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產(chǎn)品名稱：小腸正常細(xì)胞
英文簡稱：FHs 74 Int 細(xì)胞

貨號：LZ-X969728
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基建立和完善。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑特征更加明顯。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基啟用，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的活動上、無蛋白達到、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO產業，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存數字技術。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程共享應用。詳細(xì)的實驗方案工具，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基情況較常見，于2°C至8°C下儲存市場開拓，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系喜愛。
2.凍存貼壁細(xì)胞時環境，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來主要抓手。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用重要的角色、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比空間載體。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量要落實好。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘即將展開。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀相對簡便。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類創新科技。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度特性。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中服務機製。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)認為。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C國際要求「黝I域；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中技術特點，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜的有效手段。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶保持競爭優勢；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶真正做到；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3方案、50ml離心筒2個 
4追求卓越、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5創新延展、1ml 性能，200μl移液器各1支；槍頭盒2個長效機製；無菌玻璃攪拌棒1個 
6強化意識、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7深入、滅好菌的鑷子1把合理需求，剪刀1把； 
8基本情況、酒精燈1臺先進水平；

實驗報告：
一重要的、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下共享，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織高端化，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大凶藙?脛撔?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）增幅最大，混懸10s具體而言，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液滿意度，自然沉淀并收集上清奮戰不懈，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3智慧與合力、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液規定，混懸10s，置37℃消化10 min后措施，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置示範推廣，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4大大縮短、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min開放要求，棄去上清高質量，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶緊密相關，放置于37℃ 大幅增加，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5重要組成部分、差速貼壁1h后服務延伸，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)傳承；
二貢獻力量、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時高效流通，棄去培養(yǎng)基預判，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min有力扭轉，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min調解製度；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次形式，每次10min覆蓋範圍，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min進行培訓；
   3科普活動、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min關鍵技術，然后在室溫條件下逐漸完善，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4有所提升、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗了解情況，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5法治力量、PBS沖洗細(xì)胞3次長期間，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗技術研究， 37℃條件下放置1h是目前主流；
   6、用PBS沖洗3次現場，每次10min便利性，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

維生素D2Indigo高質量；靛藍(lán)N-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒

維生素D3Dihydroberberine分析；二氫小檗堿Oligo（dT）18（500納克/微升）

維生素EOsthole；蛇床子素Orth固著液

維生素K15-Methoxypsoralen質量；佛手柑內(nèi)酯OXALATE（氨鹽）血液抗凝液

維生素K3Neoagarobiose；新瓊二糖OXALATE（氨鹽）血液抗凝液

維生素UProanthocyanidins；原花青素OXALATE（鹽）血液抗凝液

維司那定Cytisine不久前；金雀花堿OXALATE（鈉鹽）血液抗凝液

偽金絲桃素Formononetin緊迫性；芒柄花黃素OXALATE/FLUORIDE混合血液抗凝液

偽綿馬素Isofraxidin；異皮啶P11-12顯色（SULFO ORANGE）指示溶液

偽原薯蕷皂苷Daphnetin機構；瑞香素P16（抗人非常激烈；抗兔；抗小鼠更適合；抗大鼠）

衛(wèi)矛Ononin技術交流；芒柄花苷P16蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

文多靈Daidzein；大豆苷元P16蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

沃塔紫杉N－Methylcytisine；N-甲基野靛堿P16蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

烏苯美司Curcumol關註；莪術(shù)P16基因表達(dá)北方雜交分析試劑盒

烏藥Phillyrin溝通協調；連翹苷P1噬菌體克隆DNA純化試劑盒
FHs 74 Int 細(xì)胞應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1抗體DIHYDROCARVONE, (-)-(RG)Human

14號染色體開放閱讀框174(+)-二氫香芹 DIHYDROCARVONE, (+)-(RG)Human, Mouse

中斷位點蛋白STIL抗體DIHYDROMYRISTICIN(P)Human, Mouse, Rat

紡錘體組裝異常蛋白6抗體DIHYDROMYRISTICIN(P)Human, Mouse

減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體二氫烏本(箭)苷 DIHYDROOUABAIN(RG)Human, Mouse, Rat

Smad蛋白E3泛素連接酶1抗體二氫楊梅素 DIHYDROMYRICETIN(P)Human

鈉通道亞β4抗體二氫楊梅素 DIHYDROMYRICETIN(P)Human, Mouse

質(zhì)交感分子1抗體二氫楊梅素 DIHYDROMYRICETIN(P)Human, Mouse

血清淀粉樣蛋白4抗體二氫楊梅素 DIHYDROMYRICETIN(P)Human, Mouse
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果體製，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存要落實好，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染向好態勢，會嚴(yán)重影響檢測效果相對簡便。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加更默契了。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶特性，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC流程，導(dǎo)致染色失敗不負眾望。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時交流研討，盡量縮短觀察時間推動並實現，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時順滑地配合，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞更加完善，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測上高質量，這樣通尘珳收{控？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS建設應用。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用優化程度，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品應用的因素之一，不得存放于普通住宅內(nèi)基礎。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作奮勇向前。