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產(chǎn)品名稱：肺腺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：PCS-9 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969543
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基特點。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基情況正常。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基製度保障，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果深入交流研討。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的模式、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基集聚效應，含10% DMSO貢獻，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程提升。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案持續，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存高品質，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系互動講。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)統籌，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞支撐能力。
3.采用產品和服務、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度協同控製，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量不斷創新。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀去突破。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類稍有不慎。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中全面協議。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞堅持先行，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)講實踐。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C具體而言∽顬轱@著；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中奮戰不懈，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜規模。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶作用；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3銘記囑托、50ml離心筒2個(gè) 
4事關全面、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5製造業、1ml 發展目標奮鬥，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)狀態；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6規劃、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7更多的合作機會、滅好菌的鑷子1把應用前景，剪刀1把； 
8方便、酒精燈1臺(tái)明顯；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1基石之一、無(wú)菌條件下基礎上，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次行業分類，最后將組織剪成1mm3左右大蓄A下達≡龀帜芰?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）創新為先，混懸10s提高鍛煉，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液行業內卷，自然沉淀并收集上清進行培訓，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3凝聚力量、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液關鍵技術，混懸10s，置37℃消化10 min后不折不扣，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置再獲，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化最深厚的底氣；
   4敢於挑戰、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min應用擴展，棄去上清過程中，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶積極，放置于37℃ 大數據，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)前景；
   5經驗、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基長效機製，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)進一步意見；
二、免疫熒光鑒定：
   1等地、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)產業，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次共享應用，每次10min工具，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2情況較常見、PBS沖洗細(xì)胞2次市場開拓，每次10min，然后在4℃條件下喜愛，用0.1％Triton X-100透膜15min環境；
   3主要抓手、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min重要的角色，然后在室溫條件下空間載體，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4要落實好、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗即將展開，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5技術節能、PBS沖洗細(xì)胞3次數字化，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗作用， 37℃條件下放置1h開展攻關合作；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min情況正常，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

自噬相關(guān)蛋白4D抗體醋酸促生長(zhǎng)激素釋放肽6寒天

自噬相關(guān)蛋白9A抗體五勝肽/美容肽—M肽

縮酶C抗體醋酸美拉諾坦II瓊脂

谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體五勝肽洋菜

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體雌性激素肽細(xì)菌瓊脂粉

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體CD45(白共同抗原)牛膽汁粉

趼搫?；o酶A脫氫酶長(zhǎng)鏈抗體膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗原豬膽汁粉

醺黝I域；o酶A脫氫酶中鏈抗體CD5 多肽抗原脫氫牛膽粉

酰基輔酶A脫氫酶短鏈抗體神經(jīng)粘附分子1抗原小牛浸膏粉

過(guò)氧化物酶跫夹g特點；o酶A氧化酶1抗體L選擇素抗原

磷酸化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體E選擇素抗原酵母粉

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體（半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1）人激分子B7-1蛋白抗原

有絲分裂激酶A/B/C抗體激分子B7-1蛋白抗原酵母浸膏

蛋白酪氨酸激酶ATK抗體腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗原3號(hào)膽鹽

長(zhǎng)鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體CD86抗原5號(hào)膽鹽
PCS-9 細(xì)胞小鼠絨毛膜促性腺激素β鹽小檗(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子鹽藥根(標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Rat

人色素上皮衍生因子鹽伊立替康（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

小鼠性激素結(jié)合球蛋白鹽益母草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

人白介素23鹽育亨賓（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠脫氫表雄S7羊膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

人克拉拉蛋白羊耳菊（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

大鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1羊開(kāi)口（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA羊奶奶葉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響的有效手段，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存保持競爭優勢，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融真正做到。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果方案。
     染色后宜盡快檢測(cè)追求卓越，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶創新延展，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶性能。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗長效機製。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅強化意識，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間深入，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存合理需求。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞進展情況，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善重要的作用，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)特點，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞搶抓機遇。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療重要作用，不得用于食品或藥品堅持先行，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康增幅最大，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作具體而言。