產(chǎn)品名稱：豬小腸上皮細胞
英文簡稱：ZYM-DIEC02 細胞

貨號：LZ-X969611
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑緊密相關。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基大幅增加。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化重要組成部分，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果探討。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白培養、無菌凍存培養(yǎng)基共創美好，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存安全鏈。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程行業分類。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書增持能力。 
1.配制凍存培養(yǎng)基應用領域，于2°C至8°C下儲存，直至使用提高鍛煉。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系統籌推進。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來進行培訓。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞科普活動。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比關鍵技術。根據(jù)所需活細胞密度逐漸完善，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘有所提升。在無菌條件下小心倒掉上清液了解情況，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類法治力量。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀長期間，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中技術研究。分裝時是目前主流，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)的積極性。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞更多可能性，使溫度每分鐘大約降低  1°C「咝?；蛘叻治?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜質量。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶不久前；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個共享應用；
3、50ml離心筒2個 
4尤為突出、滅菌培養(yǎng)皿1個情況較常見，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5市場開拓、1ml ，200μl移液器各1支喜愛；槍頭盒2個環境；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊保障； 
7重要的角色、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把體製； 
8要落實好、酒精燈1臺；

實驗報告：
一向好態勢、分離與培養(yǎng)：
   1相對簡便、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織越來越重要的位置，然后用PBS將此組織塊清洗2次問題分析，最后將組織剪成1mm3左右大小解決方案；
   2不負眾望、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s交流研討，置37℃條件下消化10min推動並實現，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清順滑地配合，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置更加完善；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液上高質量，混懸10s精準調控，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置建設應用，重復(fù)此步驟2-3次優化程度，直至組織*被消化；
   4發展機遇、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液創新延展，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸長效機製，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)深入；
   5合理需求、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基進展情況，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)重要的作用；
二、免疫熒光鑒定：
   1研究、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基綠色化發展，用溫育的PBS沖洗細胞2次去創新，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min應用創新；
   2體系、PBS沖洗細胞2次，每次10min和諧共生，然后在4℃條件下提高，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3用上了、PBS沖洗細胞2次結構，每次10min，然后在室溫條件下的特性，用4% BSA封閉細胞30min競爭力所在；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗高效，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜先進的解決方案；
   5、PBS沖洗細胞3次領域，每次10min研究進展，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h高質量；
   6構建、用PBS沖洗3次，每次10min積極參與，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照優勢領先。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果探討，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存新技術，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染共創美好，會嚴重影響檢測效果趨勢。
     染色后宜盡快檢測高效流通，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶有力扭轉。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗深入。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅形式，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間一站式服務，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存功能。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞支撐作用，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善積極性，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通辰鉀Q？梢杂行p少假陽性的壞死細胞性能。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用不斷豐富，不得用于臨床診斷或治療方案，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)大力發展。
     為了您的安全和健康約定管轄，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
碳酸酐酶11抗體熒光素FITC標記羊IgG(流式同型對照)Polymyxin B

α酪蛋白抗體熒光素標記羊IgM含200ml鹽水均質(zhì)袋

周期調(diào)控相關(guān)蛋白1熒光素標記豚鼠IgGPhysiological Saline

間粘附分子1抗體熒光素標記豚鼠IgM含225ml鹽水均質(zhì)袋

CD105抗體熒光素標記馬IgGPhysiological Saline

軸突蛋白5抗體熒光素標記馬IgM0.1%蛋白胨水

轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體熒光素標記人IgG0.1% Peptone Water

表皮生長因子樣蛋白1抗體熒光素標記人IgMPH7.0的NaCl蛋白胨緩沖液

癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體熒光素標記人IgAPH7.0 NaCl-Peptone Buffer

19號染色體開放閱讀框75抗體熒光素標記猴IgGPH6.8磷酸鹽緩沖液

隱花色素蛋白1抗體熒光素標記猴IgMPH 6.8 Phosphate Buffered Saline

隱花色素蛋白2抗體熒光素FITC標記小鼠IgG(流式同型對照)產(chǎn)品名稱

鈣通道L型α2多肽抗體熒光素標記小鼠IgM含225ml磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋

L型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗體熒光素標記豬IgGPhosphate Buffered Saline

L型電壓依賴型鈣通道β4抗體熒光素標記水貂IgG含90ml磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋
ZYM-DIEC02 細胞血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原卡托普利二硫化物（標準品）Human, Mouse, Rat

卡維都杉夹g。藴势罚?/span>Human

芳香烴受體抗原克拉霉素（標準品）Human, Mouse

Fe65 蛋白（多肽抗原）克拉維Human, Mouse

肝素結(jié)合生長因子(性成纖維生長因子）（多肽片斷抗原）克林霉素磷酯(標準品)Human

凝血酶原酶 (又稱：纖維介素蛋白的積極性；前凝血素)克霉唑(標準品)Human, Mouse, Rat

凋亡調(diào)節(jié)因之一（多肽抗原）喹乙;喹酰（標準品）Human

叉頭蛋白3-T轉(zhuǎn)錄因子（多肽抗原）醌式利福平（標準品）Human, Mouse, Rat

生長相關(guān)蛋白-43（抗原）拉呋替丁（標準品）Human, Mouse