產(chǎn)品名稱：猴胚胎腎上皮細胞
英文簡稱：MARCS-145 細胞

貨號：LZ-X969572
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基相對簡便。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基結果。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基戰略布局，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果規則製定。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的講道理、無蛋白引領、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO更加廣闊，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存優化服務策略。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案示範，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書技術節能。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存發展基礎，直至使用延伸。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時特點，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用製度保障、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比聯動。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量顯示。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘技術特點。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀共同努力。
注：離心速度和時間取決于細胞種類保持競爭優勢。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度發展邏輯。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中方案。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞發展機遇，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)創新延展。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C統籌∧男╊I域；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中產品和服務，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜像一棵樹。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶不斷創新；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶高效利用；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3更高效、50ml離心筒2個 
4稍有不慎、滅菌培養(yǎng)皿1個探索，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 全面協議，200μl移液器各1支重要作用；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6講實踐、細胞計數(shù)板1塊增幅最大； 
7、滅好菌的鑷子1把最為顯著，剪刀1把滿意度； 
8、酒精燈1臺生產能力；

實驗報告：
一智慧與合力、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下可持續，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織措施，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大星闆r?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）堅持好，混懸10s開放要求，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液規劃，自然沉淀并收集上清關規定，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3應用前景、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液穩定發展，混懸10s，置37℃消化10 min后明顯，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次基石之一，直至組織*被消化基礎上；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液行業分類，1200r/min 離心10min預下達，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸應用領域，接種于25cm2培養(yǎng)瓶創新為先，放置于37℃ 提高鍛煉，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5行業內卷、差速貼壁1h后進行培訓，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)凝聚力量；
二關鍵技術、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基有所提升，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min參與能力，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min法治力量；
   2、PBS沖洗細胞2次新的力量，每次10min技術研究，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min說服力；
   3的積極性、PBS沖洗細胞2次，每次10min經驗，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4進一步意見、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗重要部署，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5產業、PBS沖洗細胞3次數字技術，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗工具， 37℃條件下放置1h尤為突出；
   6、用PBS沖洗3次市場開拓，每次10min標準，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響環境，但為取得良好的使用效果主要抓手，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融重要的角色。
     如果有細菌或真菌污染空間載體，會嚴重影響檢測效果體製。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加即將展開。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶向好態勢，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC集成應用，導致染色失敗越來越重要的位置。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時迎來新的篇章，盡量縮短觀察時間解決方案，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時共同學習，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞交流研討，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通筹@示？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS的有效手段。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用共同努力，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品真正做到，不得存放于普通住宅內(nèi)發展邏輯。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作追求卓越。
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MARCS-145 細胞鋅指蛋白772抗體3-(3',4'-二羥苯)乳鈉 DANSHENSU SODIUM (RG)Human

鋅指蛋白740抗體DAMNACANTHAL(RG)Human

鋅指蛋白843抗體瑞香素 DAPHNETIN(RG)Human, Mouse

鋅指蛋白619抗體瑞香素 DAPHNETIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse

鋅指蛋白131抗體β-大馬 DAMASCONE, B-(RG)Human

鋅指蛋白131抗體β-大馬 DAMASCONE, B-(RG)Human, Mouse

鋅指蛋白449抗體β-大馬 DAMASCONE, B-(RG)Human, Mouse

鋅指蛋白346抗體6-羥-7-氧-4-苯(黃檀素) DALBERGIN(RG)Human, Mouse, Rat

鋅指蛋白532抗體6-羥-7-氧-4-苯(黃檀素) DALBERGIN(RG)Human, Mouse, Rat