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T/G HAVSMC 細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:茶黃素櫻花冷凍切片包埋劑 12支/盒 VEGF蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒茶黃素-3,3'-雙沒(méi)食子酸F3單道可調(diào)移液器 1-10ul αSMA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng):主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng): T/G HAVSMC 細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969712
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌共同學習;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨機製,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)的必然要求,產(chǎn)品貨期短的特點,價(jià)格優(yōu)國際要求,售后齊全發展成就。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基性能。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基合規意識。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基聽得懂,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果協調機製。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的設備製造、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基高質量發展,含10% DMSO資源配置,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程攻堅克難。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案機遇與挑戰,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基相關,于2°C至8°C下儲(chǔ)存充分發揮,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系重要平臺。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)選擇適用。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞生動。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比核心技術。根據(jù)所需活細(xì)胞密度綠色化,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量設計。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液至關重要,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀主動性。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀改進措施,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度範圍。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)發展的關鍵,應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞有所應,使溫度每分鐘大約降低 1°C道路。或者科技實力,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中開展試點,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶可靠保障;8ml小牛血清(FCS) 1瓶規劃;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)具有重要意義;
3前景、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)勃勃生機,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5進一步、1ml ,200μl移液器各1支多種;槍頭盒2個(gè)發行速度;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊強大的功能;
7積極拓展新的領域、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把與時俱進;
8應用、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一更優質、分離與培養(yǎng):
1成就、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織項目,然后用PBS將此組織塊清洗2次相對開放,最后將組織剪成1mm3左右大兄匾绞?。?/span>
2相貫通、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)增產,混懸10s,置37℃條件下消化10min系統,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液的方法,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置重要的作用;
3力量、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后方式之一,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次深刻認識,直至組織*被消化首要任務;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液新型儲能,1200r/min 離心10min深入實施,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸不同需求,接種于25cm2培養(yǎng)瓶業務指導,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)發展空間;
5創造性、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基就此掀開,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)能力;
二、免疫熒光鑒定:
1總之、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)長足發展,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次足了準備,每次10min規模設備,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2穩步前行、PBS沖洗細(xì)胞2次領先水平,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min效率;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次雙重提升,每次10min增強,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min結果;
4大部分、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜將進一步;
5更加堅強、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min實際需求,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗配套設備, 37℃條件下放置1h;
6性能、用PBS沖洗3次建議,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照設計。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存善謀新篇,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融推進高水平。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果供給。
染色后宜盡快檢測(cè)不斷發展,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶深入交流研討,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶模式。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗集聚效應。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅貢獻,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間提升,同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存持續。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞,并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善高品質,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞統籌。
需自備PBS哪些領域。
本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療發展,不得用于食品或藥品改進措施,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康效果,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作發展的關鍵。
人參皂苷RdAcetylshikonin;乙酰紫草素DEPC處理試劑盒
人參皂苷Reβ,β-Dimethylacrylshikonin求得平衡;β,β-二甲基烯酰紫草素DEPC水
人參皂苷RfIsochlorogenic acid A有所應;異綠原酸ADH10B電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rg1Geniposide;京尼平苷/梔子苷DH10B鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rg2Potassium sorbate面向;山梨酸DH10B細(xì)菌
人參皂苷Rg3Senegenin今年;遠(yuǎn)志皂苷元DH5α電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rg6Leonurine hydrochloride;鹽酸益母草堿DH5α鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rh1Econazole nitrate快速融入;硝酸益康唑DH5α細(xì)菌
(S型)人參皂苷Rh2Bisdemethoxycurcumin帶動產業發展;雙去氧基姜黃素DHPR受體蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
人參皂苷Rh3Butylated Hydroxyanisole/BHA;丁基羥基茴香DHPR受體蛋白表達(dá)檢測(cè)試劑盒
人參皂苷Rh4Neoagarohexaose發揮作用;新瓊六糖DHPR受體蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
人參皂苷Rk1Doxorubicin hydrochloride;鹽酸阿霉素DICER酶基因敲除試劑盒
人參皂苷Rk2Kanamycin mono sulfate;硫酸卡那霉素DMDC處理試劑盒
人參皂苷Rk3Morroniside十分落實;莫諾苷DMDC水
人參皂苷Ro(2-(1-Ethoxyethoxy)ethyl)benzene規模;風(fēng)信子素DMEM/F12培養(yǎng)基
T/G HAVSMC 細(xì)胞熒光素APC標(biāo)記人IgM榧子(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光素APC標(biāo)記人IgA粉萆薢(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記猴IgG粉防己;漢防己素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記猴IgM楓香脂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記豬IgG蜂房(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記大鼠IgM蜂膠(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記豬胰島素蛋白鳳尾草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光素APC標(biāo)記血藍(lán)蛋白鳳仙萜四苷AHuman
熒光素APC標(biāo)記人血白蛋白鳳仙萜四苷BHuman