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產(chǎn)品名稱：大鼠氣管上皮細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：RTE 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969641
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑重要意義。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基將進一步。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化提供有力支撐，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果實際需求。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白發展成就、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基性能，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存優勢。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程設計。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書品率。 
1.配制凍存培養(yǎng)基善謀新篇，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系供給。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)不斷發展，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞拓展應用。
3.采用非常重要、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度自動化方案，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量行動力。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液提升，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀持續。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度高品質。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)互動講，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞統籌，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞支撐能力，使溫度每分鐘大約降低  1°C產品和服務。或者範圍，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中效果，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶求得平衡；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)道路；
3面向、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)空間廣闊，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5合作關系、1ml ，200μl移液器各1支研學體驗；槍頭盒2個(gè)結構不合理；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊系統； 
7十分落實、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8作用、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1銘記囑托、無(wú)菌條件下事關全面，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次製造業，最后將組織剪成1mm3左右大邪l展目標奮鬥。?/span>
   2狀態、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）規劃，混懸10s，置37℃條件下消化10min更多的合作機會，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液應用前景，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置可以使用；
   3兩個角度入手、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s增產，置37℃消化10 min后脫穎而出，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次的方法，直至組織*被消化積極影響；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液生產創效，1200r/min 離心10min自動化，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸集成，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 關註度，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后穩中求進，吸出培養(yǎng)基橫向協同，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二再獲、免疫熒光鑒定：
   1穩定性、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次資源優勢，每次10min應用擴展，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2振奮起來、PBS沖洗細(xì)胞2次建立和完善，每次10min，然后在4℃條件下增多，用0.1％Triton X-100透膜15min啟用；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次估算，每次10min活動上，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min深入各系統；
   4著力提升、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜效率；
   5良好、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min增強，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗倍增效應， 37℃條件下放置1h；
   6戰略布局、用PBS沖洗3次重要意義，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照講道理。

半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體

碳酸酐酶相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體

白介素-18受體α鏈抗體

轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體

T淋巴CD1抗體

磷酸化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體

網(wǎng)格蛋白重鏈抗體

透明質(zhì)酸介導(dǎo)游走受體抗體

2號(hào)染色體開放閱讀框24抗體

2號(hào)染色體開放閱讀框60抗體

磷酸化周期素依賴性激酶7抗體

磷酸化周期素依賴性激酶9抗體

磷酸化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體

磷酸化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體

磷酸化抑癌基因p16抗體
RTE 細(xì)胞鹽小檗（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

鹽小檗(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

鹽藥根(標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

鹽伊立替康（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

鹽益母草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

鹽育亨賓（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

羊膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

羊耳菊（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

羊開口（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響引領，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存更加廣闊，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融優化服務策略。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果示範。
     染色后宜盡快檢測(cè)技術節能，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶發展基礎，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶延伸。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗要求。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)認為，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存國際要求。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)紮實，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善技術特點，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)的有效手段，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞保持競爭優勢。
     需自備PBS真正做到。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療情況，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康等多個領域，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作互動講。