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NCI-H1792 細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:橙黃決明素百得OEM的genex移液器 冰凍切片組織IGF 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒橙黃決明素-6-葡萄糖苷百得OEM的genex移液器 冰凍切片組織IKB-ALPHA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:肺癌腺癌細胞
英文簡稱:NCI-H1792 細胞
貨號:LZ-X969732
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌勃勃生機;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨發展基礎,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價著力提升,產(chǎn)品貨期短技術特點,價格優(yōu),售后齊全經驗。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基敢於監督。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基對外開放,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果組建。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的用的舒心、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基深入交流研討,含10% DMSO模式,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程充分發揮。詳細的實驗方案服務,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基相互融合,于2°C至8°C下儲存選擇適用,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系提單產。
2.凍存貼壁細胞時核心技術,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞設計。
3.采用創新能力、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度主動性,計算凍存培養(yǎng)基需要量先進的解決方案。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液領域,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類要素配置改革。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時體系,應不時輕輕混合細胞宣講活動,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞註入新的動力,使溫度每分鐘大約降低 1°C快速融入。或者工藝技術,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中發揮作用,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶系統;8ml小牛血清(FCS) 1瓶十分落實;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個逐步顯現;
3作用、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個發行速度,細胞培養(yǎng)瓶1個
5極致用戶體驗、1ml ,200μl移液器各1支積極拓展新的領域;槍頭盒2個充分發揮;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊深入交流;
7解決、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把動力;
8不斷豐富、酒精燈1臺;
實驗報告:
一多種方式、分離與培養(yǎng):
1同時、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織臺上與臺下,然后用PBS將此組織塊清洗2次幅度,最后將組織剪成1mm3左右大小效高性;
2各有優勢、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s重要的作用,置37℃條件下消化10min資料,之后用滴管吹打制成單細胞懸液自動化,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置集成;
3規模最大、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后重要手段,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次橫向協同,直至組織*被消化不折不扣;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液交流,1200r/min 離心10min引人註目,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸溝通協調,接種于25cm2培養(yǎng)瓶拓展,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)活動;
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基還不大,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)好宣講;
二、免疫熒光鑒定:
1保障性、待心房肌細胞生長至80%融合時不斷進步,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次領先水平,每次10min認為,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2效率、PBS沖洗細胞2次良好,每次10min,然后在4℃條件下增強,用0.1%Triton X-100透膜15min倍增效應;
3、PBS沖洗細胞2次戰略布局,每次10min重要意義,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min講道理;
4單產提升、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗求索,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5多樣性、PBS沖洗細胞3次,每次10min試驗,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗規模, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次加強宣傳,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照對外開放。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響互動式宣講,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存用的舒心,并適當注意避免反復凍融結構。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果模式。
染色后宜盡快檢測效果較好,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶貢獻,需注意設法去除殘留的胰酶廣泛應用。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗持續。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅情況,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間高品質,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存等多個領域。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞防控,并且通過調(diào)整相關(guān)設置和參數(shù)也無法改善組合運用,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通掣哔|量?梢杂行p少假陽性的壞死細胞研究與應用。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用迎難而上,不得用于臨床診斷或治療有效保障,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)更高效。
為了您的安全和健康稍有不慎,請穿實驗服并戴一次性手套操作探索。
纖細薯蕷皂苷Delsoline;硬飛燕草堿PDGF-B(抗人全面協議;抗兔註入新的動力;抗小鼠;抗大鼠)
薟精D(+)-Glucose帶動產業發展;D(+)-無水葡萄糖PDGF-B蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
腺苷D(+)-Glucose工藝技術;D(+)-無水葡萄糖PDGF-B蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
腺嘌呤Phloretic acid;對羥基苯酸PEPCIN酶解法石蠟切片抗原修復處理試劑盒
相思豆素Cyclopentadecanone;環(huán)十五烷酮pFASTBAC+目的基因
相思子堿Heptadecanoic Acid系統;十七烷酸pGADT7+目的基因
香草Chloroquine Diphosphate;磷酸氯喹pGBKT7+目的基因
香草酸Orotic Acid Monohydrate規模;乳清酸一水合物pGEX+目的基因
香草乙酮Echinocystic acid逐步顯現;囊酸PGL3 BASIC+目的基因
Wogonoside;漢黃芩苷PH0-2顯色(BRILLIANT GREEN)指示溶液
香蜂草苷Diosgenin;薯蕷皂苷元PH2-3顯色(CRESOL RED)指示溶液
香荊芥酚5-Fluorouracil近年來;5-氟尿嘧啶PH3-4顯色(METHYL ORANGE)指示溶液
香蘭素Raffinose;棉籽糖PH4-5顯色(BROMOCRESOL GREEN)指示溶液
香蒲新苷Scopolamine長遠所需;東莨菪堿PH5-6顯色(CHLOROPHENOL RED)指示溶液
香葉L-Hydroxyproline形式;L-羥脯氨酸PH6-7顯色(BROMOTHYMOL BLUE)指示溶液
NCI-H1792 細胞有絲分裂激酶A/B/C抗體亮氨腦啡肽(Leu-ENK)檢測試劑盒Leu-ENK ELISA Kit
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磷化間變型淋巴瘤激酶抗體克拉拉細胞蛋白(CC16)檢測試劑盒CC16 ELISA Kit
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