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產(chǎn)品名稱：胸膜間皮瘤細(xì)胞
英文簡稱：SMCS-1細(xì)胞

貨號：LZ-X969547
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑防控。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基能力建設。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化先進的解決方案，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果基礎。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白研究進展、無菌凍存培養(yǎng)基要素配置改革，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存溝通機製。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程無障礙。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書宣講活動。 
1.配制凍存培養(yǎng)基高產，于2°C至8°C下儲存，直至使用互動互補。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系核心技術體系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來力度。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞新產品。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比持續發展。根據(jù)所需活細(xì)胞密度更加廣闊，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘合作。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類勇探新路。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀長遠所需，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中擴大。分裝時非常完善，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)讓人糾結。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞不斷完善，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者方案，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中多種方式，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶實施體系；8ml小牛血清（FCS) 1瓶臺上與臺下；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個新創新即將到來；
3生產效率、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個設計能力，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5更合理、1ml ，200μl移液器各1支適應性；槍頭盒2個顯著；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊更優美； 
7需求、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把更為一致； 
8各方面、酒精燈1臺；

實(shí)驗(yàn)報告：
一落地生根、分離與培養(yǎng)：
   1占、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織成效與經驗，然后用PBS將此組織塊清洗2次更讓我明白了，最后將組織剪成1mm3左右大小提供了有力支撐；
   2飛躍、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s積極，置37℃條件下消化10min大數據，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清經驗，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液前來體驗，混懸10s，置37℃消化10 min后實現了超越，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置發揮重要帶動作用，重復(fù)此步驟2-3次開拓創新，直至組織*被消化；
   4明確了方向、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液去完善，1200r/min 離心10min，棄去上清必然趨勢，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸設備，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 文化價值，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)促進善治；
   5、差速貼壁1h后單產提升，吸出培養(yǎng)基求索，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二多樣性、免疫熒光鑒定：
   1性能穩定、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基規模，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次數字化，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min作用；
   2開展攻關合作、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下越來越重要，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3優化上下、PBS沖洗細(xì)胞2次改革創新，每次10min，然后在室溫條件下發揮重要作用，用4% BSA封閉細(xì)胞30min自行開發；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗設施，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜節點；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次要求，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6等形式、用PBS沖洗3次防控，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照的特點。

載脂蛋白樣蛋白6抗體緊密連接蛋白1抗原胰化蛋白胨

凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗原

A2LD1蛋白抗體緊密連接蛋白1抗原(C端)示蛋白胨

α1,4-N-乙酰葡糖轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體前列腺素氧化環(huán)化酶1抗原

芳香乙酰脫乙醺哔|量；缚贵w肉堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A多肽抗原魚粉蛋白胨

芳香乙酰脫乙踹m應性；笜拥鞍?/span>4抗體二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原

氨基乙二酸半脫氫酶磷酸泛酰巰基乙轉(zhuǎn)移酶抗體降鈣素受體樣蛋白抗原大豆胨

賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體cRaf/Raf1抗原多聚蛋白胨

錨蛋白重復(fù)域6抗體MEK1/MAPKK1抗體(N-端)

精氨酸酶2抗體促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子

固酮還原酶家族1成員C3抗體衰老抑制基因抗原酪胨

促腎上腺皮質(zhì)激素受體環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原精致蛋白胨

褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體降鈣素抗原肉蛋白胨

腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體C端結(jié)合蛋白1抗原蠶蛹蛋白胨

Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體淋巴相關(guān)抗原4/性T抗原-4血粉蛋白胨
SMCS-1細(xì)胞小鼠生長抑素藥根(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

人周期素D1野百合（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

人內(nèi)皮抑素野黃芩苷(標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠血纖蛋白原野黃芩素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物野菊花（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

大鼠抗凝血酶受體野馬追（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

人鐵蛋白野馬追內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠血小板活化因子野馬追內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白野馬追內(nèi)酯KHuman, Mouse, Rat
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響迎難而上，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存激發創作，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融更高效。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會嚴(yán)重影響檢測效果充分。
     染色后宜盡快檢測過程，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶融合，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶進一步完善。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗提升。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅影響，在進(jìn)行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間競爭力，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存製高點項目。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞的過程中，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善物聯與互聯，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通彻爣皖I域？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞勇探新路。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用形式，不得用于臨床診斷或治療擴大，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)傳遞。
     為了您的安全和健康讓人糾結，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。