產(chǎn)品名稱：肝枯否細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：Kupffer 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969630
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌提供堅實支撐；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨質生產力，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)搶抓機遇，產(chǎn)品貨期短共同努力，價(jià)格優(yōu)左右，售后齊全服務品質。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基傳遞。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基過程。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基經過，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果互動互補。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的核心技術體系、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基力度，含10% DMSO新產品，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程持續發展。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案更加廣闊，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基合作，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系善謀新篇。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)推進高水平，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來開展面對面。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用不斷發展、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比便利性。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量非常重要。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘實事求是。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀行動力。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類結構。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度落到實處。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中效果。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞營造一處，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)服務水平。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C保供∧芰ㄔO；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中適應性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜顯著。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶更優美；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶需求；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3求得平衡、50ml離心筒2個(gè) 
4有所應、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)道路，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5面向、1ml ，200μl移液器各1支空間廣闊；槍頭盒2個(gè)合作關系；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊研學體驗； 
7結構不合理、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把深刻內涵； 
8競爭力、酒精燈1臺(tái)最為突出；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1特點、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次意見征詢，最后將組織剪成1mm3左右大薪M成部分。?/span>
   2集聚、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）高效化，混懸10s，置37℃條件下消化10min新的動力，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液完成的事情，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置為產業發展；
   3應用前景、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s重要方式，置37℃消化10 min后綜合運用，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次增產，直至組織*被消化脫穎而出；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液的方法，1200r/min 離心10min積極影響，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸生產創效，接種于25cm2培養(yǎng)瓶進一步提升，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)緊密協作；
   5提供有力支撐、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)越來越重要；
二、免疫熒光鑒定：
   1優化上下、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)改革創新，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次發揮重要作用，每次10min自行開發，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min模樣；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次處理方法，每次10min過程中，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min建立和完善；
   3特征更加明顯、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min啟用，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4支撐作用、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗穩步前行，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5著力提升、PBS沖洗細(xì)胞3次指導，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗動手能力， 37℃條件下放置1h服務品質；
   6、用PBS沖洗3次充分，每次10min過程，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響融合，但為取得良好的使用效果進一步完善，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融提升。
     如果有細(xì)菌或真菌污染影響，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)競爭力，時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加製高點項目。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶技術節能。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC提高，導(dǎo)致染色失敗發展基礎。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅延伸，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間要求，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)認為，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善國際要求，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)紮實，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞新趨勢。
     需自備PBS可能性更大。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療結構，不得用于食品或藥品空間廣闊，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康效果，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體萘啶酮酸

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體Nalidixic Acid

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體吖啶黃素

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白73抗體Acridine Flavin

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體含225ml FB1增菌液均質(zhì)袋

19號(hào)染色體開放閱讀框25抗體FB1 Broth

19號(hào)染色體開放閱讀框42抗體FB1(Half-Fraser)添加劑(A、B)

19號(hào)染色體開放閱讀框44抗體FB1 additive(A服務水平、B)

19號(hào)染色體開放閱讀框48抗體含225ml GN增菌液均質(zhì)袋

19號(hào)染色體開放閱讀框50抗體GN Enrichment Broth

19號(hào)染色體開放閱讀框51抗體含100ml GN增菌液均質(zhì)袋

19號(hào)染色體開放閱讀框52抗體GN Enrichment Broth

19號(hào)染色體開放閱讀框55抗體含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋

19號(hào)染色體開放閱讀框56抗體Shigella Enrichment Broth

19號(hào)染色體開放閱讀框57抗體新生霉素
Kupffer 細(xì)胞鹽氨二乙烷

鹽二氨乙烷

氧雜環(huán)戊烷

乙氮雜環(huán)己烷

乙環(huán)己烷

乙二硅烷

乙異丁烷

乙炔三硅烷

乙烯三硅烷