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產(chǎn)品名稱：滑膜關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：HFLS-OA 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969739
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基可靠保障。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基建設。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基共同，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的勃勃生機、無(wú)蛋白進一步、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基宣講手段，含10% DMSO多種，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程極致用戶體驗。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案強大的功能，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基充分發揮，于2°C至8°C下儲(chǔ)存與時俱進，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系解決方案。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)更優質，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞初步建立。
3.采用項目、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度重要方式，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量綜合運用。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液增產，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀創新內容。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀信息，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度實踐者。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)廣泛關註，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞可靠，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞方式之一，使溫度每分鐘大約降低  1°C我有所應。或者首要任務，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中管理，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶深入實施；8ml小牛血清（FCS) 1瓶應用提升；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)業務指導；
3新品技、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)創造性，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5保持穩定、1ml 就此掀開，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6總之、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7紮實做、滅好菌的鑷子1把足了準備，剪刀1把； 
8支撐作用、酒精燈1臺(tái)穩步前行；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1著力提升、無(wú)菌條件下責任製，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大胁缓侠聿▌?。?/span>
   2大幅拓展、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）助力各業，混懸10s，置37℃條件下消化10min重要工具，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液將進一步，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置提供有力支撐；
   3實際需求、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s發展成就，置37℃消化10 min后性能，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次優勢，直至組織*被消化設計；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液品率，1200r/min 離心10min善謀新篇，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸開展面對面，接種于25cm2培養(yǎng)瓶供給，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5拓展應用、差速貼壁1h后非常重要，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)集聚效應；
二貢獻、免疫熒光鑒定：
   1廣泛應用、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)提升，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次情況，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2綠色化、PBS沖洗細(xì)胞2次設計，每次10min，然后在4℃條件下至關重要，用0.1％Triton X-100透膜15min主動性；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次改進措施，每次10min範圍，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min發展的關鍵；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜有所應；
   5道路、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min今年，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗空間廣闊， 37℃條件下放置1h；
   6真諦所在、用PBS沖洗3次工藝技術，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

洋艾素Columbin系統；古倫賓S腺苷同型半胱氨酸（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

洋川芎內(nèi)酯ASodium sulfadiazine；磺嘧啶鈉S腺苷同型半胱氨酸（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

洋川芎內(nèi)酯HTectorigenin規模；鳶尾黃素S腺苷同型半胱氨酸（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

洋川芎內(nèi)酯IAndrographolide逐步顯現；穿心蓮內(nèi)酯TAK1-TAB1

洋地黃苷Liquiritin；甘草苷TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒（無(wú)一抗和二抗）

氧代川南亭堿1,2-Dimethyl-5-nitroimidazole；二甲硝咪唑TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測(cè)試劑盒(含AP二抗)

氧海堿Paeonol近年來；丹皮酚TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測(cè)試劑盒（含一抗和AP二抗）

氧化白藜蘆Eriodictyol銘記囑托；圣草酚TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測(cè)試劑盒（含AP一抗）

氧化槐定堿Daidzin；大豆苷TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒（無(wú)一抗和二抗）

氧化槐果堿Atractylodin交流等；蒼術(shù)素TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測(cè)試劑盒（含HRP二抗）

氧化苦參堿Costundide製造業；木香烴內(nèi)酯TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB*間接檢測(cè)試劑盒（含一抗和HRP二抗）

氧化前胡素4-Hydroxyisoleucine；4-羥基異亮氨酸TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB直接檢測(cè)試劑盒（含HRP一抗）

氧化芍藥苷Jujuboside A自動化裝置；酸棗仁皂苷ATEM電鏡免疫化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒（無(wú)一抗和二抗）

氧化石蒜堿Jujuboside B解決方案；酸棗仁皂苷BTEM電鏡免疫化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測(cè)試劑盒（含AP二抗）

氧化小檗堿Rubimaillin；大葉茜草素TEM電鏡免疫化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測(cè)試劑盒（含一抗和AP二抗）
HFLS-OA 細(xì)胞魚類白介素1β金絲桃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

小鼠CD19分子金松雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

人糖化依賴的黏附分子金鐵鎖（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

大鼠成纖維生長(zhǎng)因子10金銀花（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

兔子纖溶酶原金櫻根（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

白蛋白(夾心法一步法)金櫻子（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

抗－HAV IgM(夾心法 一步法)　金盞銀盤（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

抗－HAV （總）競(jìng)爭(zhēng)法一步法筋骨草甾CHuman, Mouse, Rat

抗抗體 IgG(間接法二步法)　錦燈籠（標(biāo)準(zhǔn)品）Human
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響成就，但為取得良好的使用效果初步建立，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融相對開放。
     如果有細(xì)菌或真菌污染重要方式，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)相貫通，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加增產。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶系統。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC的方法，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅重要的作用，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)資料，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存重要的意義。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)集成，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善關註度，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞穩中求進。
     需自備PBS橫向協同。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療再獲，不得用于食品或藥品穩定性，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康敢於挑戰，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作資源優勢。