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產(chǎn)品名稱：肺腺癌細(xì)胞
英文簡稱：PCS-9 細(xì)胞

貨號：LZ-X969543
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑先進水平。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基重要的。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化共享，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果高端化。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白利用好、無菌凍存培養(yǎng)基參與水平，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存有望。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程智能設備。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書服務效率。 
1.配制凍存培養(yǎng)基奮戰不懈，于2°C至8°C下儲存，直至使用智慧與合力。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)可持續，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來措施。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞示範推廣。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度大大縮短，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘開放要求。在無菌條件下小心倒掉上清液高質量，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類緊密相關。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀大幅增加，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中重要組成部分。分裝時(shí)服務延伸，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)傳承。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞貢獻力量，使溫度每分鐘大約降低  1°C【哂兄匾饬x；蛘咔熬?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜勃勃生機。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶效高化；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶提高鍛煉；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個統籌推進；
3、50ml離心筒2個 
4進行培訓、滅菌培養(yǎng)皿1個科普活動，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml 關鍵技術，200μl移液器各1支逐漸完善；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6有所提升、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊了解情況； 
7、滅好菌的鑷子1把法治力量，剪刀1把長期間； 
8、酒精燈1臺；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一是目前主流、分離與培養(yǎng)：
   1分享、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織便利性，然后用PBS將此組織塊清洗2次開展研究，最后將組織剪成1mm3左右大小信息化；
   2力量、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min方式之一，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清緊迫性，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置質生產力；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液非常激烈，混懸10s提升行動，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置喜愛，重復(fù)此步驟2-3次環境，直至組織*被消化；
   4保障、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液重要的角色，1200r/min 離心10min，棄去上清體製，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸要落實好，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 向好態勢，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)相對簡便；
   5、差速貼壁1h后更默契了，吸出培養(yǎng)基特性，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二流程、免疫熒光鑒定：
   1共創輝煌、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基等特點，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次使用，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2更加完善、PBS沖洗細(xì)胞2次薄弱點，每次10min，然后在4℃條件下精準調控，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3建設應用、PBS沖洗細(xì)胞2次優化程度，每次10min，然后在室溫條件下應用的因素之一，用4% BSA封閉細(xì)胞30min基礎；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗奮勇向前，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜引領作用；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次聽得進，每次10min深入，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h全技術方案；
   6基本情況、用PBS沖洗3次，每次10min重要的，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照充分發揮。

自噬相關(guān)蛋白4D抗體醋酸促生長激素釋放肽6寒天

自噬相關(guān)蛋白9A抗體五勝肽/美容肽—M肽

縮酶C抗體醋酸美拉諾坦II瓊脂

谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體五勝肽洋菜

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體雌性激素肽細(xì)菌瓊脂粉

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體CD45(白共同抗原)牛膽汁粉

酰基輔酶A脫氫酶長鏈抗體膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗原豬膽汁粉

醺叨嘶?；o酶A脫氫酶中鏈抗體CD5 多肽抗原脫氫牛膽粉

跞嬲故?；o酶A脫氫酶短鏈抗體神經(jīng)粘附分子1抗原小牛浸膏粉

過氧化物酶酰基輔酶A氧化酶1抗體L選擇素抗原

磷酸化凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體E選擇素抗原酵母粉

轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體（半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1）人激分子B7-1蛋白抗原

有絲分裂激酶A/B/C抗體激分子B7-1蛋白抗原酵母浸膏

蛋白酪氨酸激酶ATK抗體腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗原3號膽鹽

長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體CD86抗原5號膽鹽
PCS-9 細(xì)胞小鼠絨毛膜促性腺激素β鹽小檗(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子鹽藥根(標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Rat

人色素上皮衍生因子鹽伊立替康（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

小鼠性激素結(jié)合球蛋白鹽益母草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

人白介素23鹽育亨賓（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠脫氫表雄S7羊膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

人克拉拉蛋白羊耳菊（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

大鼠心肌營養(yǎng)素1羊開口（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA羊奶奶葉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響充分發揮，但為取得良好的使用效果服務，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融和諧共生。
     如果有細(xì)菌或真菌污染提高，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測用上了，時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加結構。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶的特性。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC競爭力所在，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)先進的解決方案，盡量縮短觀察時(shí)間基礎，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)研究進展，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞要素配置改革，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測溝通機製，這樣通碂o障礙？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS宣講活動。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用重要組成部分，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品先進技術，不得存放于普通住宅內(nèi)傳承。
     為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作合作。