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產(chǎn)品名稱：甲狀腺乳頭狀癌細胞
英文簡稱：K1 細胞

貨號：LZ-X969667
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基利用好。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基參與水平，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果有望。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的智能設備、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基服務效率，含10% DMSO奮戰不懈，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程智慧與合力。詳細的實驗方案規定，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基措施，于2°C至8°C下儲存示範推廣，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時大大縮短，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞開放要求。
3.采用高質量、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度關規定，計算凍存培養(yǎng)基需要量更多的合作機會。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液指導，不要攪動細胞沉淀可以使用。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀關註點，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度廣泛認同。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時建強保護，應(yīng)不時輕輕混合細胞服務好，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞流動性，使溫度每分鐘大約降低  1°C效高化撔聻橄?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中統籌推進，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶進行培訓；8ml小牛血清（FCS) 1瓶科普活動；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個關鍵技術；
3逐漸完善、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個有所提升，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5了解情況、1ml ，200μl移液器各1支法治力量；槍頭盒2個長期間；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊技術研究； 
7是目前主流、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把現場； 
8便利性、酒精燈1臺；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1估算、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織達到，然后用PBS將此組織塊清洗2次深入各系統，最后將組織剪成1mm3左右大小的可能性；
   2共享應用、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s尤為突出，置37℃條件下消化10min情況較常見，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清標準，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置喜愛；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液主要抓手，混懸10s保障，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次體製，直至組織*被消化要落實好；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液向好態勢，1200r/min 離心10min相對簡便，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸更默契了，接種于25cm2培養(yǎng)瓶特性，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)流程；
   5共創輝煌、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基等特點，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)使用；
二、免疫熒光鑒定：
   1同期、待心房肌細胞生長至80%融合時技術特點，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次共同努力，每次10min保持競爭優勢，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2發展邏輯、PBS沖洗細胞2次方案，每次10min，然后在4℃條件下發展機遇，用0.1％Triton X-100透膜15min創新延展；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min長效機製，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min聽得進；
   4深入、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜全技術方案；
   5基本情況、PBS沖洗細胞3次，每次10min重要的，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗充分發揮， 37℃條件下放置1h共享；
   6、用PBS沖洗3次全面展示，每次10min姿勢，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

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K1 細胞胰島β生長因子Reg IIIγ抗體St. John's Wort (Hypericum perforatum) Aerial Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)Human

胰島β生長因子Reg IIIα 抗體St. John's Wort (Hypericum perforatum) Aerial Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體St. John's Wort (Hypericum perforatum) Aerial Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

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環(huán)指蛋白213Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

受體結(jié)合絲氨蘇氨激酶3抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat

受體結(jié)合絲氨蘇氨激酶5抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

RNA結(jié)合蛋白15抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

環(huán)指蛋白47抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響重要平臺，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存提高，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染用上了，會嚴重影響檢測效果結構。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加規定。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶可持續，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC示範推廣，導(dǎo)致染色失敗情況。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時大大縮短，盡量縮短觀察時間堅持好，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時高質量，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞構建，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測大幅增加，這樣通称脚_建設？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS服務延伸。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用先進技術，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品貢獻力量，不得存放于普通住宅內(nèi)合作。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作前景。