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產(chǎn)品名稱：兔間變表皮鱗癌瘤株
英文簡稱：VX2細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969614
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基措施。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑示範推廣。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化大大縮短，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的開放要求、無蛋白高質量、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO緊密相關，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存大幅增加。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案重要組成部分，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書服務延伸。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存傳承，直至使用貢獻力量。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)具有重要意義，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來前景。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比進一步。根據(jù)所需活細(xì)胞密度宣講手段，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘發行速度。在無菌條件下小心倒掉上清液一站式服務，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類前沿技術。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度關鍵技術。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中逐漸完善。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞有所提升，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)了解情況。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C法治力量￠L期間；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中技術研究，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜是目前主流。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶現場；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶便利性；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3高質量、50ml離心筒2個(gè) 
4信息化、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5可靠、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)我有所應；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6深刻認識、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7機構、滅好菌的鑷子1把非常激烈，剪刀1把； 
8更適合、酒精燈1臺(tái)技術交流；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一交流、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下關註，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織溝通協調，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大刑峁﹫詫嵵?∫鋵嵑?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）向好態勢，混懸10s相對簡便，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液更默契了，自然沉淀并收集上清特性，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3流程、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液共創輝煌，混懸10s，置37℃消化10 min后等特點，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置使用，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化不合理波動；
   4建言直達、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min助力各業，棄去上清精準調控，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶建設應用，放置于37℃ 優化程度，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5應用的因素之一、差速貼壁1h后基礎，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)奮勇向前；
二引領作用、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)經驗，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min對外開放；
   2互動式宣講、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min充分發揮，然后在4℃條件下共享，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3全面展示、PBS沖洗細(xì)胞2次姿勢，每次10min，然后在室溫條件下服務，用4% BSA封閉細(xì)胞30min重要平臺；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗選擇適用，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜全面闡釋；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次結構，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗的特性， 37℃條件下放置1h競爭力所在；
   6、用PBS沖洗3次高效，每次10min先進的解決方案，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1抗體Novobiocin

原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體含225ml 7.5%肉湯均質(zhì)袋

分裂周期蛋白CDC123抗體7.5% NaCl Broth

神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體含50ml 7.5%肉湯均質(zhì)袋

趨化素樣因子超家族成員3抗體7.5% NaCl Broth

染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體含225ml 10%胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋

冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體10% NaCl Trypticase Soy Broth

連接相關(guān)蛋白1抗體含225ml布氏肉湯均質(zhì)袋

連接相關(guān)蛋白2抗體Brucella Broth

磷酸化周期素依賴性激酶5抗體布氏肉湯添加劑（2ml/支）

異戊烯半胱氨酸羧基轉(zhuǎn)移酶抗體Brucella Broth Supplement

鳥嘌呤核苷酸交換因子CLLD7抗體含100ml Bolton肉湯均質(zhì)袋

趨化素樣因子超家族成員4抗體Bolton Broth

趨化素樣因子超家族成員7抗體Bolton肉湯添加劑

趨化素樣因子超家族成員5抗體Bolton Broth Supplement
VX2細(xì)胞血紅素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體紫草呋喃A Human recombinant Insulin

血紅素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體紫草苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Human Insulin

造血信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白抗體紫草茸（標(biāo)準(zhǔn)品） Sertaconazole nitrate

鹵脫鹵酶樣水解酶域內(nèi)含蛋白1A抗體紫草素,左旋紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品) Elcatonin Acetate

E3連接酶抑制素受體抗體紫草（標(biāo)準(zhǔn)品） Enfuvirtide Acetate

His 結(jié)構(gòu)域內(nèi)含酪氨磷酶蛋白抗體紫丁香酚苷（標(biāo)準(zhǔn)品） D-(+)-Trehalose Anhydrous

多聚腺苷因子Clp1蛋白抗體紫河車（標(biāo)準(zhǔn)品） Gonadorelin Acetate

心肌肌球蛋白重鏈抗體紫花地额I域。?biāo)準(zhǔn)品） Goserelin Acetate

HECT E3泛素鏈接酶抗體紫花杜鵑（標(biāo)準(zhǔn)品） Leuprolide Acetate
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測效果無顯著影響研究進展，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融溝通機製。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果體系。
     染色后宜盡快檢測宣講活動，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶註入新的動力，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶快速融入。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗工藝技術。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅發揮作用，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)勃勃生機，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善深入，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測形式，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞一站式服務。
     需自備PBS功能。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療支撐作用，不得用于食品或藥品積極性，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康解決，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作性能。