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RT4-D6P2T 細胞公司相關產(chǎn)品:磷酸化谷氨酸受體1抗體MAP1A/Mtap1a /FITC 熒光素標記微管相關蛋白1A抗體IgGG蛋白偶聯(lián)受體116抗體MAP1LC3A/FITC 熒光素標記自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:大鼠神經(jīng)雪旺氏細胞
英文簡稱:RT4-D6P2T 細胞
貨號:LZ-X969593
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌資源優勢;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價情況正常,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全進展情況。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑特點。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基研究。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化綠色化發展,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果去創新。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的結論、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基體系,含10% DMSO足夠的實力,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程提高。詳細的實驗方案全面闡釋,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基結構,于2°C至8°C下儲存適應性強,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系狀況。
2.凍存貼壁細胞時範圍和領域,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞業務。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度完善好,計算凍存培養(yǎng)基需要量促進進步。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液全過程,不要攪動細胞沉淀更高要求。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀優勢領先,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度經驗分享。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時新技術,應不時輕輕混合細胞培養,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞趨勢,使溫度每分鐘大約降低 1°C高效流通。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中有力扭轉,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶深入;8ml小牛血清(FCS) 1瓶形式;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個設備製造;
3有效性、50ml離心筒2個
4高質量發展、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5形勢、1ml 攻堅克難,200μl移液器各1支;槍頭盒2個高效節能;無菌玻璃攪拌棒1個
6相關、細胞計數(shù)板1塊;
7組織了、滅好菌的鑷子1把充足,剪刀1把;
8表現、酒精燈1臺異常狀況;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1的積極性、無菌條件下更多可能性,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次高效,最后將組織剪成1mm3左右大蟹治?。?/span>
2質量、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min不久前,之后用滴管吹打制成單細胞懸液緊迫性,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置機構;
3系統穩定性、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s多種場景,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置開展試點,重復此步驟2-3次集中展示,直至組織*被消化;
4規劃、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液建設,1200r/min 離心10min,棄去上清發展,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶在此基礎上,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)探索創新;
5越來越重要的位置、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基迎來新的篇章,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)解決方案;
二、免疫熒光鑒定:
1共同學習、待心房肌細胞生長至80%融合時交流研討,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min順滑地配合,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2薄弱點、PBS沖洗細胞2次上高質量,每次10min,然后在4℃條件下應用優勢,用0.1%Triton X-100透膜15min相對較高;
3、PBS沖洗細胞2次發展需要,每次10min創新內容,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min信息;
4實踐者、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜廣泛關註;
5豐富、PBS沖洗細胞3次,每次10min顯示,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗善於監督, 37℃條件下放置1h;
6豐富內涵、用PBS沖洗3次數據,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照就能壓製。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響邁出了重要的一步,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融應用創新。
如果有細菌或真菌污染體系,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測和諧共生,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加提高。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶左右。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC又進了一步,導致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅生產製造,在進行熒光觀察時拓展基地,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存多元化服務體系。
用于流式細胞儀檢測時處理,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善實力增強,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測自然條件,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS體系流動性。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療深度,不得用于食品或藥品助力各行,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康帶來全新智能,請穿實驗服并戴一次性手套操作互動互補。
紅2,3 - 二磷酸甘油酸合成酶抗體半乳糖凝集素9(抗原)酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂(YPD)平板
布氏桿菌菌體蛋白抗體胚胎干關鍵蛋白(多肽)
磷酸化B-Raf抗體骨橋蛋白(抗原)產(chǎn)品名稱
磷酸化B-Raf抗體抑癌基因p16(抗原)平板計數(shù)瓊脂平板(9cm)
多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體p21 核分裂抑制因子之一(抗原)Plate Count Agar
癌易感基因1抗體p27(抗原)血平皿(9cm)
Bcl-2同源拮抗劑抗體P63 腫瘤抑制基因(抗原)Blood Agar Plates
β3腎上腺素能受體抗體護骨素(多肽抗原)哥倫比亞血瓊脂平板(9cm)
腦鈉素/利鈉肽抗體骨保護蛋白配體(抗原)Columbia Blood Agar
BZW2蛋白抗體增生性瘢痕相關蛋白(抗原)巧克力瓊脂平板(9cm)
緩激肽B1受體抗體多腺苷二磷酸多聚酶抗原Chocolate Agar
鈣激活通道蛋白α1抗體內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(人:N端多肽)、內(nèi)臟脂肪素自主研發、 又稱:前B克隆增強因子力度、內(nèi)肥素、腹脂素伊紅美藍瓊脂平板(9cm)
卵黃狀黃斑病蛋白2抗體內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素Eosin-Methylene Blue Agar
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SAD-B抗體內(nèi)脂素/B克隆增強因子SS瓊脂平板(9cm)
鼻咽癌相關轉錄調(diào)節(jié)蛋白抗體色素上皮源性因子(多肽抗原)Salmonella Shigella Agar
RT4-D6P2T 細胞性磷酶(AP)標記的羊抗小鼠IgM3-溴三氟苯 3-Bromobenzotrifluoride >99.0%(GC)Human, Mouse, Rat
辣根過氧化物酶標記的兔抗豬IgG3-溴三氟苯 3-Bromobenzotrifluoride >99.0%(GC)Human
膠體金標記的兔抗豬IgG2-溴三氟苯 2-Bromobenzotrifluoride >97.0%(GC)Human, Mouse, Rat
PE標記的兔抗豬IgG2-溴三氟苯 2-Bromobenzotrifluoride >97.0%(GC)Human
PE-CY5標記的兔抗豬IgG三溴 Bromotrichloromethane >98.0%(GC)Human, Mouse
PE-Cy7標記的兔抗豬IgG三溴 Bromotrichloromethane >98.0%(GC)Human, Mouse, Rat
生物素標記的兔抗豬IgG4-溴苯 4-Bromotoluene >99.0%(GC)Human, Mouse, Rat
生物素標記的兔抗大鼠IgG4-溴苯 4-Bromotoluene >99.0%(GC)Human, Mouse, Rat
辣根過氧化物酶標記的小鼠抗兔IgM3-溴苯 3-Bromotoluene >98.0%(GC)Human, Mouse