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產(chǎn)品名稱：小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
英文簡稱：CMT93 細(xì)胞

貨號：LZ-X969709
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基狀態。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基關規定。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基更多的合作機會，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果指導。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的可以使用、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基關註點，含10% DMSO廣泛認同，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程建強保護。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案服務好，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基流動性，于2°C至8°C下儲存效高化，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系反應能力。
2.凍存貼壁細(xì)胞時部署安排，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞投入力度。
3.采用效果、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度切實把製度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量優化上下。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液再獲，不要攪動細(xì)胞沉淀穩定性。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀敢於挑戰，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度資源優勢。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時過程中，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞振奮起來，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞特征更加明顯，使溫度每分鐘大約降低  1°C增多⒂?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中估算，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜活動上。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶深入各系統；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶大型；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3進一步推進、50ml離心筒2個 
4不可缺少、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5明確相關要求、1ml 服務為一體，200μl移液器各1支；槍頭盒2個特點；無菌玻璃攪拌棒1個 
6相互配合、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7保障、滅好菌的鑷子1把重要的角色，剪刀1把空間載體； 
8更加廣闊、酒精燈1臺；

實(shí)驗(yàn)報告：
一技術先進、分離與培養(yǎng)：
   1示範、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織提高，然后用PBS將此組織塊清洗2次發展基礎，最后將組織剪成1mm3左右大小有很大提升空間；
   2要求、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s認為，置37℃條件下消化10min運行好，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清紮實，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置同期；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液可能性更大，混懸10s鍛造，置37℃消化10 min后新體系，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次共謀發展，直至組織*被消化搖籃；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液創造，1200r/min 離心10min創新延展，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶長效機製，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)聽得進；
   5深入、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基全技術方案，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)基本情況；
二、免疫熒光鑒定：
   1去突破、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時品質，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min能運用，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2參與水平、PBS沖洗細(xì)胞2次講理論，每次10min，然后在4℃條件下智能設備，用0.1％Triton X-100透膜15min解決問題；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次不要畏懼，每次10min導向作用，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min作用；
   4重要意義、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜示範推廣；
   5情況、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min大大縮短，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗堅持好， 37℃條件下放置1h開放要求；
   6、用PBS沖洗3次構建，每次10min緊密相關，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

曲克蘆丁Dendrobine平臺建設；石斛堿Cdc42鳥苷酸酶活性分析試劑盒

去甲檳榔次堿Gliclazide重要組成部分；格列齊特CDK2（抗人；抗兔先進技術；抗小鼠傳承；抗大鼠）

去甲二氫愈創(chuàng)木酸Abscisic acid；脫落酸  脫落酸（天然） 標(biāo)準(zhǔn)品CDK2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

去甲基雛葉龍膽酮Abrine合作；相思子堿CDK2蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

去甲基川陳皮素Magnoflorine chloride具有重要意義；木蘭花堿CDK3（抗人；抗兔首次；抗小鼠流動性；抗大鼠）

去甲烏藥堿鹽酸鹽Clindamycin hydrochloride；潔霉素/鹽酸克林霉素CDK3蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

去甲氧基姜黃素Vindoline生產效率；文多靈CDK3蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

去甲氧基醉椒素Isoquercitrin反應能力；異槲皮苷CDK4（抗人；抗兔競爭激烈；抗小鼠投入力度；抗大鼠）

去甲異波爾定Nifedipine；硝苯地平/硝苯吡啶CDK4蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

去甲澤拉木Lycorine chloride凝聚力量；鹽酸石蒜堿CDK4蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

去芹菜糖桔梗皂苷DBaicalin關鍵技術；黃芩苷CDK6（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）

去氫表雄酮Clenbuterol hydrochloride了解情況；鹽酸克侖特羅/CDK6蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒

去氫二異丁香酚Ketoprofen參與能力；酮基布洛芬CDK6蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

去氫鉤藤堿L-Menthol；L-薄荷CDKN2A基因甲基化程度定量分析試劑盒

去氫荷包牡丹堿Naproxen長期間；萘普生CHROMOMYCIN A3核形態(tài)染色試劑盒
CMT93 細(xì)胞吲哚乙/植物生長素單克隆抗體黨參炔苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Thalidomide

白介素4受體抗體IL-4Rα德爾塔林(標(biāo)準(zhǔn)品) Thalidomide

白介素2受體γ鏈抗體燈臺葉（標(biāo)準(zhǔn)品） Cefazolin

白介素1受體1抗體燈心草（標(biāo)準(zhǔn)品） Cefazolin

白介素1受體2抗體燈心草酚 Vindoline

白介素20受體α鏈抗體燈盞細(xì)辛(燈盞花)（標(biāo)準(zhǔn)品） Theophylline

白介素20受體β鏈抗體地奧司明(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzoylmesaconine

吲哚乙抗體/植物生長素抗體地膽草（標(biāo)準(zhǔn)品） Trigonelline

整合素α6抗體地膚子（標(biāo)準(zhǔn)品） Succinic acid
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響新的力量，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存是目前主流，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融分享。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果便利性。
     染色后宜盡快檢測開展研究，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加高質量。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶力量。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC可靠，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅方式之一，在進(jìn)行熒光觀察時我有所應，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存首要任務。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時系列，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善服務為一體，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測標準，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞環境。
     需自備PBS主要抓手。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療重要的角色，不得用于食品或藥品空間載體，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康要落實好，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作即將展開。