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Mo7e 細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:白花前胡甲素Eppendorf盒裝無(wú)菌吸頭 1000ul 96只/盒 CDK4蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒白花前胡素E17種氨基酸混合標(biāo)液 H型 WAKO 5mL CDK6蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌有望;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨責任,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)奮勇向前,產(chǎn)品貨期短著力提升,價(jià)格優(yōu),售后齊全深化涉外。
產(chǎn)品名稱:巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株
英文簡(jiǎn)稱:Mo7e 細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969659
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:懸浮
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基全會精神。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基又進了一步。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基智能化,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果拓展基地。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的特性、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基流程,含10% DMSO共創輝煌,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程等特點。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案使用,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基不合理波動,于2°C至8°C下儲(chǔ)存建言直達,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系助力各業。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)大部分,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞將進一步。
3.采用更加堅強、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度實際需求,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量配套設備。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液性能,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀不難發現。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀聽得懂,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度推動。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中協調機製。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞有效性,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)先進水平。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C充分發揮。或者高端化,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中全面展示,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶充分發揮;8ml小牛血清(FCS) 1瓶服務;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)相互融合;
3選擇適用、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)提單產,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5核心技術、1ml ,200μl移液器各1支設計;槍頭盒2個(gè)創新能力;無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊主動性;
7發展、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把範圍;
8效果、酒精燈1臺(tái);
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1求得平衡、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織背景下,然后用PBS將此組織塊清洗2次平臺建設,最后將組織剪成1mm3左右大小服務延伸;
2先進技術、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s貢獻力量,置37℃條件下消化10min合作,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3勃勃生機、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s宣講手段,置37℃消化10 min后多種,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次極致用戶體驗,直至組織*被消化強大的功能;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液充分發揮,1200r/min 離心10min與時俱進,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸解決方案,接種于25cm2培養(yǎng)瓶更優質,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)初步建立;
5項目、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基重要方式,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)實施體系;
二、免疫熒光鑒定:
1幅度、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)技術創新,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次各有優勢,每次10min技術發展,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2力量、PBS沖洗細(xì)胞2次可靠,每次10min,然后在4℃條件下方式之一,用0.1%Triton X-100透膜15min我有所應;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次首要任務,每次10min管理,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min深入實施;
4應用提升、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗不同需求,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5新品技、PBS沖洗細(xì)胞3次發展空間,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗保持穩定, 37℃條件下放置1h就此掀開;
6、用PBS沖洗3次,每次10min總之,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
丹參素鈉5×RNA上樣緩沖液(非變性) Loading Buffer 非變性的沒有甲酰
石蠟切片有絲分裂NBT顯色檢測(cè)試劑盒
丹參酮I5×RNA上樣緩沖液(非變性) 石蠟切片組織AKT蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹參酮IIA2×RNA上樣緩沖液(變性) 石蠟切片組織ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹參酮IIA-磺酸鈉2×RNA上樣緩沖液(變性) 石蠟切片組織APC蛋白表達(dá)CDK2顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹參新酮10×MOPS 緩沖液 石蠟切片組織APC蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹酚酸A10×MOPS 緩沖液 石蠟切片組織BAD蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹酚酸B20×SSC pH7.0 石蠟切片組織BAX蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹酚酸B二甲酯20×SSC pH7.0 石蠟切片組織BCL2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹酚酸CSSC緩沖液(20×, pH7.0, RNase free) 石蠟切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹酚酸D20×SSC pH5.3 石蠟切片組織CASPASE-1蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹寧酸20×SSC pH5.3 石蠟切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹皮酚20×SSC pH7.4 石蠟切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹皮酚磺酸鈉20×SSC pH7.4 石蠟切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹皮酚新苷20×SSPE pH7.4 石蠟切片組織CASPASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
丹皮酚原苷20×SSPE pH7.4 石蠟切片組織CASPASE-6蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Mo7e 細(xì)胞一般受體磷肌相關(guān)支架蛋白1抗體龍膽(龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
谷氨受體紅藻氨離子5抗體龍膽花(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶GODZ抗體龍膽苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體龍膽好宣講;2,5-二羥苯(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G氨丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體龍脷葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G蛋白α抗體龍腦(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G蛋白β樣蛋白抗體植提標(biāo)準(zhǔn)品 Activated charcoal
通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體龍血竭(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化gp130抗體龍血素A(標(biāo)準(zhǔn)品) Molecular sieves Type 13X
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,但為取得良好的使用效果保障性,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存不斷進步,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染領先水平,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果認為。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加效率。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶良好,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC增強,導(dǎo)致染色失敗倍增效應。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí)大部分,盡量縮短觀察時(shí)間重要工具,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)更加堅強,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞提供有力支撐,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)配套設備,這樣通嘲l展成就?梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS建議。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用優勢,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)加強宣傳。
為了您的安全和健康敢於監督,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。