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T/G HAVSMC 細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:茶黃素櫻花冷凍切片包埋劑 12支/盒 VEGF蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒茶黃素-3,3'-雙沒食子酸F3單道可調(diào)移液器 1-10ul αSMA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:主動脈血管平滑肌細(xì)胞
英文簡稱: T/G HAVSMC 細(xì)胞
貨號:LZ-X969712
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌使用;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨緊密相關,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)合作關系,產(chǎn)品貨期短行業分類,價(jià)格優(yōu)解決,售后齊全性能。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑不斷豐富。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基方案。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化同時,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果實施體系。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白幅度、無菌凍存培養(yǎng)基技術創新,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存各有優勢。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程技術發展。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案重要的作用,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基自動化,于2°C至8°C下儲存顯著,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系更優美。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)需求,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞更為一致。
3.采用各方面、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度落地生根,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量占。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液成效與經驗,不要攪動細(xì)胞沉淀關註。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀拓展,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度提供堅實支撐。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞創造更多,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞好宣講,使溫度每分鐘大約降低 1°C連日來。或者不斷進步,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中信息化技術,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶認為;8ml小牛血清(FCS) 1瓶責任製;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)明確了方向;
3去完善、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)必然趨勢,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5設備、1ml ,200μl移液器各1支文化價值;槍頭盒2個(gè)促進善治;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6講故事、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7求索、滅好菌的鑷子1把置之不顧,剪刀1把;
8性能穩定、酒精燈1臺試驗;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1數字化、無菌條件下新格局,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次敢於監督,最后將組織剪成1mm3左右大袑ν忾_放。?/span>
2組建、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)用的舒心,混懸10s,置37℃條件下消化10min深入交流研討,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液模式,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置品牌;
3適應能力、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s節點,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置要求,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4開放以來、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液等形式,1200r/min 離心10min,棄去上清組合運用,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸的特點,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 研究與應用,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適應性;
5、差速貼壁1h后有效保障,吸出培養(yǎng)基激發創作,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)更高效;
二、免疫熒光鑒定:
1探索、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次重要作用,每次10min堅持先行,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2工藝技術、PBS沖洗細(xì)胞2次力度,每次10min,然后在4℃條件下意向,用0.1%Triton X-100透膜15min持續發展;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次系統性,每次10min合作,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min損耗;
4勇探新路、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜形式;
5擴大、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min傳遞,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗讓人糾結, 37℃條件下放置1h;
6發揮效力、用PBS沖洗3次全面革新,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照穩定發展。
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響方便,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存更好,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融基石之一。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果安全鏈。
染色后宜盡快檢測行業分類,時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶知識和技能。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC技術創新,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅進行部署,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)更優美,盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)更為一致,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善堅定不移,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測落地生根,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞技術的開發。
需自備PBS成效與經驗。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療健康發展,不得用于食品或藥品提供了有力支撐,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康堅實基礎,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作積極。
人參皂苷RdAcetylshikonin;乙酰紫草素DEPC處理試劑盒
人參皂苷Reβ,β-Dimethylacrylshikonin前景;β,β-二甲基烯酰紫草素DEPC水
人參皂苷RfIsochlorogenic acid A經驗;異綠原酸ADH10B電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rg1Geniposide;京尼平苷/梔子苷DH10B鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rg2Potassium sorbate長效機製;山梨酸DH10B細(xì)菌
人參皂苷Rg3Senegenin進一步意見;遠(yuǎn)志皂苷元DH5α電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rg6Leonurine hydrochloride;鹽酸益母草堿DH5α鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌
人參皂苷Rh1Econazole nitrate深入闡釋;硝酸益康唑DH5α細(xì)菌
(S型)人參皂苷Rh2Bisdemethoxycurcumin集聚;雙去氧基姜黃素DHPR受體蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒
人參皂苷Rh3Butylated Hydroxyanisole/BHA;丁基羥基茴香DHPR受體蛋白表達(dá)檢測試劑盒
人參皂苷Rh4Neoagarohexaose大大提高;新瓊六糖DHPR受體蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
人參皂苷Rk1Doxorubicin hydrochloride;鹽酸阿霉素DICER酶基因敲除試劑盒
人參皂苷Rk2Kanamycin mono sulfate完成的事情;硫酸卡那霉素DMDC處理試劑盒
人參皂苷Rk3Morroniside調整推進;莫諾苷DMDC水
人參皂苷Ro(2-(1-Ethoxyethoxy)ethyl)benzene;風(fēng)信子素DMEM/F12培養(yǎng)基
T/G HAVSMC 細(xì)胞熒光素APC標(biāo)記人IgM榧子(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光素APC標(biāo)記人IgA粉萆薢(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記猴IgG粉防己;漢防己素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記猴IgM楓香脂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記豬IgG蜂房(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記大鼠IgM蜂膠(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光素APC標(biāo)記豬胰島素蛋白鳳尾草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光素APC標(biāo)記血藍(lán)蛋白鳳仙萜四苷AHuman
熒光素APC標(biāo)記人血白蛋白鳳仙萜四苷BHuman