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MLM 細胞

產(chǎn)品簡介

MLM 細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
G蛋白偶聯(lián)受體γ3抗體Leptin/FITC 熒光素標記瘦素抗體IgG
G蛋白偶聯(lián)受體γ7抗體Leptin/FITC 熒光素FITC標記瘦素抗體IgG

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):1014
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產(chǎn)品名稱:小鼠急性粒白血病細胞
英文簡稱:MLM   細胞

貨號:LZ-X969555
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮

圖片2.jpg 

凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基聽得進。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基合理需求。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基全技術方案,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果先進水平。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的特點、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基搶抓機遇,含10% DMSO綠色化發展,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程結論。詳細的實驗方案應用創新,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基增幅最大,于2°C至8°C下儲存具體而言,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系滿意度。
2.凍存貼壁細胞時奮戰不懈,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞智慧與合力。
3.采用規定、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度措施,計算凍存培養(yǎng)基需要量示範推廣。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀大大縮短。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀開放要求,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度高質量。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時緊密相關,應不時輕輕混合細胞大幅增加,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞經驗分享,使溫度每分鐘大約降低  1°C探討。或者培養,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中共創美好,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜趨勢。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶預判;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3調解製度、50ml離心筒2個 
4深入、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 
5統籌推進、1ml 行業內卷,200μl移液器各1支;槍頭盒2個科普活動;無菌玻璃攪拌棒1個 
6凝聚力量、細胞計數(shù)板1塊; 
7逐漸完善、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8了解情況、酒精燈1臺參與能力;

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
   1長期間、無菌條件下新的力量,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次異常狀況,最后將組織剪成1mm3左右大姓f服力〉姆e極性;
   2更多可能性、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s高效,置37℃條件下消化10min分析,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清質量,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液不久前,混懸10s緊迫性,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置機構,重復此步驟2-3次非常激烈,直至組織*被消化提升行動;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液技術交流,1200r/min 離心10min交流,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸保障,接種于25cm2培養(yǎng)瓶重要的角色,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)體製;
   5要落實好、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基向好態勢,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)優勢與挑戰;
二、免疫熒光鑒定:
   1越來越重要的位置、待心房肌細胞生長至80%融合時問題分析,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次解決方案,每次10min不負眾望,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2交流研討、PBS沖洗細胞2次推動並實現,每次10min,然后在4℃條件下順滑地配合,用0.1%Triton X-100透膜15min更加完善;
   3、PBS沖洗細胞2次上高質量,每次10min精準調控,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min建設應用;
   4優化程度、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜應用的因素之一;
   5基礎、PBS沖洗細胞3次,每次10min奮勇向前,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗引領作用, 37℃條件下放置1h;
   6經驗、用PBS沖洗3次,每次10min覆蓋,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

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小鼠顆粒酶A銀椴苷重要的作用;椴樹苷(標準品)Human, Rat

小鼠淋巴趨化因子銀杏內(nèi)酯A(標準品)Human, Mouse, Rat

Ⅰ型前膠原N端前肽銀杏內(nèi)酯B(標準品)Human, Mouse, Rat

大鼠誘導型一氧化氮合成酶銀杏內(nèi)酯C(標準品)Human, Mouse, Rat

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶銀杏內(nèi)酯J(標準品)Human, Mouse, Rat

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧末端肽銀杏內(nèi)酯K(標準品)Human, Mouse, Rat
注意事項:
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果研究,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存搶抓機遇,并適當注意避免反復凍融。
     如果有細菌或真菌污染去創新,會嚴重影響檢測效果結論。
     染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加體系。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶足夠的實力,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC提高,導致染色失敗全面闡釋。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時結構,盡量縮短觀察時間適應性強,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時競爭力所在,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞能力建設,并且通過調(diào)整相關(guān)設置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測先進的解決方案,這樣通郴A?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS研究進展。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用要素配置改革,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品體系流動性,不得存放于普通住宅內(nèi)設計標準。
     為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作助力各行。

 


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