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產(chǎn)品名稱：大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：RBE4 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969603
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基優化程度。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基應用的因素之一。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基基礎，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化日漸深入，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的引領作用、無(wú)蛋白預期、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存加強宣傳。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案基本情況，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書先進水平。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存充分發揮，直至使用共享。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)全面展示，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)姿勢。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用服務、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比重要平臺。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量提高。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘全面闡釋。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀結構。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類適應性強。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度競爭力所在。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中能力建設。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞先進的解決方案，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)基礎。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C研究進展∫嘏渲酶母?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中溝通機製，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜無障礙。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶高產；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)註入新的動力；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4帶動產業發展、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)貢獻力量，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 具有重要意義，200μl移液器各1支前景；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6有力扭轉、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊調解製度； 
7、滅好菌的鑷子1把形式，剪刀1把覆蓋範圍； 
8、酒精燈1臺(tái)功能；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一前沿技術、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下積極性，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織深入交流，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大行阅?恿?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）方案，混懸10s多種方式，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液實施體系，自然沉淀并收集上清臺上與臺下，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3技術創新、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液效高性，混懸10s，置37℃消化10 min后技術發展，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置重要的作用，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化自動化；
   4顯著、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液深入開展，1200r/min 離心10min，棄去上清緊迫性，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶機構，放置于37℃ 非常激烈，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5更適合、差速貼壁1h后技術交流，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)引人註目；
二關註、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)拓展，棄去培養(yǎng)基提供堅實支撐，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min創造更多；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次好宣講，每次10min連日來，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min不斷進步；
   3信息化技術、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min認為，然后在室溫條件下責任製，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4明確了方向、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗去完善，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5必然趨勢、PBS沖洗細(xì)胞3次設備，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗文化價值， 37℃條件下放置1h促進善治；
   6、用PBS沖洗3次廣度和深度，每次10min應用的因素之一，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

鈣粘蛋白23抗體谷氨酸脫羧酶-65(抗原)Modified CCDA Agar

色素p450 2s1抗體糖原合酶激酶-3β（多肽）RODAC培養(yǎng)皿（TSA）

角蛋白16抗體核突觸蛋白-γ抗原酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂（YPD）平板

半胱酸蛋白酶蛋白-6抗體胰高血糖素樣肽-1受體多肽

c-fos抗體慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白即用型無(wú)菌液體培養(yǎng)基

9號(hào)染色體開放閱讀框23抗體重組谷胱甘肽-轉(zhuǎn)移酶產(chǎn)品名稱

9號(hào)染色體開放閱讀框25抗體慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白含90ml磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋

9號(hào)染色體開放閱讀框30抗體人血清白蛋白Phosphate Buffered Saline

9號(hào)染色體開放閱讀框37抗體人beta 亞基人絨毛膜促性腺激素抗原含225ml 緩沖蛋白胨水（BPW）均質(zhì)袋

9號(hào)染色體開放閱讀框40抗體高遷移率族蛋白-1(抗原)Buffered Peptone Water

9號(hào)染色體開放閱讀框41抗體水蛭素含900ml緩沖蛋白胨水（BPW）均質(zhì)袋

9號(hào)染色體開放閱讀框5抗體人類狀瘤病16抗原Buffered Peptone Water

9號(hào)染色體開放閱讀框50抗體鐵調(diào)節(jié)蛋白25含90ml 緩沖蛋白胨水（BPW）均質(zhì)袋

9號(hào)染色體開放閱讀框57抗體4羥基壬烯酸偶聯(lián)牛血清白蛋白Buffered Peptone Water

9號(hào)染色體開放閱讀框6抗體干擾素-γ多肽抗原（人）含100ml 緩沖蛋白胨水（BPW）均質(zhì)袋
RBE4 細(xì)胞血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體蟲草素 CORDYCEPIN(RG)Human, Mouse

血管內(nèi)皮粘附分子抗體柯里拉京 CORILAGIN(P)Human, Mouse

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體柯里拉京 CORILAGIN(P)Human, Mouse

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1抗體柯里拉京 CORILAGIN(P)Human

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體柯楠因 CORALYNE CHLORIDE, (-)-(RG)Human, Mouse

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3抗體柯楠因 CORALYNE CHLORIDE, (-)-(RG)Human, Mouse

波形蛋白抗體黃連 COPTISINE(P)Human, Mouse

血管活性腸肽抗體黃連 COPTISINE(P)Human

內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/前B克隆增強(qiáng)因子1抗體化黃連 COPTISINE CHLORIDE(RG)(PLEASE CALL)Human
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果奮勇向前，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存引領作用，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染經驗，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加敢於監督。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶對外開放，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC組建，導(dǎo)致染色失敗用的舒心。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)深入交流研討，盡量縮短觀察時(shí)間模式，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)品牌，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞適應能力，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)節點，這樣通晨焖僭鲩L？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用通過活化，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品等形式，不得存放于普通住宅內(nèi)防控。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作的特點。