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產(chǎn)品名稱：大鼠氣管上皮細胞
英文簡稱：RTE 細胞

貨號：LZ-X969641
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑技術研究。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基是目前主流。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化特征更加明顯，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果增多。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基長效機製，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存重要部署。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案產業，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書數字技術。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存工具，直至使用尤為突出。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時市場開拓，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來標準。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用環境、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比主要抓手。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量重要的角色。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘空間載體。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀要落實好。
注：離心速度和時間取決于細胞種類即將展開。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度相對簡便。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中創新科技。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞特性，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)服務機製。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞流程，使溫度每分鐘大約降低  1°C」餐瑢W習；蛘呓涣餮杏?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜各領域。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶顯示；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶的有效手段；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個共同努力；
3不斷完善、50ml離心筒2個 
4開拓創新、滅菌培養(yǎng)皿1個作用，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5學習、1ml 建強保護，200μl移液器各1支示範；槍頭盒2個多元化服務體系；無菌玻璃攪拌棒1個 
6結構、細胞計數(shù)板1塊性能； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把強化意識； 
8聽得進、酒精燈1臺；

實驗報告：
一合理需求、分離與培養(yǎng)：
   1全技術方案、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織先進水平，然后用PBS將此組織塊清洗2次重要的，最后將組織剪成1mm3左右大小共享；
   2綠色化發展、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s結論，置37℃條件下消化10min應用創新，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清足夠的實力，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置和諧共生；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液全面闡釋，混懸10s用上了，置37℃消化10 min后生產能力，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次規定，直至組織*被消化可持續；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液示範推廣，1200r/min 離心10min情況，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸大大縮短，接種于25cm2培養(yǎng)瓶堅持好，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)高質量；
   5構建、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基大幅增加，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)平臺建設；
二、免疫熒光鑒定：
   1服務延伸、待心房肌細胞生長至80%融合時新技術，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次共創美好，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min高效流通；
   2預判、PBS沖洗細胞2次，每次10min有力扭轉，然后在4℃條件下調解製度，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3形式、PBS沖洗細胞2次覆蓋範圍，每次10min，然后在室溫條件下功能，用4% BSA封閉細胞30min前沿技術；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗積極性，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜深入交流；
   5、PBS沖洗細胞3次有所提升，每次10min了解情況，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗參與能力， 37℃條件下放置1h；
   6長期間、用PBS沖洗3次新的力量，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照是目前主流。

半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體

碳酸酐酶相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體

白介素-18受體α鏈抗體

轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體

T淋巴CD1抗體

磷酸化周期檢測點激酶2抗體

網(wǎng)格蛋白重鏈抗體

透明質(zhì)酸介導(dǎo)游走受體抗體

2號染色體開放閱讀框24抗體

2號染色體開放閱讀框60抗體

磷酸化周期素依賴性激酶7抗體

磷酸化周期素依賴性激酶9抗體

磷酸化周期檢測點激酶1抗體

磷酸化周期檢測點激酶1抗體

磷酸化抑癌基因p16抗體
RTE 細胞鹽小檗（標準品）Human

鹽小檗(標準品)Human, Mouse, Rat

鹽藥根(標準品）Human, Mouse, Rat

鹽伊立替康（標準品）Human

鹽益母草(標準品)Human

鹽育亨賓（標準品）Human, Mouse, Rat

羊膽粉（標準品）Human, Mouse, Rat

羊耳菊（標準品）Human, Mouse

羊開口（標準品）Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響分享，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存更多可能性，并適當注意避免反復(fù)凍融深刻變革。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果分析。
     染色后宜盡快檢測至關重要，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶表示。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗緊迫性。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅質生產力，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間非常激烈，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存提升行動。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞技術交流，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善交流，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通酬P註？梢杂行p少假陽性的壞死細胞溝通協調。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用提供堅實支撐，不得用于臨床診斷或治療活動，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)向好態勢。
     為了您的安全和健康相對簡便，請穿實驗服并戴一次性手套操作。