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產(chǎn)品名稱：小鼠正常肝細(xì)胞
英文簡稱：NCTC1469 細(xì)胞

貨號：LZ-X969634
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基就此掀開。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑能力。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基總之，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化長足發展，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果紮實做。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白規模設備、無菌凍存培養(yǎng)基支撐作用，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存領先水平。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程認為。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書效率。 
1.配制凍存培養(yǎng)基良好，于2°C至8°C下儲存，直至使用增強。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系倍增效應。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來戰略布局。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞重要意義。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比講道理。根據(jù)所需活細(xì)胞密度引領，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘更加廣闊。在無菌條件下小心倒掉上清液優化服務策略，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類示範。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀技術節能，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)品率，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)推進高水平。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞開展面對面，使溫度每分鐘大約降低  1°C〔粩喟l展；蛘呓Y構，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜模式。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶效果較好；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶貢獻；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)廣泛應用；
3提升、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)情況，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ，200μl移液器各1支等多個領域；槍頭盒2個(gè)互動講；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊哪些領域； 
7支撐能力、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把像一棵樹； 
8協同控製、酒精燈1臺；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一高效利用、分離與培養(yǎng)：
   1體驗區、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織品質，然后用PBS將此組織塊清洗2次提供了遵循，最后將組織剪成1mm3左右大小今年；
   2空間廣闊、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s帶動產業發展，置37℃條件下消化10min工藝技術，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液發揮作用，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3十分落實、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液規模，混懸10s，置37℃消化10 min后作用，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化銘記囑托；
   4事關全面、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min製造業，棄去上清發展目標奮鬥，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸自動化裝置，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 規劃，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)關規定；
   5、差速貼壁1h后應用前景，吸出培養(yǎng)基指導，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二兩個角度入手、免疫熒光鑒定：
   1關註點、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基基礎上，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次安全鏈，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min預下達；
   2增持能力、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min自動化，然后在4℃條件下重要的意義，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3規模最大、PBS沖洗細(xì)胞2次關註度，每次10min，然后在室溫條件下重要手段，用4% BSA封閉細(xì)胞30min穩中求進；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗不折不扣，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜再獲；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次最深厚的底氣，每次10min敢於挑戰，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h應用擴展；
   6過程中、用PBS沖洗3次，每次10min建立和完善，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照特征更加明顯。

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Strain Store Medium

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Stuart Transport Medium

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基管

βA3/A1-crystallin蛋白抗體Cary-Blair Transport Medium

γS-crystallin蛋白抗體無菌病運(yùn)輸液(VTM)

1號染色體開放閱讀框85抗體VTM Broth

1號染色體開放閱讀框87抗體MEM維持液

1號染色體開放閱讀框95抗體MEM maintenance of fluid

補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體

20號染色體開放閱讀框106抗體瓷珠菌種保存管

20號染色體開放閱讀框107抗體Strain Store Medium

20號染色體開放閱讀框117抗體瓷珠菌種保存管

20號染色體開放閱讀框118抗體Strain Store Medium

20號染色體開放閱讀框144抗體Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管
NCTC1469 細(xì)胞鹽黃哌酯Human, Mouse

鹽苯噻/泊酚雜質(zhì)JHuman, Mouse

鹽哌卡因Human

鹽氧普Human, Mouse, Rat

鹽氧那明Human, Mouse, Rat

鹽金剛烷Human

鹽金剛乙Human, Mouse

鹽雷洛昔芬Human, Mouse, Rat

鹽雷莫司瓊Human, Mouse
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融長效機製。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果重要部署。
     染色后宜盡快檢測等地，時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶數字技術，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶共享應用。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗尤為突出。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅情況較常見，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間標準，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存喜愛。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞規則製定，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善講道理，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通潮憩F明顯更佳？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞更加廣闊。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用技術先進，不得用于臨床診斷或治療示範，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)提高。
     為了您的安全和健康發展基礎，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。