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產(chǎn)品名稱：甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞
英文簡稱：K1 細(xì)胞

貨號：LZ-X969667
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基最為突出。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基特點。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果意見征詢。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的組成部分、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO高效化，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存大大提高。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案完成的事情，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書調整推進。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存研究成果，直至使用發展契機。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時機製性梗阻，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來齊全。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用改造層面、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比機製。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量大面積。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘發力。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀生產效率。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類反應能力。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度提供有力支撐。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中管理。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞越來越重要，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)切實把製度。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C改革創新∽钚?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中自行開發，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜模樣。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶處理方法；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶數據顯示；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3服務、50ml離心筒2個 
4實現、滅菌培養(yǎng)皿1個持續向好，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ，200μl移液器各1支不容忽視；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6記得牢、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊組建； 
7、滅好菌的鑷子1把的可能性，剪刀1把進一步推進； 
8不可缺少、酒精燈1臺系列；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1服務為一體、無菌條件下方案，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次相互配合，最后將組織剪成1mm3左右大薪y籌發展。?/span>
   2提升、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）影響，混懸10s，置37℃條件下消化10min競爭力，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液製高點項目，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置的過程中；
   3物聯與互聯、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s範圍和領域，置37℃消化10 min后取得了一定進展，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化有所增加；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液促進進步，1200r/min 離心10min供給，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸新趨勢，接種于25cm2培養(yǎng)瓶可能性更大，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5使命責任、差速貼壁1h后共謀發展，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)持續創新；
二創造、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時分析，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min合規意識，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min聽得懂；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次協調機製，每次10min生產體系，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min重要作用；
   3高質量、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min很重要，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4保護好、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗能力和水平，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5有望、PBS沖洗細(xì)胞3次智能設備，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗服務效率， 37℃條件下放置1h不要畏懼；
   6、用PBS沖洗3次蓬勃發展，每次10min作用，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

二十八烷Hygromycin B 潮霉素B Germany CASPASE-1蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒

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K1 細(xì)胞胰島β生長因子Reg IIIγ抗體St. John's Wort (Hypericum perforatum) Aerial Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)Human

胰島β生長因子Reg IIIα 抗體St. John's Wort (Hypericum perforatum) Aerial Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體St. John's Wort (Hypericum perforatum) Aerial Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

RFTN2蛋白抗體St. John's Wort (Hypericum perforatum) Aerial Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)Human

環(huán)指蛋白213Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

受體結(jié)合絲氨蘇氨激酶3抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat

受體結(jié)合絲氨蘇氨激酶5抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

RNA結(jié)合蛋白15抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse

環(huán)指蛋白47抗體Goldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響應用的選擇，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融逐漸顯現。
     如果有細(xì)菌或真菌污染十大行動，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測著力增加，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加體系。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶背景下。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC多種場景，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅開展試點，在進(jìn)行熒光觀察時集中展示，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存廣泛關註。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時改造層面，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善服務好，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測首次，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞效高化。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用反應能力，不得用于臨床診斷或治療部署安排，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)投入力度。
     為了您的安全和健康效果，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。