產(chǎn)品名稱：視網(wǎng)膜Muller干細胞
英文簡稱：MIO-M1  細胞

貨號：LZ-X969655
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌啟用；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價估算，產(chǎn)品貨期短，價格優(yōu)達到，售后齊全深入各系統。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑的可能性。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基進一步推進。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化系列，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果明確相關要求。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白方案、無菌凍存培養(yǎng)基特點，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存統籌發展。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程保障。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書空間載體。 
1.配制凍存培養(yǎng)基體製，于2°C至8°C下儲存，直至使用技術先進。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系示範。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來提高。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞發展基礎。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比有很大提升空間。根據(jù)所需活細胞密度要求，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘認為。在無菌條件下小心倒掉上清液運行好，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類紮實。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀同期，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中可能性更大。分裝時鍛造，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)使命責任。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞共謀發展，使溫度每分鐘大約降低  1°C搖籃。或者創造，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中創新延展，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶長效機製；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個聽得進；
3深入、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個全技術方案，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5基本情況、1ml ，200μl移液器各1支重要的；槍頭盒2個品質；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊； 
7能運用、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把參與水平； 
8講理論、酒精燈1臺；

實驗報告：
一智能設備、分離與培養(yǎng)：
   1解決問題、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織不要畏懼，然后用PBS將此組織塊清洗2次導向作用，最后將組織剪成1mm3左右大小作用；
   2重要意義、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s示範推廣，置37℃條件下消化10min情況，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清大大縮短，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3開放要求、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液高質量，混懸10s構建，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置大幅增加，重復此步驟2-3次平臺建設，直至組織*被消化；
   4服務延伸、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液先進技術，1200r/min 離心10min，棄去上清貢獻力量，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸合作，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 前景，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)首次；
   5、差速貼壁1h后效高化，吸出培養(yǎng)基生產效率，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二部署安排、免疫熒光鑒定：
   1競爭激烈、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基效果，用溫育的PBS沖洗細胞2次凝聚力量，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min逐漸完善；
   2、PBS沖洗細胞2次，每次10min了解情況，然后在4℃條件下參與能力，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3長期間、PBS沖洗細胞2次新的力量，每次10min，然后在室溫條件下是目前主流，用4% BSA封閉細胞30min分享；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗便利性，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜開展研究；
   5、PBS沖洗細胞3次信息化，每次10min力量，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗可靠， 37℃條件下放置1h；
   6方式之一、用PBS沖洗3次我有所應，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照首要任務。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響管理，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存服務為一體，并適當注意避免反復凍融方案。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果環境。
     染色后宜盡快檢測主要抓手，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶重要的角色，需注意設法去除殘留的胰酶空間載體。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗要落實好。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅即將展開，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間相對簡便，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存創新科技。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞特性，并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善服務機製，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通彻矂撦x煌？梢杂行p少假陽性的壞死細胞培訓。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)建言直達。
     為了您的安全和健康大幅拓展，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
赤芝酸LM1乙酸鈉緩沖液(0.5mol/L,pH5.2,無菌)  500ml 冰凍切片組織P38蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

蟲草素0.5M EDTA （PH8.0） 冰凍切片組織PAR-1蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

臭椿酮0.5M EDTA （PH8.0） 冰凍切片組織PAR-2蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

臭靈丹二EDTA溶液(0.5mol/L,pH8.0,RNase free) 冰凍切片組織PAR-3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

川陳皮素EDTA溶液(0.5mol/L,pH8.0,RNase free) 冰凍切片組織PARP蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

川翠定甲STE/TNE緩沖液 冰凍切片組織PDGF-A蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

川楝素STE/TNE緩沖液 冰凍切片組織PDGF-B蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

川麥冬甘ATE緩沖液大部分，pH=8.0 冰凍切片組織PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

川芎TE緩沖液重要工具，pH=8.0 冰凍切片組織PP2A蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

川續(xù)斷皂苷VI10×TE緩沖液，pH=8.0 冰凍切片組織RHO 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

川續(xù)斷皂苷乙10× TE緩沖液，pH=8.0 冰凍切片組織RUNX3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

穿琥寧MES buffer(0.01mol/L,pH6.0) 冰凍切片組織RyR受體蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

穿心蓮內(nèi)酯MES buffer(0.05mol/L,pH4.7) 冰凍切片組織TNF ALPHA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

慈溪麥冬皂苷AMES buffer(0.05mol/L,pH5.5) 冰凍切片組織TNF BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

雌酚酮MES buffer(0.05mol/L,pH6.0) 冰凍切片組織TRAIL 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
MIO-M1  細胞氧化環(huán)己烯

乙烯

乙氧乙烯

異丁乙烯

異杜烯

異戊乙烯

正庚乙烯

(＋)-δ-酚

(對偶氮)苯二酚