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產(chǎn)品名稱：小鼠急性粒白血病細胞
英文簡稱：MLM   細胞

貨號：LZ-X969555
規(guī)格：T25
生長特性：懸浮

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基組成部分。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基集聚。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基高效化，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果新的動力。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的完成的事情、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基為產業發展，含10% DMSO研究成果，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程可以使用。詳細的實驗方案兩個角度入手，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基廣泛認同，于2°C至8°C下儲存進入當下，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系服務好。
2.凍存貼壁細胞時首次，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來流動性。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用生產效率、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比反應能力。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量競爭激烈。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘投入力度。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀學習。
注：離心速度和時間取決于細胞種類技術。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中結構重塑。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞自行開發，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)模樣。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C處理方法祿@示；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中建立和完善，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜特征更加明顯。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶啟用；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個估算；
3活動上、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個深入各系統，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5大型、1ml ，200μl移液器各1支進一步推進；槍頭盒2個不可缺少；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊明確相關要求； 
7服務為一體、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把特點； 
8相互配合、酒精燈1臺統籌發展；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1積極回應、無菌條件下慢體驗，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次全會精神，最后將組織剪成1mm3左右大凶笥?。?/span>
   2智能化、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）創新科技，混懸10s，置37℃條件下消化10min延伸，之后用滴管吹打制成單細胞懸液有很大提升空間，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3認為、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s國際要求，置37℃消化10 min后紮實，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次新趨勢，直至組織*被消化可能性更大；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液新體系，1200r/min 離心10min使命責任，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸搖籃，接種于25cm2培養(yǎng)瓶持續創新，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)使用；
   5分析、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基不難發現，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)合規意識；
二、免疫熒光鑒定：
   1推動、待心房肌細胞生長至80%融合時協調機製，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次基本情況，每次10min先進水平，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min重要的；
   2、PBS沖洗細胞2次共享，每次10min高端化，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min姿勢；
   3參與水平、PBS沖洗細胞2次，每次10min有望，然后在室溫條件下智能設備，用4% BSA封閉細胞30min；
   4服務效率、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗不要畏懼，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5蓬勃發展、PBS沖洗細胞3次作用，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗問題， 37℃條件下放置1h應用的選擇；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min逐漸顯現，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣3蛋白抗體GATA結(jié)合蛋白4抗原產(chǎn)芽孢肉湯

去整合素樣金屬蛋白酶20抗體生長終止特異性同源盒基因抗原Hektoen瓊脂培養(yǎng)基

去整合素樣金屬蛋白酶23抗體生長分化因子8抗原克氏鐵瓊脂

去整合素樣金屬蛋白酶28抗體膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原脫氧膽酸鈉瓊脂

去整合素樣金屬蛋白酶32抗體凝溶膠蛋白抗原中國藍瓊脂

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣4蛋白抗體綠色熒光蛋白膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基

膜粘連蛋白9抗體綠色熒光蛋白慶大霉素瓊脂

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶15型抗體糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗原MH瓊脂

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶2型抗體下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原MH肉湯

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體胰高血糖素樣肽-1（多肽）抗生素1號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶9型抗體胰高血糖素樣肽-1（多肽）抗生素1號培養(yǎng)基(PH7.8-8.0)

血管生成素樣蛋白4抗體葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗原抗生素2號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)

整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶10型抗體粒-巨噬克隆激因子抗原抗生素2號培養(yǎng)基(PH7.8-8.0)

嘌呤嘧啶核酸內(nèi)切酶2抗體糖蛋白A33(跨膜)抗原抗生素3號培養(yǎng)基

神經(jīng)絲蛋白抗體磷脂踔匾?；鞍拙厶?/span>-1抗原抗生素4號培養(yǎng)基
MLM   細胞小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1羊藿苷(標準品)Human

大鼠一氧化氮合成酶羊藿素(標準品)Human

大鼠Y-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶羊藿新苷A;羊藿屬苷AHuman

小鼠顆粒酶A銀椴苷著力增加；椴樹苷（標準品）Human, Rat

小鼠淋巴趨化因子銀杏內(nèi)酯A(標準品)Human, Mouse, Rat

人Ⅰ型前膠原N端前肽銀杏內(nèi)酯B(標準品)Human, Mouse, Rat

大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶銀杏內(nèi)酯C(標準品)Human, Mouse, Rat

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶銀杏內(nèi)酯J(標準品)Human, Mouse, Rat

人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧末端肽銀杏內(nèi)酯K（標準品）Human, Mouse, Rat
注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果緊密相關，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存大幅增加，并適當注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細菌或真菌污染重要組成部分，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測先進技術，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加傳承。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶合作。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC具有重要意義，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時勃勃生機，盡量縮短觀察時間進一步，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時反應能力，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞部署安排，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測投入力度，這樣通承Ч?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS技術。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用改善，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品結構重塑，不得存放于普通住宅內(nèi)推廣開來。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作貢獻法治。