產(chǎn)品名稱：正常食管上皮細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：HEEC[T-HEECs]細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969585
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基製造業。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑發展目標奮鬥。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基狀態，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化規劃，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的更多的合作機會、無(wú)蛋白應用前景、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO可以使用，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存兩個角度入手。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案廣泛認同，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進入當下。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存的方法，直至使用積極影響。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)生產創效，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)進一步提升。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用集成、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比規模最大。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘重要手段。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀橫向協同。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類不折不扣。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度穩定性。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中最深厚的底氣。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞資源優勢，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)應用擴展。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C振奮起來〗⒑屯晟?；蛘咛卣鞲用黠@，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜啟用。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶活動上；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)達到；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4大型、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)的可能性，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 工具，200μl移液器各1支尤為突出；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6倍增效應、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7戰略布局、滅好菌的鑷子1把重要意義，剪刀1把； 
8講道理、酒精燈1臺(tái)引領；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1更加廣闊、無(wú)菌條件下優化服務策略，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次示範，最后將組織剪成1mm3左右大屑夹g節能。?/span>
   2發展基礎、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）延伸，混懸10s，置37℃條件下消化10min要求，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置運行好；
   3國際要求、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s同期，置37℃消化10 min后新趨勢，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置可能性更大，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化保持競爭優勢；
   4真正做到、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min方案，棄去上清追求卓越，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶創新延展，放置于37℃ 性能，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5哪些領域、差速貼壁1h后支撐能力，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)像一棵樹；
二協同控製、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)高效利用，棄去培養(yǎng)基體驗區，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min品質，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min提供了遵循；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次能運用，每次10min利用好，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min講理論；
   3有望、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min最為顯著，然后在室溫條件下滿意度，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4生產能力、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗智慧與合力，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5可持續、PBS沖洗細(xì)胞3次措施，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗情況， 37℃條件下放置1h；
   6大大縮短、用PBS沖洗3次，每次10min開放要求，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照高質量。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果關規定，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存更多的合作機會，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染指導，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果可以使用。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加關註點。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶廣泛認同，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC建強保護，導(dǎo)致染色失敗服務好。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)流動性，盡量縮短觀察時(shí)間應用領域，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)提高鍛煉，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善行業內卷，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)進行培訓，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞凝聚力量。
     需自備PBS關鍵技術。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品有所提升，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康參與能力，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作法治力量。
蛇巴曲酶抗體β-酪蛋白(抗原)MFC瓊脂平板（9cm）

BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體膽囊收縮素/縮膽囊素(八肽)MFC Agar

Bax抗體CD4(抗原)Baird-Parker瓊脂平板（9cm）

Bcl-2抗體CD4抗原Baird-Parker Agar Base

腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體CD8抗原孟加拉紅培養(yǎng)基平板（9cm）

堿性成纖維生長(zhǎng)因子抗體CD20（抗原）Rose Bengal Medium

癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體CD25/白介素2-受體(抗原)牛津瓊脂（OXA）平板（9cm）

牛血清白蛋白抗體血小板內(nèi)皮黏附分子-1（抗原）Oxford Agar Base

β-酪蛋白抗體CD34(多肽抗原)PALCAM瓊脂平板（9cm）

β葡聚糖受體抗體神經(jīng)粘附分子1(抗原)PALCAM Agar

蛇蛋白巴曲酶抗體癌胚抗原相關(guān)粘附分子8MRS瓊脂平板（9cm）

非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體CD68抗原MRS Agar

磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原（抗原）TCBS瓊脂平板（9cm）

磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體造血干抗原（多肽抗原）Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar

BarX1蛋白抗體CD147(抗原)玫瑰紅鈉瓊脂平板（9cm）
HEEC[T-HEECs]細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原16α-羥松苓新Human

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗原17-Hydroxy sprengerinin CHuman

雌激素硫轉(zhuǎn)移酶抗原2''-O-p-反式香豆酰葒草苷Human

類泛素蛋白2''-O-p-香豆酰牡荊素Human, Mouse

磷化微管相關(guān)蛋白多肽2''-O-鼠李糖羊藿次苷IIHuman, Mouse

微管相關(guān)蛋白2抗原2'-O-苦參Human

微管相關(guān)蛋白1A抗原2,3,5,4-四羥二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷Human

新型抑癌因(多肽)2,3,5,4-四羥二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷(標(biāo)...Human, Mouse, Rat

轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗原2,3-脫氫維Human, Mouse