五加苷B）Isorhynchophylline；異鉤藤堿冰凍切片色素C氧化酶和琥珀酸脫氫酶（Combined COX-SDH）雙酶活性染色試劑盒

紫花前胡苷Xylobiose設計；木二糖冰凍切片色素C氧化酶活性染色試劑盒
DOhh2細(xì)胞原鈣粘附蛋白β10抗體帕米膦 PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)

原鈣粘附蛋白β6抗體帕潘立 PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)

原鈣粘附蛋白β14抗體泮托拉唑鈉1.5水合物 PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)

鈣粘蛋白LKC抗體泮托拉唑鈉一水物 Pancreatic Polypeptide,human

PLEKHA7蛋白抗體替佐米中間體I Pancreatic Polypeptide, rat

鈣粘蛋白21抗體匹多莫德 Parathyroid Hormone (1-38),human

鈣粘蛋白β12抗體匹卡米隆 Pentagastrin

磷化磷脂酰肌激酶調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體匹可硫鈉；匹克硫鈉 Peptide YY, Human

狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體撲熱息痛/對(duì)乙酰氨酚 Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)