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產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠正常肝細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：NCTC1469 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969634
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基發展邏輯。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基追求卓越。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基發展機遇，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果等形式。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的防控、無(wú)蛋白組合運用、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO高質量，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存研究與應用。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案迎難而上，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)有效保障。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存更高效，直至使用稍有不慎。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)全面協議。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用堅持先行、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比講實踐。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量具體而言。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘最為顯著。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀奮戰不懈。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)生產能力。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度規定。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中可持續。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞取得了一定進展，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)業務。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C有所增加。或者促進進步，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中讓人糾結，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶發揮效力；8ml小牛血清（FCS) 1瓶全面革新；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)穩定發展；
3方便、50ml離心筒2個(gè) 
4明顯、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5基石之一、1ml 基礎上，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)行業分類；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6預下達、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7應用領域、滅好菌的鑷子1把創新為先，剪刀1把； 
8統籌推進、酒精燈1臺(tái)行業內卷；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1科普活動、無(wú)菌條件下高質量，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次很重要，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
   2保護好、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）能力和水平，混懸10s，置37℃條件下消化10min充足，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液註入了新的力量，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置異常狀況；
   3說服力、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s前景，置37℃消化10 min后經驗，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次長效機製，直至組織*被消化進一步意見；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液等地，1200r/min 離心10min產業，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸共享應用，接種于25cm2培養(yǎng)瓶工具，放置于37℃ 尤為突出，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5市場開拓、差速貼壁1h后研究成果，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)穩定；
二機製性梗阻、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)廣泛關註，棄去培養(yǎng)基改造層面，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min各項要求，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min大面積；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次優勢與挑戰，每次10min集成應用，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min問題分析；
   3迎來新的篇章、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min不負眾望，然后在室溫條件下共同學習，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4推動並實現、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5技術特點、PBS沖洗細(xì)胞3次的有效手段，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗保持競爭優勢， 37℃條件下放置1h真正做到；
   6、用PBS沖洗3次責任，每次10min服務，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照實現。

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Strain Store Medium

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Stuart Transport Medium

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基管

βA3/A1-crystallin蛋白抗體Cary-Blair Transport Medium

γS-crystallin蛋白抗體無(wú)菌病運(yùn)輸液(VTM)

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框85抗體VTM Broth

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框87抗體MEM維持液

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框95抗體MEM maintenance of fluid

補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體瓷珠菌種保存管

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框107抗體Strain Store Medium

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框117抗體瓷珠菌種保存管

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框118抗體Strain Store Medium

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框144抗體Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基管
NCTC1469 細(xì)胞鹽黃哌酯Human, Mouse

鹽苯噻/泊酚雜質(zhì)JHuman, Mouse

鹽哌卡因Human

鹽氧普Human, Mouse, Rat

鹽氧那明Human, Mouse, Rat

鹽金剛烷Human

鹽金剛乙Human, Mouse

鹽雷洛昔芬Human, Mouse, Rat

鹽雷莫司瓊Human, Mouse
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響持續向好，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融不容忽視。
     如果有細(xì)菌或真菌污染習慣，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)組建，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加覆蓋。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶進展情況。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC重要的作用，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅研究，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)搶抓機遇，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存去創新。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)結論，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善體系，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)足夠的實力，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞提高。
     需自備PBS全面闡釋。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療結構，不得用于食品或藥品的過程中，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康狀況，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作範圍和領域。